使用黑腹果蝇高通量研究挥发性药物的连续麻醉阵列

SAA允许高通量处理，以研究无脊椎动物模式生物中挥发性物质的药理学，这些模式生物具有复杂的大脑和广泛的行为库。结合黑腹果蝇中可用的遗传工具箱，该技术可以快速且经济地研究挥发性药物的药物遗传学。许多人暴露于挥发性物质作为污染物或治疗剂。

除麻醉外，挥发性麻醉剂还具有许多毒性和有益的附带作用。影响程度部分取决于遗传学，遗传学在很大程度上仍未得到探索。制作木框架后，用 50/9/32 英寸钻头在每个盖子上钻两个孔来修改 32 毫升编年史管帽。

打磨孔以清理破烂的塑料。还要打磨盖子的顶部以使表面粗糙。然后将五毫升血清移液器切割成一定尺寸，方法是对塑料进行划痕并在刻痕线上将其分解干净。

打磨切开或破碎的移液管的末端。之后，将网粘在管子上，并在粘合剂干燥后将网切割成管子尺寸。将管子插入锥形盖的孔中，两个管子都延伸到盖子上方。

确保流入管伸入管的时间比流出管长。在管子周围的盖子顶部涂上胶水，将零件固定在一起并使其干燥。将粘性电缆系带连接到框架上。

用拉链领带将盖子固定在框架上，并将拉链领带标签末端剪短。切割并连接tygon管的长度到每个修改后的盖子上的流入管和流出管。从上游端开始，首先将管道连接到流入处，然后从流出处连接到后续位置的流入处。

接下来，将流量指示器添加到最下游的流入量。将50毫升的锥形管放在第一个位置，并标记注水标记。取出试管。

在流入管下方注水，然后将其放回原位。准备汽化器的接口。拆下柱塞，从两个 10 毫升分配注射器中切下凹口，然后将它们插入蒸发器流入和流出，凹口直接朝向蒸发器前部以对齐孔。

连接整个系统。使用tygon管将载气罐与调节器，气体特定流量计，蒸发器和SAA连接。用空的 50 毫升编年史管填充阵列上的空位置。

现在打开油箱。将流量计打开至每分钟两升，然后打开汽化器至 0%通过检查汽化器上游的流量计和 SAA 最后一个腔室下游的流量指示器来确认通过系统的气体流量。或者，将下游管端插入水中并寻找气泡。

在麻醉剂暴露前24小时或更长时间，使用首选方法根据实验的需要对苍蝇队列进行分类。将苍蝇从食物小瓶转移到空的50毫升锥形管中。在暴露前计数并记录任何死苍蝇。

打开盖子并将装有苍蝇的 50 毫升锥形管拧到 SAA 上。打开载气并将其设置为所需的流速。将麻醉蒸发器设置为所需的浓度，并将苍蝇暴露所需的持续时间。

在暴露结束时，以每分钟 1.5 升的速度用新鲜气体冲洗系统五分钟，相当于总 SAA 体积的大约 10 倍。完全打开高压调节器，然后关闭半圈，以确保载气流动。沿着每条管线的管道连接到流量计和蒸发器，并检查蒸发器中的麻醉液位。

确认当气体流动时，它在流量计和下游流量指示器上指示流量。在实验结束时，允许四到五分钟的气流冲洗掉麻醉剂。通过单对会议从单个种群中分离出的七条线显示，由于ND23 60114苍蝇的进化压力，异氟毒性诱导的死亡率发生了变化。

在创伤性脑损伤之前，用15分钟的2%异氟预处理苍蝇降低了白色1118和黄色/白色菌株在24小时的死亡率指数。在预处理的俄勒冈R和Canton S系中，24小时时的死亡率指数没有显着降低。在组装过程中，改进注射器中的凹口必须与蒸发器端口的孔对齐。

在暴露期间，定期检查是否有流过系统。该程序可以用于各种行为、存活和分子研究，从而深入了解挥发性物质的药理学。