推拿手法减轻膝骨关节炎大鼠的炎症与软骨丢失

我们研究了推拿手法治疗膝骨关节炎的机制。研究发现，推拿在缓解疼痛和改善运动功能方面具有显著效果。然而，目前针对膝骨关节炎的推拿治疗仍缺乏标准操作规程，且现有结论的可靠性尚不足够，因此我们正致力于建立一套标准化的推拿治疗方案。

近年来，许多团队开始研发推拿或按摩机器人，这类机器人能够输出特定的机械波形进行操作，从而实现手法的标准化。此外，还有一些细胞力学加载装置，可为细胞施加模拟手法力，用于细胞层面的研究。我们认为，推拿在动物身上应用的难点在于如何保持手法操作的标准化，以及如何准确定位穴位。

我们通过初步实验验证了推拿抑制滑膜炎症和软骨细胞凋亡的作用，这将为今后研究推拿治疗膝骨关节炎（KOA）的机制指明方向。未来，我们将重点研究推拿治疗KOA的机制，主要涉及机械信号转导通路，以及如何抑制滑膜炎症和软骨细胞凋亡。麻醉大鼠后，使用剃毛机去除右后肢的毛发。

然后，在右踝关节与髋关节之间放置一块医用棉垫。使用五到六层湿石膏绷带，将右膝关节固定于180度伸展位置。从踝关节开始螺旋缠绕石膏绷带，每圈覆盖前一圈的三分之一。

使用吹风机干燥并硬化石膏。待石膏绷带干燥硬化后，混合义齿基托材料使其具有黏性，并用该材料包裹石膏外部，以固定并防止其被啃咬。待混合物硬化后，关闭麻醉机，并监测末梢肢体的血液循环。

然后，等待大鼠自然苏醒。连续固定三周后，使用手术剪剪除外层的义齿基托材料和石膏绷带。用生理盐水冲洗大鼠下肢，并用纱布擦干。

根据穴位定位原则，选取大鼠右侧后肢的五个穴位。推拿操作前，轻轻拉动大鼠尾巴，使其钻入袋中，并将后肢露出袋外。进行推拿操作时，用一只手将大鼠呈俯卧位固定，握住其尾巴和后肢。

然后将操作者的拇指置于选定的穴位上，进行有节奏的按压和揉捏，带动皮肤及皮下组织做环形运动，确保手法的力度和频率一致。对于下一次机械缩足阈值（MWT）的测定，使用电子 von Frey 纤维在大鼠足底中心进行刺激，当大鼠出现抬腿、躲避等明显动作时即撤去纤维，仪器将自动记录以牛顿为单位的最大压力值。

测量后，删除差异较大的数值，取剩余三个数值的平均值作为机械痛阈（MWT）。接下来进行足退缩潜伏期（Paw Withdrawal Latency，PWL）检测时，将光斑聚焦于大鼠足底中心，按下开始按钮。观察大鼠是否出现缩足或舔足等行为，在按下停止按钮前记录所需时间。

测量后，删除差异较大的数值，取剩余三个数值的平均值作为脉冲宽度（PWL）。进行统计分析时，打开分析软件；若数据符合正态分布，则进行T检验。

或者，采用广义估计方程分析重复测量数据。热辐射痛阈实验结果表明，造模后右后肢的热辐射痛阈显著低于造模前。与对照组相比，推拿干预后大鼠的热辐射痛阈显著升高。

足底痛阈（PWL）结果显示，造模后右后肢的PWL显著短于造模前。与对照组相比，推拿后大鼠的机械痛阈（MWT）显著延长。