普通狨猴皮层分层活动的电生理学

由于体型较小且缺乏作为解剖学标志的脑回结构，普通狨猴在神经生理学研究中带来了独特的挑战。电极位置仅移动一毫米就可能导致视网膜拓扑图发生显著变化。所提出的微型驱动系统采用了一种XY电极平台，可在亚毫米尺度上实现电极的垂直和水平移动。

由于狨猴作为视觉神经科学研究模型相对较新，清醒行为电生理技术仍在不断发展。目前的制备方法通常使用半慢性探针，无法为定位装置提供操作空间。本方案展示了一种轻量化的机械驱动装置，可用于有效的线性阵列记录，能够在不同记录会话之间灵活调整位置，从而在记录腔内绘制视网膜病变图谱。

正确使用固定驱动装置、缓慢穿透组织并避开主要血管，可在制备过程中避免长期的皮层损伤。此外，该技术已优化了开颅手术中使用 slastic 以避免感染的操作。首先，收集构建电极微驱动装置所需的部件。

将一个螺母放入底座的槽中，并添加氰基丙烯酸酯胶水以增强稳定性。然后将螺钉穿过底座中的螺母。使用配备金刚石切割轮附件的旋转工具，切割一块4×3×3毫米的塑料网格，网格孔间距为1×1毫米。

将网格部件放置在Y形支架的顶部。涂抹环氧树脂，将网格部件固定在Y形支架的顶部。然后，使用螺丝将微型驱动器安装到网格上方。

在微型驱动器底部添加环氧树脂以增强稳定性。使用环氧树脂将塑料矩形平台固定在28号钢制管上。将23号导管穿过网格。

然后将连接在塑料平台上的不锈钢管穿过23号导引管。将28号不锈钢管插入微驱动装置的其中一个插槽中。使用环氧树脂将不锈钢管固定在微驱动装置上。

使用手敲工具，敲击X轴平台和底座上的预制螺孔，以构建驱动部分的基座。然后将螺钉穿过X轴平台的长条形槽孔，并固定在底座对应的螺孔中。再将两个螺钉穿过Y轴平台的长条形槽孔，并将其固定在X轴平台的预制螺孔中。

在确认显微操作仪驱动装置已安装塑料平台后，使用胶带将64针连接器固定在平台上。然后小心地在塑料管上涂抹少量杆菌肽，并通过柔性带状电缆将电极连接到64针连接器上。使用显微操作仪驱动装置固定硅电极及其连接器，同时将塑料管穿过Y轴平台上的孔洞。

将64针连接器从显微操作器驱动装置上拆下，并使用胶凝剂将连接器固定在X轴载物台的平台上。第二天，小心地将电极从塑料管上分离，并将显微操作器驱动装置从组件上取下。轻轻移动鳄鱼夹，翻转驱动装置，以露出未固定的电极。

将电极放置在Y轴载物台下方的塑料支架上，并用硅胶弹性体固定。五分钟后，使用显微驱动器上的螺丝控制装置回撤电极，并将保护套套在电极外部。拧紧显微驱动器基座部件上的三个侧边螺丝。

将用于记录的前置放大器连接到64针连接器上。在使用前一天，将EDOT和PSS溶于蒸馏水中以配制PEDOT溶液。打开阻抗测试软件，在左上角的顶部下拉菜单中选择适配器。

在第二个下拉菜单中，选择电极。确保通道数量正确。使用连接器将探头连接到阻抗测试系统，并将探头浸入接地的生理盐水中，以获得基线读数。

按下“测试阻抗”按钮，并在按下“测试探针”按钮前确认设置正确。记录并保存电极两个分支的基线读数，以供日后参考。随后，降低实验台升降架，将探针从盐水中取出。

将烧杯中的生理盐水替换为蒸馏水。升起实验室升降台，使电极浸入蒸馏水中，冲洗残留的生理盐水，然后再次降低升降台。将蒸馏水替换为PEDOT溶液，升起实验室升降台，直至电极完全浸入溶液中。

选择直流电镀按钮并确认设置正确。然后按下自动电镀按钮并保存结果。测试结束后，首先用蒸馏水冲洗探头。

然后用生理盐水注满烧杯，并升高实验台升降架，直至电极完全浸入。按下“测试阻抗”按钮，检查设置是否正确。随后按下“测试探头”按钮。

首先，将微型驱动器固定在头帽上。拧紧微型驱动器系统的全部三颗螺丝。使用微型驱动器上的螺丝控制器，以每1至2秒旋转一圈的速度缓慢降低硅探针，直至在阵列尖端观察到神经信号单位。

观察到神经元后，回撤微驱动器一圈，以降低电极穿过弹性组织和硬脑膜进入皮层组织时的进针速度。随后缓慢继续将电极阵列推进皮层，20至30分钟内前进4到6圈，直至神经元在探针长度方向上均匀分布。然后缓慢回撤电极阵列1至2圈，以减轻对组织的压力。

记录完成后，以与初始插入时相近的速度缓慢将电极阵列从皮层撤回。当探头上不再可见神经元时，加快撤回速度，直至电极阵列完全回到初始的完全回缩位置。将探头从记录室取出后，将其浸泡在隐形眼镜清洁液中20分钟，以清除任何残留的组织或血液。

将探针置于酒精中一分钟，以去除接触镜溶液，并让电极自然干燥。通过Kilosort获得的峰电位分选阵列数据显示，所选簇中峰电位的主成分特征与背景峰电位明显不同，证实了记录在时间上的稳定性。XY定位的可靠性显示，相隔一周的两次实验会话之间，平均感受野位置的重叠率达到70.8%。

通过微小的位置调整，在跨越MT和MTC边界的系列记录会话中，观察到了精确的视网膜拓扑空间运动。