通过灌注保存心脏死亡后捐献（DCD）猪肝脏及原位肝移植

机械灌注技术已显著提升供体肝脏质量的保存效果，尤其适用于扩展标准肝脏。通过离心泵和氧合器持续输送氧气和营养物质，可维持器官活性并监测肝功能，从而延长保存时间并提高运输成功率。在供体肝脏中应用机械灌注技术的主要挑战在于需借助复杂的设备和熟练的操作来模拟肝脏的生理条件。

在脑死亡后供体（DCD）肝脏模型中，存在的局限性包括肝脏质量下降、保存时间延长以及无肝期的影响，导致实验模型的成功率较低。为克服这些挑战，我们开发了一种具有可变温度控制功能的机械灌注装置，并发现此类装置能够在最大限度减少缺血性损伤的同时有效维持肝脏保存效果。这些改进显著提高了我们脑死亡后供体肝脏移植模型的成功率，并有助于进一步推动机械灌注技术在临床中的广泛应用。

在手术台上将麻醉后的猪仰卧位固定，对皮肤进行消毒后，从正中线开始行腹正中切口，并向右侧横向延伸。仔细分离肝动脉和门静脉周围的组织。随后游离腹腔干，并沿其追踪至腹主动脉。

解剖腹主动脉和下腔静脉以方便采血。依次插管腹主动脉和下腔静脉。将血液收集至含酸性枸橼酸葡萄糖的采血袋中以供后续使用，然后为门静脉安装特定导管。

接下来，在诱导动物心脏停搏后，切除肝脏。保留一段腹主动脉组织用于动脉插管。将肝脏置于无菌器官袋中，并放置于冰上。

在插管胆总管之前，结扎肝脏所有远端动脉分支。将门静脉和腹主动脉的导管连接至机器灌注装置。用 1.5 升灌注液对肝脏进行灌注。

将灌注温度设置为4摄氏度，时间为8小时，然后设置灌注参数，使肝动脉处于25毫米汞柱的压力控制下，门静脉处于每分钟200毫升的流量控制下。当设备处于常温机械灌注模式时，在启动前将系统温度升至37摄氏度。设备预热10分钟后，将猪供体肝脏转移至设备中。

设定动脉灌注压力和门静脉灌注。在第一小时后，将门静脉灌注压力增加至0.75毫升/分钟/克。从装置中取出供体肝脏后，将导管插入门静脉，通过门静脉导管依次进行灌注。

接下来，将一根专用导管插入受体肝脏的门静脉，并使用双头4-0单丝聚丙烯缝线将导管结扎固定，使其与供体门静脉上的对应导管相连。使用双头4-0单丝聚丙烯缝线，行肝上腔静脉端对端吻合。通过匹配的套管连接门静脉两端，以恢复血流。在移除肝上腔静脉的血管夹后，使用4-0单丝聚丙烯缝线行下腔静脉端对端吻合。

用10毫升肝素化生理盐水冲洗供体肝动脉，并在远端放置另一把 bulldog 血管夹以防止反向出血。最后，拔除门静脉导管后，使用4-0单丝聚丙烯缝线吻合门静脉。