Name: 结扎诱导牙周炎小鼠模型的临床前研究优化 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-04-30T14:10:00.000+00:00
Duration: 9 min 26 s
Description: 了解结扎诱导牙周炎小鼠模型的简化方案，使用3D打印工具实现高效可重复的牙周病研究。该方案通过微型CT成像实现骨丢失的定量分析，适用于临床前治疗测试。

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本出版物中报告的研究由美国国家牙科与颅面研究所 &amp;#38; 美国国立卫生研究院颅面研究项目资助编号 K01DE027087（JTM）和 R01DE032830（JTM）。本工作还获得美国国立卫生研究院过敏与传染病研究所资助编号 R01-AI153265（KVS）的支持。上述内容仅代表作者观点，不代表美国国立卫生研究院的官方立场。此外，本研究所报告的工作还得到富布赖特/CAPES 项目（资助代码 001，TA）的支持。

Fabricating 3D Printed Tools in Ligature-Induced Periodontitis Studies in Mice

<ol><li>Offenbacher, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Periodontal+diseases%3A+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Periodontol%22%5BJournal%5D)">Periodontal diseases: pathogenesis.</a> Ann Periodontol. 1 (1), 821-878 (1996).</li>
<li>Alves, T., Swanson, K. V., Girnary, M. S., Freire, M., Moss, K., Divaris, K., Beck, J., Santos, P. C. P., Brickey, W. J., Wrobel, J. A., Min, H. Y., Syed, M., Morelli, T., Seaman, W. T., Preisser, J. S., Hu, D., Preisser, H., Makhanova, N., Susin, C., Vias, N. P., Styner, M., Zhang, S., Pirih, F. Q., Chang, J., Gill, H. S., Lietzan, A. D., Webster-Cyriaque, J., Ting, J. P. Y., Marchesan, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammasome+targeting+for+periodontitis+prevention+is+sex+dependent%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Inflammasome targeting for periodontitis prevention is sex dependent.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 122 (44), e2507092122(2025).</li>
<li>Padial-Molina, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+to+.validate+tooth-supporting+regenerative+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Methods to .validate tooth-supporting regenerative therapies.</a> Methods Mol Biol. 887, 135-148 (2012).</li>
<li>Hajishengallis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Illuminating+the+oral+microbiome+and+its+host+interactions%3A+animal+models+of+disease%5BTitle%5D)+AND+%22FEMS+Microbiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Illuminating the oral microbiome and its host interactions: animal models of disease.</a> FEMS Microbiol Rev. 47 (3), fuad018(2023).</li>
<li>Graves, D. T., Fine, D., Teng, Y. T., Van Dyke, T. E., Hajishengallis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+rodent+models+to+investigate+host-bacteria+interactions+related+to+periodontal+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Periodontol%22%5BJournal%5D)">The use of rodent models to investigate host-bacteria interactions related to periodontal diseases.</a> J Clin Periodontol. 35 (2), 89-105 (2008).</li>
<li>Hasturk, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RvE1+protects+from+local+inflammation+and+osteoclast-+mediated+bone+destruction+in+periodontitis%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">RvE1 protects from local inflammation and osteoclast- mediated bone destruction in periodontitis.</a> FASEB J. 20 (2), 401-403 (2006).</li>
<li>Hasturk, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phase+IIa+clinical+trial+of+complement+C3+inhibitor+AMY-101+in+adults+with+periodontal+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Phase IIa clinical trial of complement C3 inhibitor AMY-101 in adults with periodontal inflammation.</a> J Clin Invest. 131 (23), e152973(2021).</li>
<li>Maekawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+and+intervention+studies+implicating+complement+C3+as+a+major+target+for+the+treatment+of+periodontitis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Genetic and intervention studies implicating complement C3 as a major target for the treatment of periodontitis.</a> J Immunol. 192 (12), 6020-6027 (2014).</li>
<li>Maekawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antagonistic+effects+of+IL-17+and+D-resolvins+on+endothelial+Del-1+expression+through+a+GSK-3beta-C%2FEBPbeta+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Antagonistic effects of IL-17 and D-resolvins on endothelial Del-1 expression through a GSK-3beta-C/EBPbeta pathway.</a> Nat Commun. 6, 8272(2015).</li>
<li>Hajishengallis, G., Hasturk, H., Lambris, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contributing+authors.+C3-targeted+therapy+in+periodontal+disease%3A+moving+closer+to+the+clinic%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Immunol%22%5BJournal%5D)">Contributing authors. C3-targeted therapy in periodontal disease: moving closer to the clinic.</a> Trends Immunol. 42 (10), 856-864 (2021).</li>
<li>Marchesan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+experimental+murine+model+to+study+periodontitis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">An experimental murine model to study periodontitis.</a> Nat Protoc. 13 (10), 2247-2267 (2018).</li>
<li>Ribeiro, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oral+biofilm+dysbiosis+during+experimental+periodontitis%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Oral+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Oral biofilm dysbiosis during experimental periodontitis.</a> Mol Oral Microbiol. 37 (6), 256-265 (2022).</li>
<li>Jiao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+bone+loss+by+pathobiont-mediated+Nod1+signaling+in+the+oral+cavity%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+host+%26+microbe%22%5BJournal%5D)">Induction of bone loss by pathobiont-mediated Nod1 signaling in the oral cavity.</a> Cell host & microbe. 13 (5), 595-601 (2013).</li>
<li>Marchesan, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+inflammasomes+in+the+pathogenesis+of+periodontal+disease+and+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Periodontol+2000%22%5BJournal%5D)">Role of inflammasomes in the pathogenesis of periodontal disease and therapeutics.</a> Periodontol 2000. 82 (1), 93-114 (2000).</li>
<li>Chadwick, J. W., Glogauer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Robust+ligature-induced+model+of+murine+periodontitis+for+the+evaluation+of+oral+neutrophils%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Robust ligature-induced model of murine periodontitis for the evaluation of oral neutrophils.</a> J Vis Exp. (155), e59667(2020).</li>
<li>Collins, F. S., Tabak, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Policy%3A+NIH+plans+to+enhance+reproducibility%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Policy: NIH plans to enhance reproducibility.</a> Nature. 505 (7485), 612-613 (2014).</li>
<li>Landis, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+call+for+transparent+reporting+to+optimize+the+predictive+value+of+preclinical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A call for transparent reporting to optimize the predictive value of preclinical research.</a> Nature. 490 (7419), 187-191 (2012).</li>
<li>Swanson, K. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interferon+activated+gene+204+%28Ifi204%29+protects+against+bone+loss+in+experimental+periodontitis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Periodontol%22%5BJournal%5D)">Interferon activated gene 204 (Ifi204) protects against bone loss in experimental periodontitis.</a> J Periodontol. 93 (9), 1366-1377 (2022).</li>
<li>Sun, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-10+dampens+an+IL-17-mediated+periodontitis-associated+inflammatory+network%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">IL-10 dampens an IL-17-mediated periodontitis-associated inflammatory network.</a> J Immunol. 204 (8), 2177-2191 (2020).</li>
<li>Offenbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((GWAS+for+Interleukin-1beta+levels+in+gingival+crevicular+fluid+identifies+IL37+variants+in+periodontal+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">GWAS for Interleukin-1beta levels in gingival crevicular fluid identifies IL37 variants in periodontal inflammation.</a> Nat Commun. 9 (1), 3686(2018).</li>
<li>Apaza Alccayhuaman, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FasL+is+a+catabolic+factor+in+alveolar+bone+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Periodontol%22%5BJournal%5D)">FasL is a catabolic factor in alveolar bone homeostasis.</a> J Clin Periodontol. 50 (3), 396-405 (2023).</li>
<li>Percie du Sert, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ARRIVE+guidelines+2.0%3A+updated+guidelines+for+reporting+animal+research%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ+Open+Sci%22%5BJournal%5D)">The ARRIVE guidelines 2.0: updated guidelines for reporting animal research.</a> BMJ Open Sci. 4 (1), e100115(2020).</li>
<li>Percie du Sert, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reporting+animal+research%3A+Explanation+and+elaboration+for+the+ARRIVE+guidelines+2.0%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Reporting animal research: Explanation and elaboration for the ARRIVE guidelines 2.0.</a> PLoS Biol. 18 (7), e3000411(2020).</li>
<li>Marchesan, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammasomes+as+contributors+to+periodontal+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Periodontol%22%5BJournal%5D)">Inflammasomes as contributors to periodontal disease.</a> J Periodontol. 91 Suppl (1), S6-S11 (2020).</li>
</ol>

先前发表的研究中用于创建3D打印设备的STL文件9&#160;受北卡罗来纳大学教堂山分校（&#34;UNC-Mouse Surgical Bed 和 UNC-Ligature Holder&#34;，UNC 参考编号：18-0024）的版权协议保护。作者声明不存在竞争性财务利益。

本研究提供了有关先前报道的简化型结扎诱导牙周炎小鼠模型方案的深入信息和详细的分步指导10。本文所包含的细节可显著影响实验的可重复性，并基于该研究团队在使用这一特定结扎诱导牙周炎小鼠模型方面的经验而提出11,12,13,18,19,21。文中详细描述了实验设计的具体内容、3D打印工具的开发与组装过程，以及量化骨破坏的分步操作指南。预计本文提供的详细信息将有助于推广并简化该简化型结扎诱导牙周炎小鼠模型的应用，使其成为未来治疗干预措施开发中一种经济高效的临床前研究模型。
该研究团队11开发的3D打印材料...

牙周病是一种复杂的炎性过程，可导致牙周支持结构的破坏，包括牙龈、牙周膜、牙骨质和牙槽骨。牙槽骨丧失的发生需要牙龈屏障的破坏和细菌侵入，同时伴有炎性细胞的募集，以及免疫反应从以固有免疫为主向以获得性免疫为主的转变1。成骨细胞与破骨细胞之间最终的失衡将导致牙槽骨的破坏性吸收2。区别牙周病与可逆性牙龈炎症（牙龈炎）的关键表型特征是牙槽骨的丧失。因此，在临床前研究中，牙周支持性牙槽骨的量是评估治疗效果的关键指标。
没有一种动物模型能够复制开发不同治疗方法所需的全部生物学特征3,4,5结扎诱导的牙周炎小鼠模型可在相对较短的时间内（3-9天）产生可量化的骨质破坏5，使其成为测试牙周炎预防和调控新型治疗干预措施的经济高效模型。尽管其&#160;成功支持II-III期人体临床试验的开展6,7,8,9,10，小鼠结扎诱导性牙周炎作为临床前模型并不常用。为克服&#160;经典模型中结扎线环绕牙齿所带来技术难题，简化结扎诱导牙周炎小鼠模型11,12 已建立该模型。对经典模型的这一简单改良主要集中在牙齿之间而非牙齿周围的一个明确的骨破坏区域。这种改良具有多重优势，包括缩短以下方面所需的时间：1）人员培训，2）实验操作的技术难度，以及3）结果的可重复性&#160;骨量定量。此外，研究发现，在该简化模型下发生和表现的多种微生物学和免疫学事件，与目前对人类常见牙周病的认识相一致2,11,12,13最后，我们先前已报道的有效药物诱导的骨丢失预防措施2,14 进一步支持将简化的结扎诱导牙周炎模型作为 体内 评估新型牙周治疗关键方面的工具。
简化型结扎诱导牙周炎模型的一个创新之处在于开发了3D打印工具，以更便捷地促进疾病诱导过程11,12尽管对某些人来说较为直观，但研究人员报告称无法组装这些3D打印工具15，这可能会进一步阻碍或延迟动物实验的启动。本研究在我们先前报告的基础上进行了拓展&#160;先前的实验方案研究11并提供详细信息，以确保在实验室环境中成功实施简化的结扎诱导牙周炎模型。本方案中包含的细节属于一系列复杂的因素，这些因素可能导致科学研究结果的可重复性不足。15,16,17多项研究中一致的模型应用和可靠的骨吸收结果2,11,12,14,18 以及合作研究团队13,19,20,21 在过去10年中，支持传播详细信息以促进科学界可重复性的重要性。

<table><tbody><tr><td>刀片</td><td>Integra</td><td>4-315C</td><td>15C 刀片</td></tr><tr><td>陶瓷珠</td><td>VWR</td><td>10158-608</td><td>0.5 mL × 1.4 mm 陶瓷珠</td></tr><tr><td>胶/树脂材料</td><td>The Gorilla Glue Company</td><td>8401519</td><td></td></tr><tr><td>结扎夹持器（带凹槽）</td><td>北卡罗来纳大学教堂山分校 BeAM 设计中心核心设施</td><td>不适用</td><td>118.01 mm × 13 mm × 13.74 mm</td></tr><tr><td>结扎夹持器锁</td><td>北卡罗来纳大学教堂山分校 BeAM 设计中心核心设施</td><td>不适用</td><td>17.5 mm × 14.57 mm × 17.8 mm</td></tr><tr><td>Lulzbot mini v1.0 3D 打印机&amp;nbsp;</td><td>Lulzbot（Fargo Additive Manufacturing Equipment 3D, LLC）</td><td>不适用</td><td>Aleph Objects Lulzbot Mini v1.0 型号</td></tr><tr><td>MicroView 软件</td><td>Parallax Innovations</td><td>2.5.0-3139</td><td>用于骨测量的软件</td></tr><tr><td>小鼠牙科床（带凹槽）</td><td>北卡罗来纳大学教堂山分校 BeAM 设计中心核心设施</td><td>不适用</td><td>103.86 mm × 196.85 mm × 50.99 mm</td></tr><tr><td>小鼠牙科床上盖</td><td>北卡罗来纳大学教堂山分校 BeAM 设计中心核心设施</td><td>不适用</td><td>99.8 mm × 77 mm × 21.5 mm</td></tr><tr><td>聚乳酸（PLA）线材</td><td>Verbatim</td><td>55259</td><td>3.0 mm PLA</td></tr><tr><td>Rapidpure RNA 组织试剂盒</td><td>MP Biomedicals</td><td>112721050</td><td></td></tr><tr><td>手术刀片手柄</td><td>Bard-Parker</td><td>371030</td><td>15C 手术刀片手柄</td></tr><tr><td>丝线缝合线</td><td>Roboz Surgical Instrument</td><td>SUT-15-1</td><td></td></tr><tr><td>Taqman qPCR 引物</td><td>Thermo Fisher</td><td>Rank (Mm00437135_ m1), Rankl (Mm00441906_ m1), Opg (Mm00435452_ m1), Gapdh (Mm99999915_g 1)</td><td></td></tr><tr><td>VX-765</td><td>&amp;nbsp;InvivoGen, San Diego, USA</td><td>#inh-vx765-1</td><td>用于宿主调节的 Caspase-1 抑制剂</td></tr></tbody></table>

用于临床前研究的结扎诱导牙周炎小鼠模型的优化

Optimization of the Ligature-induced Periodontitis Mouse Model for Preclinical Research

小鼠结扎诱导牙周炎的实验模型在理解牙周病发病机制方面发挥了基础性作用；然而，该模型在转化研究和治疗应用方面尚未得到充分利用。与人类疾病相似，小鼠结扎诱导的牙周炎通过一系列明确的微生物、炎症及骨免疫学事件发展而来。结扎引起的牙槽骨破坏在相对较短的时间内进展，且易于量化，使其成为一种经济高效的临床前研究疾病模型。
为克服经典结扎模型的技术难题，研究人员建立了简化的结扎诱导型小鼠牙周炎模型。该简化模型并非在两颗相邻牙齿的整个周径诱导疾病，而是仅针对两颗后牙的邻间区域引发炎性骨质破坏，此区域亦是人类常见牙周病的起始部位。由于该方法采用三维（3D）打印工具辅助结扎，操作快速且高效&#160; 领先的&#160;每只小鼠的操作时间为5-10分钟。结扎后3天可检测到破骨细胞生成信号，而骨破坏则在结扎后9天持续出现。
在此，通过强调研究设计中的关键要素（即功效计算、操作标准化、校准），对简化的结扎模型方案进行了详细阐述，并介绍了3D打印工具的开发（即 &#34;小鼠牙床&#34; 和 &#34;结扎夹持器&#34;），以及采用μCT分析进行牙槽骨定量。牙龈基因表达的检测 Rank、Rankl 和 Opg 作为治疗有效性的间接证据，破骨细胞生成的关键调控三联因子被广泛应用。本文所述方法将指导研究者在临床前阶段应用简化的结扎诱导性牙周炎模型，以评估创新性牙周治疗手段的效果。

野生型雌性和雄性小鼠在基线（健康状态）和结扎后9天的线性牙槽骨测量值的代表性数据分析如图所示 图1A功效计算表明，如果主要结局指标为通过μCT测量的线性骨水平，则每组需要4-5只小鼠，共需10只小鼠，以检测各组之间的差异图1B）。然而，临床前研究的统计功效计算要求两组小鼠均需发展出牙周炎，但其中一组接受治疗干预图1C）。对于此类研究，每组所需小鼠数量较多，为19–31只（图1D）。临床前研究中所需动物数量较多主要有两个原因：1）虽然两组均诱导疾病发生，但仅对其中一组施加实验干预，这会增加结果的变异性并影响可重复性；2）
将牙槽骨测量值与破骨细胞生成主调控三联体 Rank-Rankl-Opg 的信号特征相整合2 可为揭示驱动骨代谢调控的机制提供重要见解。为验证实验性药物VX-765（caspase-1...

结扎诱导型牙周炎小鼠模型是研究牙周病的一种有效且日益普及的工具。本文详细介绍了该模型的一种简化版本的实施方法，重点在于邻间隙牙槽骨破坏，包括实验室研究设计、3D打印工具的制作，以及利用μCT分析进行骨量定量。

小鼠结扎诱导牙周炎的实验模型在理解牙周病发病机制方面发挥了基础性作用；然而，它……

本实验室研究牙周病，探讨炎症如何在不同人群中引起牙龈和骨组织损伤。我们致力于通过靶向疾病中的新参与者和新通路来抑制牙龈炎和牙周炎。简化的结扎诱导型牙周炎小鼠模型在牙齿之间使用双结单线，结合3D打印工具、小鼠牙床及结扎线夹持器，其操作较传统模型更为简便。该方法采用吸入麻醉技术，与使用注射麻醉的传统模型相比，可使小鼠恢复更快，恢复时间少于10分钟，而注射麻醉的恢复时间通常约为30分钟。准备小鼠牙科床组件时，将所有牙科床部件及胶水放置在工作平台上，然后使用胶水将头部固定部件固定到位。使用15C手术刀柄安装3号刀片，以45度角对结扎夹持器锁外部的锋利边缘进行斜面处理，以减少锁定或解锁过程中的不适感。将结扎夹持器锁内部的任何圆角修整为直角。去除3D打印件顶部和底部边缘的毛边，并将这些边缘以45度角进行倒角处理。以45度角切除结扎夹持器每个尖端的一小部分，以防止对软组织造成创伤性损伤。确保结扎夹持器的每个尖端均带有V形凹槽。若该V形凹槽可见，将15C手术刀片轻轻置入凹槽底部。现在，小心地将刀片朝向打结器尖端的外表面倾斜，并修整外缘V形切口的底部。如果V形切口不可见，将15C手术刀片置于打结器尖端中央，然后以一次明确的动作进行浅切，形成V形切口。在将结扎线穿入凹槽时，从打结器前方观察，应确保两个结位于中央且处于同一水平。使用牙科探针确认，在结之间施加轻柔力量时，结扎线能回弹到位而不滑脱。进行结扎线放置时，将麻醉后的小鼠置于小鼠牙科床上，使其背部紧贴床面，鼻部靠近鼻罩。使用橡胶带固定小鼠头部并张开其口腔。在右侧放置结扎丝时，右手持结扎丝夹，左手持探针。将探针尖端轻柔地置于第一和第二磨牙邻面接触区的腭侧下方。先用探针尖端接触牙齿表面，然后向下滑动并轻轻抵住牙龈边缘，以避免损伤软组织。将探针手柄置于水平角度，确保其位置正确。正确使用探针尖端进行结扎丝放置。将探针钩入近中接触区，并固定头部以抵抗反作用力。使用结扎钳牵拉颊部组织，将结扎丝置于第一和第二磨牙之间的邻接点处。接着，将结扎钳手柄旋转最多45度，通过轻柔的摆动和滑动相结合的方式，将结扎丝推过邻接点。使用精细的针持钳夹住右侧结扎结上附着的多余结扎丝。将线从牙齿间向左拉出，并将剪刀沿缝线向下滑动，直至距离结约1.5毫米处，然后剪断。进行微型CT分析时，打开软件，点击“文件”，然后选择“导入图像”。在弹出菜单中，点击“浏览”。转到包含一次扫描的 DICOM 文件的文件夹，并选择第一个文件。单击“Examine”以查找并选择该文件夹中同一扫描样本的其他所有文件，然后单击“OK”。当图像开始加载后，单击“Visualize”和“Isosurface”。将图像阈值更改为 5,000，表面质量因子百分比更改为 55。勾选启用图像平滑和使用当前 ROI 裁剪表面的复选框，然后点击更新。如需调整窗位属性，请在底部右键单击窗位，然后点击编辑窗位属性。将骨密度值设置为 2,000，并在所有测量中保持该值恒定。要操作平面，请使用键盘快捷键 IJK 来隐藏和显示三个不同平面。右键点击并移动光标以放大和缩小。按住 Shift 键并单击左键以平移。然后，单击“切片”以移动和旋转平面。接着，单击平面中心以将平面前移或后移。或者，将光标置于目标平面的中心，使用上下箭头键逐层移动平面。单击平面的边缘，可围绕该边缘在平面中心的平行线进行旋转。单击平面的角点，可围绕该平面进行旋转。接下来，调整屏幕上部以蓝色显示的Z轴切面，使三颗牙齿的表面同时或尽可能同时可见。然后，沿相同的Z轴切面方向滚动，直至第一和第二磨牙的牙根清晰可见，并确保周围解剖结构及根管轮廓清晰明确。将x轴与第一和第二磨牙的颊侧牙根对齐，穿过每个根管的中心部位。或者，通过对第一磨牙的颊根和第二磨牙的远中颊根进行对齐。接下来，以X切面的方向作为Y切面定位的参考。在X切面面板中，使Y切面垂直平行于第一磨牙的牙根进行对齐。旋转平面使牙根呈垂直方向，并观察蓝色线条是否穿过牙根的中点。在Y切片面板中，为测量从釉牙骨质界（CEJ）到牙槽骨嵴顶（ABC）的距离，先将光标置于CEJ处沟槽的最深点，然后按1；接着将光标移至ABC的最近点，再按2。蓝色箭头表示第一个点，绿色箭头表示第二个点。如果用于指示测量点的箭头未立即显示，可将光标悬停在目标区域并按下键盘上的数字键。如果难以确定釉牙骨质界（CEJ），可使用上下箭头键滚动查看相邻切片，以确认其位置。当难以确定ABC的最近点时，应测量多个点以确保测量的一致性。尽管我们在相关实验方案论文中取得了成功，但新进入该领域的研究人员在组装和使用3D打印工具（如小鼠牙床、结扎线固定器）时仍存在困难。为解决这一问题，我们制作了分步操作视频，指导研究人员完成这些3D打印工具的组装与使用，以便其能够在实验室环境中顺利应用。我们的研究团队利用临床研究和简化的结扎诱导牙周炎模型，揭示了一组名为炎性小体的蛋白质如何能够抑制炎症和牙周炎的发展。

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Research

科研

JoVE Journal

Immunology and Infection

免疫学与感染

结扎诱导牙周炎小鼠模型的临床前研究优化

本文介绍了一种在小鼠中局部诱导根尖周炎的实验方案。我们展示了如何在小鼠牙齿上钻孔并暴露其牙髓，以引发局部炎症。同时演示了用于研究该炎症性质的分析方法，如显微CT和组织学分析。...

在小鼠中诱导根尖周炎

本文介绍了一种建立结扎诱导的多颗上颌磨牙小鼠牙周炎模型的方案，该模型可导致更大范围的牙龈组织和骨组织受累，便于后续分析，并减少实验动物的使用量。同时描述了一种类似于人类受试者检测方法的口腔中性粒细胞评估技术。...

用于评估口腔中性粒细胞的稳定的小鼠牙周炎结扎诱导模型

本研究介绍了一种诱导大鼠牙周炎的动物模型 通过 一种保留性结扎联合重复注射源自脂多糖的治疗方法 牙龈卟啉单胞菌，持续14天作用于上颌第一磨牙周围。结扎联合LPS注射技术可有效诱导牙周炎，导致牙槽骨吸收和炎症反应。...

牙周炎的诱导 通过 大鼠模型中结扎联合脂多糖注射的方法

本报告介绍了一种小鼠结扎线诱导种植体周围炎的实验模型。我们详细描述了所有手术步骤，包括动物的术前和术后管理、拔牙、种植体植入以及结扎线诱导的种植体周围炎的建立过程。...

小鼠结扎诱导种植体周围炎的实验模型

本研究描述了一种改良的6-0尼龙结扎法，用于在小鼠中诱导牙周炎，该方法具有高度可重复性，为研究人员提供了一种从疾病发生到病理后果全过程研究牙周病的替代方法。...

上颌第二磨牙尼龙结扎诱导的小鼠重度牙周炎模型

用于研究靶向微血管系统的细菌感染的人源化小鼠模型

本研究描述了一种基于将马源FcεRIα基因转染入大鼠嗜碱性白血病细胞而构建的基因工程检测系统的开发与应用。转染后的细胞可表达功能性受体，其过敏反应介质的释放可由IgE和抗原激活。...

一种方法的开发 体外 用于研究相互作用的模型系统 马属 caballus IgE 及其高亲和力受体 FcεRI

炎症在缺血性脑卒中的发病机制中起着核心作用。越来越多的证据表明，炎症具有双重作用：一方面会加剧早期脑损伤，另一方面也参与后期的修复过程。本方案描述了从缺血脑组织中分离免疫细胞，并对其进行后续流式细胞术表型分析的方法。...

从小鼠缺血脑组织中分离免疫细胞及其流式细胞术分析

定量微量中和试验的优化

本文所述方法可通过非侵入性生物发光成像（BLI）技术，对小鼠肺部由IL-8启动子依赖性炎症激活进行可视化观察。在递送荧光素酶报告载体后，同一动物可在长达两个月的时间内多次接受BLI检测。...

一种白细胞介素-8瞬时转基因小鼠模型用于 体内 长期监测炎症反应

了解结扎诱导牙周炎小鼠模型的简化方案，使用3D打印工具实现高效可重复的牙周病研究。该方案通过微型CT成像实现骨丢失的定量分析，适用于临床前治疗测试。

用于临床前研究的结扎诱导牙周炎小鼠模型的优化

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