1型糖尿病大鼠伤口模型构建方案

1型糖尿病伤口建模过程的许多细节容易出错，对经验丰富的研究人员而言也是一项艰巨的挑战。因此，有必要采用本方案。

以最简单的方式，该技术可有效模拟慢性糖尿病伤口的一些特征，例如伤口不愈合、再上皮化延迟以及血管生成减少。链脲佐菌素溶液应在配制后立即使用。在制造伤口时，需注意伤口的大小和位置必须加以控制。

首先将链脲佐菌素粉末溶于适量的 0.1 摩尔/升柠檬酸钠缓冲液中，配制成 1% 的溶液，使用药物振荡器振荡 30 秒，随后置于保温箱中。进行 1% 链脲佐菌素溶液腹腔注射时，抓握大鼠，暴露注射部位的腹部皮肤。用浸有 75% 酒精的棉球对注射部位消毒两次，并将大鼠头部置于腹部下方。

将针头与腹中线平行，以45度角插入。然后将针头角度减小至30度，再插入2至3毫米。轻轻回拉针芯，注射链脲佐菌素溶液，然后拔出针头，再用棉签按压。

为测定第3天和第7天上午9:00的因果性血糖水平，需找到尾静脉的位置。采血前用75%酒精对大鼠尾部消毒两次，然后穿刺尾静脉取血，使用血糖仪测量血糖。操作完成后，用棉签按压止血。

在造模前一日，使用电动剃须刀剃除大鼠背部5厘米×5厘米区域的毛发。用温热的生理盐水棉球擦拭剃毛区域，并使其干燥，随后涂抹脱毛膏5分钟。用纱布清洁该区域，并用温热的生理盐水清洗残留的脱毛膏。

然后使用浸有碘液的棉球对背部皮肤消毒两次，再交替使用75%酒精消毒两次。待皮肤干燥后，用直径20毫米的圆形皮肤活检打孔器切割皮肤。用镊子固定皮肤，然后用手术剪沿打孔切口完全切除全层皮肤。

操作完成后，用生理盐水棉球止血。使用凡士林纱布覆盖伤口。所有大鼠在注射链脲佐菌素三天后成功诱导糖尿病，血糖水平高于16.7毫摩尔每升。

诱导后五周，血糖水平趋于稳定。糖尿病组在链脲佐菌素注射后体重逐渐增加，第3周体重下降，随后从第4周开始缓慢回升。

相比之下，正常组大鼠的体重持续稳定增加。在糖尿病诱导三天后，其平均体重高于糖尿病组。在伤口形成后的第7天和第14天进行的大体分析显示，正常组大鼠的再上皮化程度较糖尿病组更为明显。

第7天和第14天的定量结果显示，糖尿病组的伤口愈合率显著低于正常组。然而，在第14天时，糖尿病组的伤口愈合率已超过90%。糖尿病伤口表现出毛囊和皮脂腺的部分缺失，且可见毛细血管较少。

通过CD31免疫染色分析创面血管生成，CD31表达的平均光密度显示，正常组创面部位的血管生成显著高于糖尿病组。建模创面时，应确保去除前肢厚度的皮肤，包括表皮、真皮和皮下组织。