一种利用顶空气相色谱-串联四极杆质谱法检测动物源性药材中三甲胺的改进技术

本研究的范围是动物药中鱼腥味的物质基础及其变化。本方案提供了一种简单的前处理方法，可准确检测动物药中的三甲胺。该方案所用的简单前处理方法及顶空气相色谱-质谱的程序参数仍需进一步优化，我们尚有许多工作需要完成。

本方案采用GC-MS的多反应监测模式，结合一种独特的简易前处理方法，这不仅是首次用于三甲胺分析的前处理方法，也是首次应用的分析模式。首先，使用中药粉碎机将药材地龙、美洲大蠊和水蛭进行粉碎。将药粉依次通过二号和四号标准药筛进行过筛，收集两筛之间的粉末，即得所需样品粉末。

取一克试样粉末置于50毫升塑料离心管中。加入20毫升5%三氯乙酸溶液，使用高速分散均质器在1,000 RPM条件下均质一分钟。均质后，在室温下以1,717 ×g离心五分钟。

将上清液通过浸有吸收性棉花的玻璃漏斗过滤至50毫升容量瓶中。随后，分别用15毫升和10毫升的5%三氯乙酸溶液重复提取两次，合并滤液，并用5%三氯乙酸溶液定容至50毫升。接下来，准确加入2毫升氢氧化钠溶液和0.5克固体石蜡至20毫升顶空瓶中。

然后将它们放入70摄氏度的烘箱中加热约30分钟。取出小瓶，使其冷却至室温，使石蜡凝固。为处理样品顶空，向含有凝固石蜡的小瓶中加入2毫升每种样品提取液。

按压瓶盖并密封小瓶。将密封好的顶空瓶放入气相色谱-质谱联用仪（GCMS）中进行检测。为获得标准曲线，用移液器吸取一系列2毫升三甲胺标准溶液，加至凝固的石蜡层上方。

将密封的顶空瓶放入仪器中进行三甲胺测定。为进行精密度测试，吸取2毫升浓度为0.1微克/毫升的三甲胺标准溶液，加至已凝固的石蜡层上方。按照仪器制造商的说明，在仪器中进行六次平行测定。

在回收率实验中，将数批样品粉末放入烘箱中烘烤，直至气相色谱-质谱（GCMS）检测不到三乙胺为止，操作方法如前所述。随后，分别取一克烘烤后且可过筛的粉末加入到多个50毫升塑料离心管中。向所有离心管中加入50微升三甲胺标准溶液，并用5%三氯乙酸溶液进行提取，操作方法如前所述。

三甲胺的保留时间为2.3分钟。色谱峰尖锐，且无其他杂质干扰。将Pheretima、Periplaneta americana和Hirudo样品进行加标回收试验，通过干燥以减少药材中的三乙胺，其平均回收率分别为84.49%、94.66%和85.67%。

在九批草药中检测到三乙胺，其浓度范围为13.23至271.63毫克每千克。