Name: 基于溶剂辅助风味蒸发富集的茶香分析 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-05-26T13:50:00.000+00:00
Duration: 4 min 36 s
Description: 了解溶剂辅助风味蒸发技术用于茶叶香气分析的方法。本研究通过SAFE技术富集挥发性成分，结合气相色谱-质谱联用分析四种白茶品种的香气特征，鉴定出甲基茉莉酸酯等关键风味化合物。

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本研究得到国家自然科学基金（32002094，32102444）、财政部和农业农村部中国农业研究体系（CARS-19）以及中国农业科学院科技创新工程（CAAS-ASTIP-TRI）的资助。

1. 内标物和茶汤的制备
<ol>
	<li>储备液：将 10.0 mg 的对二甲苯-d10（见材料表）溶解于 10.0 mL 无水乙醇中，配制成 1,000 ppm 的内标储备溶液。</li>
	<li>工作液：取 1 mL 储备液（步骤 1.1）用纯水稀释至 100 mL，配制成 10 ppm 的内标工作溶液。 
	注意：工作液必须在分析当天配制。</li>
	<li>取 3 g 茶叶（绿茶和红茶均可，见材料表）放入锥形瓶中，加入 150 mL 沸水，用玻璃塞盖住瓶口。</li>
	<li>5 分钟后，迅速通过 300 目筛网过滤茶汤。</li>
	<li>用 30 mL 水将茶渣洗涤两次，并将洗涤液合并至茶汤中。</li>
	<li>将茶汤置于冰水浴中快速冷却至室温。</li>
	<li>向茶汤中加入 1.00 mL 工作液（步骤 1.2），充分混匀。</li>
</ol>
2. 茶汤的SAFE蒸馏及蒸馏液的液-液萃取
<ol>
	<li>按照以下步骤准备 SAFE 装置。
	<ol>
		<li>安装 SAFE 装置（图 1），并将蒸馏瓶连接至左下方（图 1[3]），收集瓶连接至右下方（图 1[4]）。将循环水管连接至 SAFE 玻璃装置后部。安装冷阱（图 1[5]），并将管路连接至玻璃装置右上方的真空泵（见材料表）。 
		注意：检查循环水管的连接；确保进水口在上方，出水口在下方。使用去离子水进行循环，以防止水垢堵塞 SAFE 装置中的白色管道，否则会导致循环水流通不畅，最终引起 SAFE 装置爆炸。&#160;蒸馏底瓶（图 1[3]）可通过搅拌子搅拌，以促进样品蒸发。</li>
		<li>将循环水温度设定为 50 °C，样品瓶水浴温度设定为 40 °C。关闭真空阀（图 1[2]）。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>操作真空泵。
	<ol>
		<li>开启真空泵电源。</li>
		<li>逐步将转速提高至最大速度 100%。 
		注意：若转速无法达到 100%，请检查系统是否密封良好，以及系统内部是否有溶剂残留。</li>
		<li>当达到高真空状态（理想情况下为 10-3 Pa）时 
		注意：向冷阱中加入液氮后，真空度会进一步提升。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>进行样品蒸馏。
	<ol>
		<li>启动水循环。</li>
		<li>向冷阱中加入液氮，使其覆盖收集瓶外部。</li>
		<li>将茶汤注入装置左上方的样品漏斗（图 1[1]），然后用玻璃塞盖住。</li>
		<li>将样品逐滴引入蒸馏瓶中。控制样品滴加速度，使真空度维持在约 10−3 Pa 的合适范围内。 
		注意：在过程中需持续添加液氮，确保右侧收集瓶始终浸没在液氮中。尽量避免冷阱内形成冷凝物。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>蒸馏完成后关闭真空泵。
	<ol>
		<li>按下电源开关。当&#34;STOP&#34;闪烁时，按下回车键确认。</li>
		<li>当分子泵转速降至&#34;0&#34;时，拔掉电源线。 
		注意：仅当转速降至&#34;0&#34;时方可重新启动。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将系统恢复至常压。
	<ol>
		<li>取下样品瓶上方的磨口塞。</li>
		<li>缓慢旋开真空阀旋钮，使系统恢复至大气压力。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>取下含有样品的收集瓶。
	<ol>
		<li>系统恢复至常压后，移除收集瓶外部的液氮。</li>
		<li>缓慢旋下收集瓶。小心取下含有样品的收集瓶。</li>
		<li>关闭循环水。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>对 SAFE 馏出液进行液-液萃取。
	<ol>
		<li>让瓶中的 SAFE 馏出液升温至室温。</li>
		<li>用 50 mL 二氯甲烷（见材料表）对 SAFE 馏出液萃取三次。</li>
		<li>合并二氯甲烷层。用无水硫酸钠干燥萃取液（见材料表）。 
		注意：当溶剂中的无水硫酸钠不再结块且可自由流动时，即视为已充分干燥。</li>
		<li>用温和的氮气流将萃取液浓缩至约 2 mL。</li>
		<li>转移至 1–2 mL 样品瓶中，再用温和的氮气流进一步浓缩至 200 µL。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. 气相色谱-质谱分析及数据处理
<ol>
	<li>使用配备熔融石英毛细管柱的气相色谱-质谱联用系统（GC-MS）（图2，参见材料表）分析第2部分实验方案中制备的香气浓缩物。</li>
	<li>以氦气为载气，线性流速为40 cm/s。</li>
	<li>以不分流进样模式注入3 µL浓缩液。</li>
	<li>设置气相色谱炉温程序：(1) 在40 °C保持5 min；(2) 以5 °C/min升温至200 °C；(3) 以10 °C/min升温至280 °C；(4) 在280 °C保持10 min。</li>
	<li>质谱选择性检测器在正电子轰击电离（EI）模式下运行13，质荷比扫描范围为30 m/z至350 m/z，电离能量为70 eV。</li>
	<li>使用自动质谱解卷积与鉴定系统（AMDIS，参见材料表）对GC-MS数据进行解卷积。</li>
	<li>解卷积后，使用NIST（美国国家标准与技术研究院）17质谱检索程序3进行数据匹配与定性。</li>
	<li>根据在相同GC条件下测定的一系列正构烷烃（C5-C25，参见材料表）的结果，计算各化合物的保留指数14。</li>
	<li>通过质谱图与保留指数的同步匹配，结合NIST质谱数据库和保留指数数据库对GC峰进行鉴定。</li>
	<li>利用总离子流色谱（TIC）峰面积，相对于内标物计算SAFE样品中各挥发性组分的浓度。</li>
	<li>从茶汤制备开始，重复分析三次。</li>
</ol>

Unveiling Tea Aroma Complexity with Solvent-Assisted Flavor Evaporation Method

<ol><li>Liang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Processing+technologies+for+manufacturing+tea+beverages%3A+From+traditional+to+advanced+hybrid+processes%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Food+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">Processing technologies for manufacturing tea beverages: From traditional to advanced hybrid processes.</a> Trends in Food Science & Technology. 118, 431-446 (2021).</li>
<li>Guo, X. Y., Ho, C. T., Schwab, W., Wan, X. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aroma+profiles+of+green+tea+made+with+fresh+tea+leaves+plucked+in+summer%29%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Aroma profiles of green tea made with fresh tea leaves plucked in summer).</a> Food Chemistry. 363, 130328(2021).</li>
<li>Feng, Z. H., Li, M., Li, Y. F., Wan, X. C., Yang, X. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+orchid-like+aroma+contributors+in+selected+premium+tea+leaves%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Research+International%22%5BJournal%5D)">Characterization of the orchid-like aroma contributors in selected premium tea leaves.</a> Food Research International. 129, 108841(2020).</li>
<li>Hong, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+key+aroma+compounds+in+different+aroma+types+of+Chinese+yellow+tea%5BTitle%5D)+AND+%22Foods%22%5BJournal%5D)">Characterization of the key aroma compounds in different aroma types of Chinese yellow tea.</a> Foods. 12 (1), 27(2023).</li>
<li>Flaig, M., Qi, S. C., Wei, G., Yang, X., Schieberle, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterisation+of+the+key+aroma+compounds+in+aLongjinggreen+tea+infusion+%28Camellia+sinensis%29+by+the+sensomics+approach+and+their+quantitative+changes+during+processing+of+the+tea+leaves%5BTitle%5D)+AND+%22European+Food+Research+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Characterisation of the key aroma compounds in aLongjinggreen tea infusion (Camellia sinensis) by the sensomics approach and their quantitative changes during processing of the tea leaves.</a> European Food Research and Technology. 246 (12), 2411-2425 (2020).</li>
<li>Feng, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tea+aroma+formation+from+six+model+manufacturing+processes%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Tea aroma formation from six model manufacturing processes.</a> Food Chemistry. 285, 347-354 (2019).</li>
<li>Wang, J. -Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+baking+treatment+on+the+sensory+quality+and+physicochemical+properties+of+green+tea+with+different+processing+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Effects of baking treatment on the sensory quality and physicochemical properties of green tea with different processing methods.</a> Food Chemistry. 380, 132217(2022).</li>
<li>Zhai, X., Zhang, L., Granvogl, M., Ho, C. -T., Wan, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flavor+of+tea+%28Camellia+sinensis%29%3A+A+review+on+odorants+and+analytical+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Comprehensive+Reviews+in+Food+Science+and+Food+Safety%22%5BJournal%5D)">Flavor of tea (Camellia sinensis): A review on odorants and analytical techniques.</a> Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety. 21 (5), 3867-3909 (2022).</li>
<li>Chaturvedula, V. S. P., Prakash, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+aroma%2C+taste%2C+color+and+bioactive+constituents+of+tea%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Medicinal+Plants+Research%22%5BJournal%5D)">The aroma, taste, color and bioactive constituents of tea.</a> Journal of Medicinal Plants Research. 5 (11), 2110-2124 (2011).</li>
<li>Ridgway, K., Lalljie, S. P. D., Smith, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sample+preparation+techniques+for+the+determination+of+trace+residues+and+contaminants+in+foods%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chromatography+A%22%5BJournal%5D)">Sample preparation techniques for the determination of trace residues and contaminants in foods.</a> Journal of Chromatography A. 1153 (1-2), 36-53 (2007).</li>
<li>Engel, W., Bahr, W., Schieberle, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Solvent+assisted+flavour+evaporation+-+A+new+and+versatile+technique+for+the+careful+and+direct+isolation+of+aroma+compounds+from+complex+food+matrices%5BTitle%5D)+AND+%22European+Food+Research+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Solvent assisted flavour evaporation - A new and versatile technique for the careful and direct isolation of aroma compounds from complex food matrices.</a> European Food Research and Technology. 209 (3-4), 237-241 (1999).</li>
<li>Wang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+aroma+compounds+of+Pu-erh+ripen+tea+using+solvent+assisted+flavor+evaporation+coupled+with+gas+chromatography-mass+spectrometry+and+gas+chromatography-olfactometry%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Science+and+Human+Wellness%22%5BJournal%5D)">Characterization of aroma compounds of Pu-erh ripen tea using solvent assisted flavor evaporation coupled with gas chromatography-mass spectrometry and gas chromatography-olfactometry.</a> Food Science and Human Wellness. 11 (3), 618-626 (2022).</li>
<li>Zou, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zijuan+tea-+based+kombucha%3A+Physicochemical%2C+sensorial%2C+and+antioxidant+profile%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Zijuan tea- based kombucha: Physicochemical, sensorial, and antioxidant profile.</a> Food Chemistry. 363, 130322(2021).</li>
<li>Vandendool, H., Kratz, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+generalization+of+the+retention+index+system+including+linear+temperature+programmed+gas-liquid+partition+chromatography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chromatography%22%5BJournal%5D)">A generalization of the retention index system including linear temperature programmed gas-liquid partition chromatography.</a> Journal of Chromatography. 11, 463-471 (1963).</li>
<li>Khvalbota, L., Virba, M., Furdikova, K., Spanik, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+distillation-solvent+extraction+gas+chromatography-mass+spectrometry+analysis+of+Tokaj+Muscat+Yellow+wines%5BTitle%5D)+AND+%22Separation+Science+Plus%22%5BJournal%5D)">Simultaneous distillation-solvent extraction gas chromatography-mass spectrometry analysis of Tokaj Muscat Yellow wines.</a> Separation Science Plus. 5 (8), 393-406 (2022).</li>
<li>Ayalew, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Volatile+organic+compounds+of+anchote+tuber+and+leaf+extracted+using+simultaneous+steam+distillation+and+solvent+extraction%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Food+Science%22%5BJournal%5D)">Volatile organic compounds of anchote tuber and leaf extracted using simultaneous steam distillation and solvent extraction.</a> International Journal of Food Science. 2022, 3265488(2022).</li>
<li>Zhu, M., Li, E., He, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+volatile+chemical+constitutes+in+tea+by+simultaneous+distillation+extraction%2C+vacuum+hydrodistillation+and+thermal+desorption%5BTitle%5D)+AND+%22Chromatographia%22%5BJournal%5D)">Determination of volatile chemical constitutes in tea by simultaneous distillation extraction, vacuum hydrodistillation and thermal desorption.</a> Chromatographia. 68 (7-8), 603-610 (2008).</li>
<li>Lau, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterising+volatiles+in+tea+%28Camellia+sinensis%29.+Part+I%3A+Comparison+of+headspace-solid+phase+microextraction+and+solvent+assisted+flavour+evaporation%5BTitle%5D)+AND+%22Lwt-Food+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Characterising volatiles in tea (Camellia sinensis). Part I: Comparison of headspace-solid phase microextraction and solvent assisted flavour evaporation.</a> Lwt-Food Science and Technology. 94, 178-189 (2018).</li>
<li>Li, Z. W., Wang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+volatile+aroma+compounds+from+five+types+of+Fenghuang+Dancong+tea+using+headspace-solid+phase+microextraction+combined+with+GC-MS+and+GC-olfactometry%5BTitle%5D)+AND+%22International+Food+Research+Journal%22%5BJournal%5D)">Analysis of volatile aroma compounds from five types of Fenghuang Dancong tea using headspace-solid phase microextraction combined with GC-MS and GC-olfactometry.</a> International Food Research Journal. 28 (3), 612-626 (2021).</li>
<li>Dong, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Herbivore-induced+volatiles+from+tea+%28Camellia+sinensis%29+plants+and+their+involvement+in+intraplant+communication+and+changes+in+endogenous+nonvolatile+metabolites%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Agricultural+and+Food+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Herbivore-induced volatiles from tea (Camellia sinensis) plants and their involvement in intraplant communication and changes in endogenous nonvolatile metabolites.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 59 (24), 13131-13135 (2011).</li>
<li>Acena, L., Vera, L., Guasch, J., Busto, O., Mestres, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+study+of+two+extraction+techniques+to+obtain+representative+aroma+extracts+for+being+analysed+by+gas+chromatography-olfactometry%3A+Application+to+roasted+pistachio+aroma%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chromatography+A%22%5BJournal%5D)">Comparative study of two extraction techniques to obtain representative aroma extracts for being analysed by gas chromatography-olfactometry: Application to roasted pistachio aroma.</a> Journal of Chromatography A. 1217 (49), 7781-7787 (2010).</li>
<li>Kumazawa, K., Wada, Y., Masuda, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+epoxydecenal+isomers+as+potent+odorants+in+black+tea+%28Dimbula%29+infusion%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Agricultural+and+Food+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Characterization of epoxydecenal isomers as potent odorants in black tea (Dimbula) infusion.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 54 (13), 4795-4801 (2006).</li>
<li>Wu, H. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+three+different+withering+treatments+on+the+aroma+of+white+tea%5BTitle%5D)+AND+%22Foods%22%5BJournal%5D)">Effects of three different withering treatments on the aroma of white tea.</a> Foods. 11 (16), 2502(2022).</li>
<li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decoding+the+specific+roasty+aroma+Wuyi+rock+tea+%28Camellia+sinensis%3A+Dahongpao%29+by+the+sensomics+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Agricultural+and+Food+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Decoding the specific roasty aroma Wuyi rock tea (Camellia sinensis: Dahongpao) by the sensomics approach.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 70 (34), 10571-10583 (2022).</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

本文介绍了一种利用SAFE和GC-MS分析茶叶浸出液中挥发性化合物的高效方法。
茶汤具有复杂的基质，含有大量非挥发性成分。文献中已报道了多种从茶汤中分离挥发性成分的方法。其中一种常用方法是同时蒸馏萃取（SDE）15,16。然而，该方法不适用于茶叶香气的分析，因为在整个蒸馏/萃取过程中需将茶叶与水持续煮沸，导致茶汤成分发生化学反应，从而获得的气味特征与原始样品差异显著17。SAFE 在高真空条件下对茶汤进行低温蒸馏，最大限度地减少了待测成分的变化，能够有效保留原始香气组成。
固相微萃取（SPME）是另一种常用于茶叶香气分析的方法18,19。该方法的优点在于操作简便且无需溶剂。然而，由于纤维对香气成分的吸附具有选择性，难以获得能够反映样品香气特征的定量...

茶是全世界许多人的首选饮品1,2。茶的香气既是茶叶的品质评价标准，也是决定其价格的重要因素3,4。因此，对茶叶香气成分及其含量的分析，在分子感官研究和茶叶质量控制中具有重要意义。近年来，香气成分分析已成为茶叶研究中的一个重要课题5,6,7。
茶叶中香气成分的含量极低，通常仅占茶叶干重的0.01%–0.05%8。此外，样品基质中大量非挥发性成分会严重干扰气相色谱分析9,10。因此，必须通过样品前处理步骤来分离茶叶中的挥发性化合物。在分离与富集方法的选择上，关键在于尽可能减少基质干扰，同时最大程度地保留样品原有的气味特征。
溶剂辅助风味蒸发法（SAFE）最初由Engel、Bahr和Schieberle开发，是一种改进的高真空蒸馏技术，用于从复杂的食品基质中分离挥发性化合物11,12。该方法使用一套紧凑的玻璃装置连接高真空泵（通常操作压力为5 × 10−3 Pa），可高效地从溶剂提取物、油性食品和水相样品中收集挥发性化合物。
本文介绍了一种将 SAFE 技术与溶剂萃取相结合的方法，用于从红茶浸液中分离挥发性物质，随后通过气相色谱-质谱联用（GC-MS）进行分析。

<table><tbody><tr><td>烷烃混合物（C10-C25）</td><td>ANPEL</td><td>CDAA-M-690035</td><td></td></tr><tr><td>烷烃混合物（C5-C10）</td><td>ANPEL</td><td>CDAA-M-690037</td><td></td></tr><tr><td>AMDIS</td><td>美国国家标准与技术研究院</td><td>版本 2.72</td><td>马里兰州盖瑟斯堡</td></tr><tr><td>分析天平</td><td>OHAUS</td><td>EX125DH</td><td></td></tr><tr><td>无水乙醇</td><td>国药集团</td><td></td><td></td></tr><tr><td>无水硫酸钠</td><td>阿拉丁</td><td></td><td></td></tr><tr><td>红茶</td><td>千和茶叶</td><td></td><td>中国安徽省黄山市</td></tr><tr><td>浓缩仪</td><td>Biotage</td><td>TurboVap</td><td></td></tr><tr><td>数据处理器</td><td>Agilent</td><td>MassHunter</td><td></td></tr><tr><td>二氯甲烷</td><td>TEDIA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>气相色谱仪</td><td>Agilent</td><td>7890B</td><td></td></tr><tr><td>气相色谱柱</td><td>Agilent</td><td>DB-5MS</td><td></td></tr><tr><td>绿茶</td><td>千和茶叶</td><td></td><td>中国安徽省黄山市</td></tr><tr><td>质谱仪</td><td>Agilent</td><td>5977B</td><td></td></tr><tr><td>对二甲苯-d10</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SAFE</td><td>Glasbl&amp;auml;serei Bahr</td><td></td><td></td></tr><tr><td>超纯去离子水</td><td>Milipore</td><td>Milli-Q</td><td></td></tr><tr><td>真空泵</td><td>Edwards</td><td>T-Station 85H</td><td></td></tr></tbody></table>

基于溶剂辅助风味蒸发富集的茶叶香气分析

Tea Aroma Analysis Based on Solvent-Assisted Flavor Evaporation Enrichment

茶叶香气是决定茶叶品质的重要因素，但由于茶提取物中挥发性成分的复杂性、浓度低、种类多样且性质不稳定，对其进行分析具有较大挑战性。本研究介绍了一种利用溶剂辅助风味蒸发法（SAFE）结合溶剂萃取和气相色谱-质谱联用技术（GC-MS），在保留气味特征的前提下获取并分析茶提取物中挥发性成分的方法。SAFE是一种高真空蒸馏技术，能够在无非挥发性物质干扰的情况下，从复杂的食品基质中分离出挥发性化合物。本文提供了茶叶香气分析的完整逐步操作流程，包括茶汤制备、溶剂萃取、SAFE蒸馏、提取物浓缩以及GC-MS分析。该方法已应用于两种茶叶样品（绿茶和红茶），获得了样品中挥发性成分的定性与定量结果。该方法不仅可用于多种类型茶叶样品的香气分析，还可用于其分子感官研究。

本节以红茶和绿茶样品的香气分析为例，说明上述分析流程。
代表性 GC-MS 色谱图如图所示 图3. 图 3A 显示一组正构烷烃，以及 图3B 显示内标物的谱图。绿茶和红茶样品提取物的评估结果如图所示。 图3C 和 图3D，分别。通过分析内标物，可检测到一个具有稳定基线的明确峰（图 3B）。气相色谱图显示了绿茶和红茶 infusion 提取物经总离子计数后获得的完整气相色谱图谱。
通过质谱匹配结合保留指数，在绿茶和红茶样品中共鉴定出104种香气化合物。相对定量通过各化合物峰面积相对于内标的比值计算得出。根据定性与定量结果绘制的热图展示了绿茶和红茶样品中香气化合物含量相对于内标...

本文介绍一种利用溶剂辅助风味蒸发和溶剂萃取结合气相色谱-质谱法富集和分析茶叶提取物中挥发性成分的方法，该方法可应用于所有类型的茶叶样品。

茶的香气是茶叶品质的重要因素，但由于香气成分复杂、浓度低、种类多样且不稳定，对其进行分析具有较大挑战性。

我们探讨味觉与香气的分子基础，重点关注源自山茶（Camellia sinensis）植物的茶叶产品。我们的目标是表征茶叶中的风味分子，并研究影响茶叶感官特性的生物化学过程。分析茶叶香气需要从复杂的茶叶样品基质中分离并富集浓度极低的挥发性成分。样品制备方法常常是最具挑战性的环节，对于获得有效数据并得出有意义的研究结论至关重要。通过我们对香气形成机制的系统研究，成功鉴定出表茉莉酸甲酯是赋予茶叶香气的关键化合物。我们还对四种不同白茶品种的香气进行了分类。与常用的茶叶香气制备方法不同，SAFE 技术可获得不含非挥发性化合物的清澈茶汤。香气化合物可通过溶剂萃取轻松富集。最重要的是，所得香气浓缩物的香气成分分布与原始样品极为相似。该方法可为多种研究目标提供支持，例如理解茶叶从植株到茶杯过程中香气的演变、探究影响感官生态学的特定分子的化学特性、表征茶叶香气以指导植物栽培、工艺改进、质量控制以及新型风味的开发。首先安装溶剂辅助风味蒸发（SAFE）玻璃装置，然后将蒸馏瓶连接至装置左下方接口，将收集瓶连接至装置右下方接口。将循环水管连接至装置的后部，确保进水口位于上方，出水口位于下方。安装冷阱后，用管路将冷阱右上方的开口与真空泵相连。将循环水的温度设定为 50 摄氏度，将样品蒸馏烧瓶所用水浴的温度设定为 40 摄氏度。然后关闭真空阀，启动真空泵以开始抽真空。为准备样品蒸馏，首先启动水循环系统。向冷阱中加入液氮，并用液氮包围收集瓶。将茶汤注入左上方的样品漏斗中，然后用玻璃塞盖住。接着，逐滴将样品缓慢加入蒸馏烧瓶中。控制样品滴加速度，以维持真空度在适当范围内。蒸馏完成后，按下真空泵的控制按钮，当“stop”闪烁时，按回车键确认。待真空泵转速降至零后，拔掉电源线。取下采样瓶上方的磨口塞，然后缓慢旋转真空阀旋钮，使系统恢复至大气压。当系统内大气压力恢复后，移除收集瓶周围的液氮。缓慢旋开收集瓶，并小心取出含有样品的瓶子。最后，停止水循环。

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Research

科研

JoVE Journal

Chemistry

化学

基于溶剂辅助风味蒸发富集的茶香分析

本文介绍了一种用于水果中挥发性化合物分析的快速方法。该方法利用超快速气相色谱（GC）结合表面声波（SAW）传感器，对样品匀浆顶空中的挥发性化合物进行快速分离和检测。同时讨论了数据处理与分析的操作流程。...

使用电子鼻进行果实挥发性成分分析

质子转移反应飞行时间质谱法可实现对挥发性有机化合物的高灵敏度、快速且无创的分析。为展示其应用潜力，本文提供三个示例：酸奶的乳酸发酵过程（在线生物过程监测）、不同苹果基因型（大规模筛查）以及饮用咖啡后经鼻腔空间的分析（鼻腔空间分析）。...

PTR-ToF-MS 联用自动采样系统及定制化数据分析在食品研究中的应用：生物过程监测、筛选与鼻腔空间分析

气泡萃取是一种用于分析挥发性和半挥发性化合物的新型实验技术。通过施加过压并搅拌液体样品，使载气溶解于其中。随后对样品室进行减压，分析物因起泡现象而释放至气相中。...

挥发性有机化合物的 fizz 萃取结合大气压化学电离四极杆质谱法

本实验采用加压热水提取法（PHWE），利用未经改装的家用意式浓缩咖啡机，在实验室中向本科生介绍天然产物化学。实验包括两个部分：从丁香中提取丁子香酚和乙酰丁子香酚，以及从澳大利亚植物Correa...

在本科实验教学中应用加压热水萃取技术探索天然产物化学

本文介绍了一种利用非破坏性采样方法收集开花植物花香挥发物的实验方案。...

利用顶空气体挥发物收集技术快速采集花卉香味挥发物用于气相色谱-质谱热脱附分析

本文介绍了一种顶空固相微萃取-气相色谱平台，用于快速、可靠且半自动化地鉴定和定量成熟黑加仑果实中的挥发性成分。该技术可用于加深对果实香气的认识，并有助于筛选风味更佳的品种，以用于育种目的。...

利用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱法分析黑加仑果实中的挥发性化合物

本文介绍了一种适用于测定动物源性药材中三甲胺（TMA）的顶空气相色谱-串联三重四极杆质谱法（HS-GC-MS/MS）。该方案包括样品前处理、顶空处理、分析条件、方法学验证以及动物源性药材中三甲胺的测定。...

一种利用顶空气相色谱-串联四极杆质谱法检测动物源性药材中三甲胺的改进技术

本文介绍了一种用于大麦代谢组学分析的方法。该方法包括对代谢物进行分离和衍生化处理，并采用气相色谱-质谱联用技术（GC/MS）进行分析。代谢组学分析可用于研究间作种植和干旱胁迫对谷粒的影响。...

大麦的气相色谱/质谱代谢组学分析

本方案介绍了一种完全自动化的流程，用于从水体和富含脂质的鱼类组织中提取土臭素和2-甲基异茨醇。该方法可在这些化合物达到气味阈值之前实现早期检测。文中提供了来自水产养殖环境的代表性数据。...

利用高容量吸附萃取探针和气相色谱-质谱法对水和鱼类中的土臭素与2-甲基异茨醇进行提取与检测

抗冻蛋白（AFPs）可结合到冰晶的特定晶面，从而阻止或减缓冰晶的生长。基于荧光的冰晶面亲和性（FIPA）分析法是对原始冰蚀刻方法的一种改进，用于确定与抗冻蛋白结合的冰晶面。该方法将抗冻蛋白进行荧光标记后，使其嵌入宏观单晶冰中，并在紫外光下进行观察。...

通过基于荧光的冰平面亲和法测定抗冻蛋白的冰结合平面

了解溶剂辅助风味蒸发技术用于茶叶香气分析的方法。本研究通过SAFE技术富集挥发性成分，结合气相色谱-质谱联用分析四种白茶品种的香气特征，鉴定出甲基茉莉酸酯等关键风味化合物。

基于溶剂辅助风味蒸发富集的茶叶香气分析

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