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March 10, 2023
DOI:
10.3791/65234-v
我们的研究重点是脂滴数和亚油酸诱导的脂质液滴数量和大小在肝细胞中。此外,我们的目标是提供对脂肪肝机制的见解。该研究领域的最新进展表明,胆碱,CCT α,建立诱导自噬,可以调节牛肝细胞中的脂滴大小。
此外,活细胞工作站的观察表明,磷脂对脂滴融合有相当大的影响。目前,基因辅助、荧光镊子、液相色谱、组学分析、单色谱、流式细胞术等技术正被用于对这一领域的大量研究进行分组。实验方法有一些局限性。
例如,有限场的现象只能在脂滴场和一定的废物飞行下观察到。油红O染色比脂滴荧光染色更方便,更便宜,并且更广泛地用于测量脂滴的表观尺寸。它操作简单,需要的设备更少。
此外,我们通过活细胞站直接观察到这种脂质融合的现象。本研究提供了一种简单、可重复的脂滴大小和融合观察方法,可广泛应用于细胞脂质代谢研究中的脂滴分析。我们将继续对脂滴进行深入研究,重点关注奶牛脂滴融合的机制和脂肪肝的结构变化。
本协议描述了如何使用油红O染色脂滴(LDs),计算脂肪酸诱导的脂肪肝细胞模型中LDs的大小和数量,并使用BODIPY 493 / 503观察小LDs通过活细胞成像融合成大LD的过程。
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Cite this Article
Yang, J., Kang, F., Wei, A., Lu, W., Zhang, X., Han, L. Evaluation of Lipid Droplet Size and Fusion in Bovine Hepatic Cells. J. Vis. Exp. (193), e65234, doi:10.3791/65234 (2023).
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