用于血管和肿瘤成像的明亮NIR-II荧光探针

本协议描述了使用NIR-II光学成像装置对小鼠进行详细的实时NIR-II荧光成像操作。

通过近红外到荧光纳米探针实现了高分辨率的血管和肿瘤成像，为指导血管疾病和癌症提供了一种准确有效的方法。NIR-II窗口中的活体成像使我们能够深入研究活体，为生物医学研究和我们的临床应用创造了机会。通过在成像设备的载体中心放置市售的黑色纸板来准备近红外II或NIR-II成像。

然后，将样品放在黑色纸板的顶部，使其位于载体的中心。选择合适的过滤器后，执行平台高度调整。长按托架控制台控制区域触摸屏界面上的平台向上选项以将其向上移动。

并长按平台向下移动。合成NIR-II染料HLY1后，以DSPE-PEG-2K为包封基质，通过纳米沉淀法制备HLY1点。为此，将装有 10 毫克 DSPE-PEG-2K 溶液的烧杯放入 9 毫升水中，在 25 摄氏度下进行超声处理。

然后，将一毫克HLY1溶解在一毫升四氢呋喃或THF中。并将溶液缓慢加入到进行超声处理的DSPE-PEG-2K水溶液中。随后，通过透析从混合物中去除THF。

将上述溶液以7，100G的超滤离心浓缩10分钟后，将其置于4摄氏度的冰箱中以备将来使用。对于体内成像，将HLY1点静脉注射到麻醉小鼠中。三分钟后，继续使用光学NIR-II成像系统对小鼠全身的血管进行NIR-II荧光成像。

进一步关注小鼠的头部以收集脑血管成像。将光学NIR-II成像系统的仪器参数设置为90毫瓦/平方厘米和808纳米激光。在小鼠中注射HLY1点五分钟后收集图像，并使用ImageJ软件处理数据。

含有90%水的90%THF溶液中HLY1的荧光强度是THF溶液的五倍，表明HLY1具有明显的聚集诱导发射或AIE特征。HLY1点在1， 500纳米低通或LP滤波器下发出强烈的荧光信号，证明其适用于NIR-IIb成像。HLY1点的最大吸收和发射波长分别为740纳米和1， 040纳米。

此外，通过动态光散射确定HLY1点的流体动力学尺寸为145纳米。在用HLY1点给药的小鼠中，在1， 500纳米LP滤光片下通过NIR-II成像清楚地识别后肢的脑血管和微血管。此外，荷瘤小鼠的四个T1肿瘤也通过NIR-II成像清晰可见，表明HLY1点的通透性和保留性或EPR效应增强。

所有这些结果表明，HLY1点是一种明亮的NIR-II荧光探针，适用于血管和肿瘤成像。在体内和NIR-II荧光成像下制备水悬浮纳米探针是该过程最重要的部分。