淫羊藿叶羊油加工技术优化及检验其对斑马鱼胚胎发育的影响

在这项研究中，我们采用了一种广泛使用的加工方法，并获得了一种稳定可靠的持久技术。结果表明，加工后的淫羊藿毒性降低。响应面法需要更少的实验和更短的周期，既避免了传统数理统计中存在的问题，又有助于用户选择最优条件。

该方法还可广泛应用于化工、生物工程、食品工业、中药制剂、中药提取等。制备溶液并进行色谱分析后，选择EF处理中的关键参数，如羊油的量，羊油的温度和煎炸的温度作为影响因素。使用淫羊藿苷、EA、EB、EC和BI含量的综合得分作为评价指标。

使用响应面分析软件设计Box-Behnken响应面实验，探索二次响应面，并构建二阶多项式模型。选择新的 Box-Behnken 设计，并将数值因子选项设置为 3。设置因子 A、B 和 C。单击继续，然后将响应选项设置为 1，然后单击继续以完成设计。

根据具体参数处理EF，例如，对于订单号一，精炼羊油按体积的15%体积，然后将其加热到50摄氏度使其融化。将粗EF加入融化的羊肉中。用温和的火翻炒至均匀光泽，然后取出并冷却EF。准备加工产品的测试溶液，并按照手稿中的说明使用HPLC进行分析。

记录每种化学成分的保留时间和峰面积，并根据外部标准曲线计算每种测试溶液中淫羊藿苷、EA、EB、EC和BI的含量。采用综合分数计算公式计算17个实验组的综合得分。将17组实验的综合评分结果导入数据分析软件，对实验数据进行分析。

在评估项下，选择二次处理顺序选项和多项式模型类型选项。与其他供试因子相比，羊油用量和油炸温度的响应面更陡峭，等高线趋于椭圆形，表明这两个因子之间的交互作用比其他因子之间的交互作用更显著。混合对照品、淫羊藿粗品和淫羊藿叶处理品的HPLC色谱图表明，原始EF中的BI含量较低，但加工后增加。

粗品组在150μg/毫升药物浓度下表现出明显的脊柱畸形、身体弯曲、心包水肿和肝脏变形，而加工组幼鱼的这些变化很少见。生药组所有斑马鱼在给药200微克/毫升后24小时死亡，而加工组死亡率仅为6.67%每毫升200微克EF导致生药组所有斑马鱼在72小时后死亡，而在加工组，每毫升EF500微克导致所有斑马鱼死亡。两个实验组在受精后72 h的中位致死浓度显示，粗组LC 50为151.3 μg/毫升，加工组为219.8 μg/毫升。

实验中最重要的是选择响应面法的因子，并确定这些因子的参数。