2023年8月11日
本文介绍了一套在脑性瘫痪大鼠模型中应用的按摩操作方法,可显著改善脑性瘫痪大鼠的运动功能。
我们已概述了用于缓解幼年大鼠脑性瘫痪症状的常规按摩技术。目前,利用按摩疗法改善脑性瘫痪症状的动物研究较少。然而,我们发现对幼年大鼠进行腹部按摩可能有助于提高其操作能力,并已取得有前景的研究结果。
关于按摩如何改善脑性瘫痪的研究较为有限。然而,我们已建立了可用于未来研究按摩在脑性瘫痪中作用机制的动物模型和按摩技术。传统疗法对脑性瘫痪至关重要。
在动物身上稳定按摩手法后研究相关机制,可推动该领域的研究进展。中医按摩对脑性瘫痪患儿的生长发育具有积极影响,因此我们将重点关注中医按摩在脑性瘫痪中的应用方法。首先,将18只出生7天的雄性Sprague Dawley幼年大鼠随机分为三组:假手术组、模型组和按摩组。
对麻醉后的幼鼠使用宠物用眼膏和眼药水,以防止其眼睛干涩。用碘伏消毒大鼠颈部皮肤,随后使用75%乙醇消毒,然后在幼鼠颈部中央做一条长约0.5厘米的纵向切口。仔细分离右侧皮下组织,暴露颈总动脉。
在模型组和按摩组中,分离颈总动脉和迷走神经。使用电凝枪对颈总动脉进行凝固。确认无出血后,逐层缝合皮肤,并再次对手术切口进行消毒。
对于假手术组,分离颈总动脉但不进行处理。逐层缝合皮肤,然后对手术切口进行消毒。待幼鼠能够自由爬行后,将其放回母鼠身边。
对接受手术模型和按摩组的大鼠进行消毒后,将其安置在37摄氏度的保温垫上,并持续监测伤口是否有出血或眼部炎症的迹象。将幼鼠放入开放式缺氧舱中,观察一小时,直至其恢复意识。麻醉恢复后,将幼鼠转移至密闭的无氧装置中,进行为期三小时的缺氧处理。
低氧处理后,将清醒的幼鼠放回母鼠身边。然后对手术器械进行消毒,并用酒精清洁低氧舱。术后用碘伏擦拭幼鼠,以预防感染。
每日观察伤口有无感染迹象,并根据需要使用无菌垫料。模型成功建立后,将模型组大鼠置于正常条件下饲养,对按摩组实施人工干预。随后,将每组幼鼠置于母鼠旁,放置在无菌高温消毒的垫料上,观察1至2小时,直至母鼠哺喂仔鼠。
每日观察伤口部位是否有出血以及任何眼部炎症迹象,直至伤口完全愈合。开始按摩操作时,在脑性瘫痪大鼠模型中,首先设定按压和摩擦所需的力量。在缺氧缺血性脑病诱导后的第二天,小心地将幼年按摩组大鼠从笼中取出,尽量减少对母鼠的干扰。
按摩前,轻轻搓手使其温度与幼鼠皮肤温度相近。将幼鼠舒适地置于左手掌中。用右手四指的指腹面从幼鼠头部至尾部轻轻抚摸其背部,持续一分钟,以使其安静下来。
然后用右手拇指和食指来回揉搓腹部。从近端向远端按摩前肢约30秒。对曲池、外关和合谷穴 each施加压力10次,每次1秒。
接下来,从近端向远端方向揉搓后肢,持续约30秒。按压阳陵泉、足三里、三阴交和太冲穴,每个穴位按压10次,每次1秒,全部穴位操作总时长约5分钟。然后,用右手拇指按压中脘、天枢和关元穴,每个穴位按压10次,每次约1秒,整个过程持续约1分钟。现在将幼鼠置于俯卧位,用右手拇指按压位于腹部的中脘穴。
以大鼠的脐部为中心,顺时针方向以每分钟120次的频率用拇指揉动约五分钟。用右手的四指指腹,从大鼠头部向尾部轻轻抚摩,利用指腹的线状接触面使其镇静。待其安静后,将幼鼠放回笼中,让母鼠喂养。
在两周至40天后,对之前所示的所有穴位进行常规大鼠按摩治疗。随后,从第7天至第40天每天称量幼鼠体重。将每只幼鼠放置于平衡梁上,引导其朝向另一端的黑色箱子行走。
在第37至39天对受试动物进行平衡木训练,每日三次,并于第40天进行最终测试。记录每只大鼠通过平衡木所需的时间以及后肢滑落的次数。在建立缺血缺氧模型后,模型组大鼠的体重增长速率显著降低。
按摩治疗显著改善了该指标,表明按摩可促进脑性瘫痪幼鼠的生长发育。平衡木实验结果显示,模型组穿越平衡木所需时间长于假手术组和按摩组。相比之下,按摩组后肢打滑次数较模型组显著减少。
本研究介绍了针对脑性瘫痪大鼠模型的按摩操作,旨在改善其运动功能。该研究探讨了可能缓解幼年大鼠脑性瘫痪症状的技术,重点采用传统按摩方法。
在脑性瘫痪的幼年大鼠模型中,标准化腹部按摩方案可实现对运动功能障碍干预措施在临床前阶段的可控性研究。定量行为学输出指标(如平衡木测试表现)可为评估神经调节策略的早期研发团队提供可操作的数据。该方法有助于降低机制层面的风险,并为神经发育障碍相关研发管线的转化连续性提供依据。
本方案融入神经发育障碍研究从早期发现到临床前阶段的连续过程,架起了机制研究与转化验证之间的桥梁。