2023年10月27日
本方案基于蒙医学理论,阐述了一种用于抑郁症的慢性不可预测性轻度应激(CUMS)模型,并提供了行为学测试的验证方法。
我们的研究范围是蒙医学研究。在本研究中,我们正在探讨蒙医学中导致抑郁的相关因素,尤其关注内因(如风、生物膜)与外因之间的相互作用。传统蒙医模型缺失的问题已得到解决。
本方案旨在基于蒙古医学理论建立动物模型,并为未来蒙古医学研究提供若干建议。在抑郁障碍研究中,建立动物模型对于理解新药的病理机制及作用至关重要。与其他技术相比,本方案更符合传统蒙古医学中抑郁症的发病机制及治疗原则,将有助于推动蒙古医学治疗抑郁症的后续研究。
该方案能够演示外部与内部因素相互作用导致疾病的关联性,符合蒙医理论体系。它将推动传统医学在抑郁症领域的基础研究,并为后续研究者在传统药物的研究、开发与利用方面提供若干建议。将大鼠分为对照组(CON)和模型组(MOD)后,分别单独饲养在笼中。
对于尾部夹持法,固定大鼠的尾巴,并测量其在一分钟内的夹持时间。在水分剥夺法中,从笼中移除饮水瓶,并连续观察记录大鼠24小时。在食物剥夺法中,从笼中移除食物,并连续观察记录大鼠24小时。
在4 °C低温刺激实验中,将大鼠放入盛有冷水的桶中,观察其活动5分钟。随后用吹风机将大鼠吹干,并放回原来的笼子。为施加45 °C热应激,将大鼠放入烘箱中并观察5分钟。
为实现光暗周期的反转,用黑色布料包裹笼子一小时,以模拟白天的黑暗环境。随后在夜间持续光照12小时以模拟白天,并连续记录24小时的数据。在湿润垫料实验中,向含有100克垫料的笼子内倒入200毫升水。
将大鼠放入潮湿的笼子中,观察24小时。按照之前演示的方法将大鼠干燥后,将其放回含有新鲜木屑的笼子中。在笼子倾斜法中,将大鼠放入一个靠在墙边、与地面呈45度角的笼子内,观察24小时。
进行高速振荡时,将大鼠置于设定为160 RPM的机械振荡器中,记录15分钟的数据。施加应激因素后,将模型组笼具从CUMS室转移至饲养室。将大鼠分为对照组(CON)和模型组(MOD)后,分别饲养于各自的独立笼具中。
进行旷场实验时,将一个黑色箱子均分为25个面积相等的正方形区域。在箱内安装视频追踪分析系统。将大鼠置于中央方格中,记录其5分钟内的水平和垂直活动情况。
测试结束后,使用75%酒精对箱子进行消毒,以去除残留的大鼠气味。通过蔗糖偏好实验评估快感缺失时,称量装有水的A瓶和装有1%蔗糖溶液的B瓶。将两个瓶子放置在笼盖上,让大鼠可自由接触两种溶液。
消耗后,称量瓶子,并利用给定公式计算特定天数的60分钟蔗糖偏好率。进行莫里斯水迷宫实验时,将水池分为四个象限,并依次编号为一至四。在第三象限放置一个位于水面下1厘米处的休息平台。
向水池中加入牛奶以增加水的不透明度,并在整个实验过程中维持水温约为 23 摄氏度。将大鼠放置于迷宫的一个象限中,利用莫里斯水迷宫视频追踪系统,记录大鼠在 120 秒内找到平台的潜伏时间。最后,从水池中移除隐藏的平台。
然后将大鼠放入水中,记录120秒内的区域穿越次数。在旷场实验中,MOD组的垂直和水平得分均低于CON组,表明焦虑模型成功建立。28天后,MOD组的蔗糖偏好百分比低于CON组。
莫里斯水迷宫实验显示,MOD组找到平台的潜伏期较长,且穿越平台次数少于CON组。此外,MOD组海马组织中的5HT水平较CON组降低。
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本方案基于蒙古医学理论,提出了一种用于抑郁症研究的慢性不可预测性轻度应激(CUMS)模型,并提供了行为学检测的验证方法。该模型旨在通过传统蒙古医学的独特视角,探讨抑郁症发病的相关因素。
能够重现类似抑郁表型的稳健的临床前模型对于转化神经科学和精神类药物研发至关重要。基于蒙古医学理论的大鼠慢性不可预测性轻度应激(CUMS)方案,可系统性地探究抑郁的机制及行为学终点指标。该模型有助于提高早期靶点验证的预测可信度,并为神经精神类药物的研发管线决策提供依据。
这种基于CUMS的大鼠模型适用于神经精神类药物研发中从早期发现到临床前验证的连续阶段。