Name: 训练实验兔改进常规饲养程序 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-02-16T13:50:00.000+00:00
Duration: 5 min 21 s
Description: 学习使用正强化训练技术改进实验兔的常规饲养程序。本研究通过运输箱操作与行为观察，展示温和处理方法如何减少兔子应激反应并提升动物福利水平。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

作者感谢动物饲养员对兔子的悉心照料，以及他们富有同情心且专注敬业的工作。感谢 Kai Diederich 对手稿的校对。

动物饲养工作已获得柏林州政府机构（&#34;Landesamt für Gesundheit und Soziales&#34;，许可证编号：ZH3 - 德国联邦风险评估研究所，柏林）的批准。训练方案是在常规动物饲养管理框架内制定的，旨在优化操作流程，例如动物抓取、健康检查和称重。由于训练方案未引起任何疼痛、痛苦或伤害，且所有观察均在常规动物饲养管理过程中进行，根据欧洲立法，本研究不被视为动物实验。
1. 培训的一般要求
注意：以下要点通常适用于动物训练，与本方案无关。
<ol>
	<li>对动物进行清晰标记以用于识别。</li>
	<li>确保准备高质量的奖励物，例如适口性极佳的食物。</li>
	<li>制定训练计划，包括通向目标行为的所有步骤，即动物应表现出的期望行为。 
	注意：目标行为应通过逐步塑造完成，每一步骤均需有明确的客观标准，且应易于实现。</li>
	<li>确定动物需成功完成80%还是100%的训练步骤后，方可进入下一步训练。</li>
	<li>准备好记录文档（例如，补充表1）。</li>
	<li>避免在匆忙时进行训练，并注意自身举止、语调和动作速度，即应轻声、平静地说话，缓慢且可预测地移动。</li>
	<li>测试前一次训练中已训练的步骤。</li>
	<li>当动物整体健康状况不佳和/或对与训练者互动缺乏兴趣时，不应进行训练。</li>
</ol>
本方案的训练流程
注意：以下训练程序是为本方案所定义的。
<ol>
	<li>在动物房/栏内设置训练区域（图2）并根据训练目标行为的需要，将秤或转运箱（底面 30 cm × 50 cm；门 27 cm × 25.5 cm；盖子上开孔 16 cm × 39 cm）放置在实验区域内。</li>
	<li>将秤和运输箱放置在实验区域外，以便在目标行为开始前使兔子熟悉这些新物体 &#34;称重&#34; 和 &#34;转运箱&#34; 经过培训。</li>
	<li>对于目标行为（见步骤6-9），按照步骤5.7所述，将兔子带入训练区域。</li>
	<li>坐在地板上，或在训练区域使用矮凳/台阶就座。</li>
	<li>依次按照方案中描述的顺序训练各个目标行为，而非同时进行。若动物连续两天未能学会某一目标行为的某个步骤，则可例外，同时训练下一个目标行为。若调整目标行为的顺序有利于个体的训练进程，则可改变训练顺序。</li>
	<li>在适应环境并引入点击器后，开始对所有动物进行1的训练st 目标行为的步骤 &#34;靶向之后&#34; （即目标棒末端的球体被定义为目标）。注意，根据每只动物的个体表现，它们在当天可能达到不同的训练阶段。在接下来的几天中，根据动物的个体进展继续训练。</li>
	<li>每周每个工作日安排一次培训课程（例如，每组六到七只动物约需30分钟）。 
	注意：当训练员进入动物房间/围栏并准备开始训练时，训练环节即为开始。当所有兔子均未参与（或不再参与）训练，或所有兔子均已达到本环节目标行为的最终训练步骤时，训练环节结束。每次训练环节应从该方案中上一次成功的步骤开始。每个训练环节包含每只动物至少一次或多次试验。</li>
	<li>开始一次训练时，让动物执行特定的训练步骤（例如，在兔子学会用鼻子/嘴触碰目标后进行步骤3.1），当动物不再参与训练或已达到目标行为的最终训练步骤时，结束本次训练。训练结束时，打开训练区域，引导兔子离开训练场；然后将目标棒（目标端朝向天花板）和奖励碗置于胸前。</li>
	<li>在喂食、清洁、治疗或实验操作之前安排训练。</li>
	<li>使用带有集成式点击器的奖励碗（图3, 补充编码文件 1以及针对某些目标行为的额外目标棒。</li>
	<li>用适口性食物填满奖励碗，例如葵花籽和以谷物为基础的觅食零食。 
	注意：兔子是食叶动物，这些奖励示例并非最佳选择；然而，由于实验动物设施内的卫生限制，这些是目前可提供的最佳替代方案。如果条件允许，应优先选用新鲜香草作为食物奖励。需注意，只有当兔子真正偏爱某种物品时，它才能成为有效的奖励。</li>
	<li>确保始终将奖励碗放在同一位置，例如胸前，并且只有在发出“咔哒”声后才开始将奖励碗移向兔子。目标行为除外 &#34;饲养&#34; 和 &#34;跳到膝上&#34;一手持目标棒，另一手持奖励碗。</li>
	<li>在兔子正确表现出目标行为时，立即将奖励呈现在其鼻部/口部所处的位置。</li>
	<li>注意在给予奖励时，让兔子仅摄入少量食物。</li>
	<li>如果一只兔子在连续五次尝试中有至少四次表现出目标行为（成功率80%），则进入下一步。若动物无法完成下一步操作（即失败超过一次），则返回到该方案的前一步。如果需要返回前一步，或兔子未参与训练，应修订训练方案（例如，设定更小的训练步骤），更换另一种（更适口的）食物奖励，或检查训练人员的训练技能。</li>
	<li>如果一只兔子正确完成了目标行为的最后一步训练，则应在当天结束对该兔子的训练。</li>
	<li>打印记录表（补充文件 1），详细的训练方案以及简化的训练方案（补充文件 2）并将其固定在剪贴板上或在平板电脑上打开。使用记录表记录每只动物在各次训练中达到的训练步骤。</li>
</ol>
3. 情境性条件作用/习惯化
注意：情境条件化/适应性训练由训练员和动物饲养员每天进行，每组兔子约持续15分钟，连续五天（周一至周五）。
<ol>
	<li>轻声与兔子交谈。</li>
	<li>提供适口性好的食物作为奖励。 
	注意：需注意兔子饮食的突然变化可能引起消化问题，因此应逐步引入新的食物奖励。</li>
	<li>将装有适口性好食物的食碗移向兔子，让它们从中进食。</li>
	<li>在不束缚兔子的情况下，轻柔地触摸其颈部、肩部、背部和臀部。</li>
</ol>
4. 引入点击器
注意：目标行为：在听到咔嗒声后，靠近训练者并从碗中取食奖励食物。目标是让兔子将食物奖励与咔嗒声关联起来，即兔子在听到咔嗒声后取食奖励食物。
<ol>
	<li>让兔子靠近。</li>
	<li>点击一次，然后将奖励碗移向兔子（称为“点击并给予奖励”或 C 和 T）。</li>
	<li>重复步骤 4.2 十次。第十次点击时，延迟一秒钟再给予奖励，并观察兔子的行为。 
	注意：如果动物在点击后立即寻找奖励，则可认为次级强化物的条件反射已成功建立。</li>
	<li>如果兔子在点击后至少八次未食用食物奖励，则于次日重复步骤 4.1–4.3。</li>
</ol>
5. 跟踪目标
注意：目标行为：用鼻子/嘴跟随并触碰目标。第6-9节中的目标行为是第5节中所述目标行为的变体。
<ol>
	<li>将目标物置于兔子的鼻/口附近。 
	注意：目标棒末端的球体定义为目标。
	<ol>
		<li>当兔子用鼻子/嘴接触目标时记录 C 和 T。 
		注意：确保兔子的鼻/口仅接触球部，不得在任何非指定位置接触棒体。</li>
		<li>在奖励的同时将目标从兔子的视野中移除。</li>
		<li>重复上述所有步骤五次，直至兔子在五次中有至少四次成功完成该步骤（成功率为80%）。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将目标物体放置在另一个位置，使动物仅通过头部运动（无需移动整个身体）即可用鼻部或口腔触碰到。
	<ol>
		<li>当兔子用鼻子/嘴触碰目标时，记录 C 和 T，并执行步骤 5.1.2 和 5.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将目标物体放置在距离兔子较远的位置，让兔子伸展身体朝向它。
	<ol>
		<li>当兔子用鼻子/嘴触碰目标时，记录 C 和 T，并执行步骤 5.1.2 和 5.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>进一步增加目标物与兔子之间的距离，使动物需要跳跃一次才能到达目标物。
	<ol>
		<li>当兔子用鼻子/嘴触碰目标时，记录 C 和 T，并执行步骤 5.1.2 和 5.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将目标物体置于兔子鼻部/嘴部正前方，使兔子能够触碰到目标，然后缓慢将目标从兔子处移开。确保兔子需通过数量不等的跳跃才能跟随目标。 
	注意：在五次尝试的区块中，第1次st, 2nd, 3rd, 4th，以及 5th 兔子分别在跳跃2次、1次、2次、3次和2次后得到奖励（平均：每跳跃2次后奖励一次）。
	<ol>
		<li>当兔子完成所需跳跃次数时，执行步骤 5.1.2 和 5.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>重复步骤 5.5，将目标物体在两个物体之间的通道中移动。 
	注意：此步骤中，将两个物体（如隧道）相互平行放置，形成一条走廊。
	<ol>
		<li>当兔子完成所需跳跃次数时，执行步骤 5.1.2 和 5.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>重复步骤5.5，将目标物移向训练区域，使兔子进入其中。
	<ol>
		<li>当兔子完成所需跳跃次数后，进行 C 和 T，并执行步骤 5.1.2 和 5.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
6. 称重
注意：目标行为：在体重秤上停留至少一秒钟。 如果秤面过于光滑，可在其上方放置防滑垫。但有些兔子倾向于啃咬该垫子。
<ol>
	<li>按照步骤5.5所述，使用目标棒引导兔子走向秤。
	<ol>
		<li>当兔子用鼻子/嘴接触目标时，按 C 和 T 键。</li>
		<li>在奖励的同时将目标从兔子的视野中移除。</li>
		<li>重复上述所有步骤五次，直至兔子在五次中有至少四次成功完成该步骤（成功率为80%）。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将目标物略微移至刻度上方，使兔子以前肢踏上秤台，并用鼻/口接触目标物。
	<ol>
		<li>C 和 T，并执行步骤 6.1.2 和 6.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将目标物略微移过秤的中心，使兔子用前爪踏上秤面，并伸展身体越过秤面，用鼻子或嘴触碰目标物。
	<ol>
		<li>C 和 T，并执行步骤 6.1.2 和 6.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将目标物移至秤的中心更远处，使兔子用前爪和后爪站在秤上，并用鼻子/嘴触碰目标物。
	<ol>
		<li>C 和 T，并执行步骤 6.1.2 和 6.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>按照4.4节所述，将兔子引导至秤上，等待数秒后读取C和T值。 
	注意：在此步骤中，在兔子于秤上静坐不定时间段后给予奖励。在连续五次尝试的一个区块中，第1次st, 2nd, 3rd, 4th，以及 5th 时间分别为0.5、1.0、2.0、0.5和1.0秒（平均1.2秒）后，给予兔子奖励。在此期间，若兔子保持静止，即可从天平读取体重。若天平需要更长时间才能稳定并完成体重测量，应延长动物在天平上的停留时间。
	<ol>
		<li>C 和 T，并执行步骤 6.1.2 和 6.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
7. 进入转运箱
注意：目标行为：进入并离开运输箱。训练期间使用一个运输箱（底面尺寸 30 cm × 50 cm；门洞尺寸 27 cm × 25.5 cm），箱盖顶部设有开口（16 cm × 39 cm），底部铺有污染过的垫料。
<ol>
	<li>如步骤 5.5 所述，使用目标棒引导兔子走向箱子。
	<ol>
		<li>当兔子位于箱子入口前方时进行 C 和 T。</li>
		<li>在奖励的同时，将目标棒移出兔子的视野范围。</li>
		<li>重复上述所有步骤五次，直至兔子在五次中有至少四次成功完成任务（成功率为 80%）。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将目标棒从箱盖开口处伸入，并移入箱内，以此引导兔子前肢进入箱内。
	<ol>
		<li>进行 C 和 T，并执行步骤 7.1.2 和 7.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>执行步骤 7.2，引导兔子完全进入箱内（即前肢和后肢均进入箱内）。
	<ol>
		<li>进行 C 和 T，并执行步骤 7.1.2 和 7.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>执行步骤 7.3，将箱子的门关闭数秒，然后再次打开门。
	<ol>
		<li>进行 C 和 T，并执行步骤 7.1.2 和 7.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>执行步骤 7.5，将箱子轻轻抬起一小段距离（即离地面几厘米），然后将箱子放回地面，并打开门。
	<ol>
		<li>进行 C 和 T，并执行步骤 7.1.2 和 7.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>执行步骤 7.5，然后使用目标棒引导兔子从箱内走出。
	<ol>
		<li>进行 C 和 T，并执行步骤 7.1.2 和 7.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
8. 培养
注意：目标行为：直立时将前爪放在手心上。训练期间，用同一只手同时握住目标棒和奖励碗。
<ol>
	<li>将目标物置于兔子头部上方，使兔子伸长鼻子向上触碰目标物的鼻/口部，同时四肢均保持在地面上。
	<ol>
		<li>C 和 T。</li>
		<li>在给予奖励的同时，将目标物移出兔子的视野范围。</li>
		<li>重复上述所有步骤五次，直至兔子在五次中有至少四次成功完成该步骤（成功率为 80%）。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>如步骤 8.1 所述，将目标物置于兔子头部上方。当兔子向上伸长鼻子后，将目标物进一步向上移动，使兔子前肢离地并用鼻/口部触碰目标物。
	<ol>
		<li>C 和 T，并执行步骤 8.1.2 和 8.1.3。 
		注意：如果兔子无法完成步骤 8.2，可在 8.2 之后增加一个过渡步骤。具体操作为：执行步骤 8.2 后，用空出的手掌接近并触碰兔子的前肢（掌面）。然后进行 C 和 T，并执行步骤 8.1.2 和 8.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将空出的手掌置于兔子前方，并将目标物移至兔子头部上方，使兔子将前肢放在手掌上，同时用鼻/口部触碰目标物。
	<ol>
		<li>在兔子将前肢放上手掌后一秒钟进行 C 和 T，并执行步骤 8.1.2 和 8.1.3。 
		注意：当兔子的前肢放在训练者的手掌上时，可对其腹部进行目视检查。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
9. 在膝上跳跃
注意：目标行为：跳到训练员腿上并保持坐姿，同时接受触摸。在执行步骤 9.5–9.9 时，需用同一只手同时握住目标棒和奖励碗，因为另一只手需要用于触摸兔子。
<ol>
	<li>按照第5.5步方案所述，使用目标棒引导兔子靠近训练员。
	<ol>
		<li>当兔子用鼻子/嘴触碰目标时，进行C和T。</li>
		<li>在给予奖励时，将目标从兔子的视野中移开。</li>
		<li>重复上述所有步骤五次，直至兔子在五次中至少成功完成四次（成功率为80%）。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将目标移至训练员腿部上方，使兔子将前爪放在训练员腿上，以便用鼻子/嘴触碰目标。
	<ol>
		<li>C和T，并执行步骤9.1.2和9.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将目标移至训练员腿部上方并稍远离兔子，使兔子将前爪放在训练员腿上并向前伸展，用鼻子/嘴触碰目标。
	<ol>
		<li>C和T，并执行步骤9.1.2和9.1.3。 
		注：如果兔子无法完成步骤9.4，可在步骤9.3之后增加一个过渡步骤。具体操作为：执行步骤9.3，然后用奖励碗引诱兔子跳到训练员腿上。当兔子四只爪子均置于腿上时，进行C和T，并执行步骤9.1.2和9.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将目标进一步移至训练员腿部上方且更远离兔子的位置，使兔子跳上训练员腿上以用鼻子/嘴触碰目标。
	<ol>
		<li>C和T，并执行步骤9.1.2和9.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>执行步骤9.4，当兔子坐在腿上时，用空着的手从头侧向尾侧（从肩部开始）轻轻抚摸兔子。
	<ol>
		<li>C和T，并执行步骤9.1.2和9.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>执行步骤9.4，当兔子坐在腿上时，用空着的手从头侧向尾侧轻轻抚摸兔子的耳朵。
	<ol>
		<li>C和T，并执行步骤9.1.2和9.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>执行步骤9.4，当兔子坐在腿上时，轻轻抓住兔子的一只耳朵进行视觉检查。
	<ol>
		<li>C和T，并执行步骤9.1.2和9.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>执行步骤9.4，当兔子坐在腿上时，用空着的手抚摸其前爪或后爪。 
	注：若兔子右侧身体朝向训练员、左侧身体背向训练员，则可轻触左侧爪子（反之亦然）。确保交替训练两侧。
	<ol>
		<li>C和T，并执行步骤9.1.2和9.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>执行步骤9.4，当兔子坐在腿上时，用空着的手小心地抬起其一只前爪或后爪。 
	注：抬起爪子时可检查爪甲。确保交替训练两侧。
	<ol>
		<li>C和T，并执行步骤9.1.2和9.1.3。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

Positive Reinforcement-Based Training for Routine Rabbit Husbandry Procedures

作者声明本出版物不存在利益冲突。

2015年至2019年间，欧盟（及挪威）共有超过4900万只动物被用于科学目的，其中兔子为1,745,037只（占3.5%）1兔子主要用于法规性研究（如质量控制、毒理学及其他安全性测试，包括药理学）以及生物制品的常规生产（如血液制品）2尽管人们已努力以无动物方法替代动物实验，但某些研究目的仍需使用动物。当动物实验无法被替代时，至关重要的是减少使用动物的数量，并优化实验过程以及饲养和管理条件，以最大程度减轻动物痛苦。Russel 和 Burch 于 1959 年将这一策略描述为“3R 原则”（替代、减少、优化）3 并于2010年被纳入欧盟关于用于科学目的的实验动物保护的指令2010/63/EU4“3R原则中精炼化的角色，有时被称为‘3R中的灰姑娘’”5，其重要性日益凸显。尽管替代和减少动物使用是实现指令最终目标——全面取代动物实验——的长期策略，优化措施却能够立即改善动物福利。5，这反过来有可能提高科学质量6动物操作与训练是优化措施的关键组成部分，这一点在欧盟指令2010/63/EU附件III中已明确指出。该指令规定，动物设施应针对实验动物的物种、实验程序及研究项目，设计相应的适应性驯化与训练方案。4. 欧洲药典标准第123号附录A建议，实验动物工作人员应投入时间 &#34;与动物交谈、接触、训练和护理&#34;7.
某些操作程序会引起动物应激反应，尤其是对兔子等陆生猎物动物而言。例如，在进行健康检查或实验操作时，动物被逼入角落、受到束缚（即被人抓握、抱在怀中或被器械固定）以及被提起（即从地面被拾起）等情况均可能引发应激8。一项针对宠物兔的调查显示，57%至61%的兔子在被提起时会出现挣扎行为9,10，部分个体甚至表现出与恐惧相关的攻击行为（例如咬人）11。这凸显了采用温和操作和训练技术的重要性。已有研究表明，在小鼠等其他小型哺乳动物中，温和的操作技术可降低其焦虑水平12。此外，温和操作结合训练能够减少小鼠的应激、焦虑以及类抑郁行为13。在恒河猴和黑猩猩中，若动物事先接受过相关操作的训练，则其与应激相关的生理指标变化较小14,15。可以推测，如果动物能够自主选择是否参与训练，它们便能主动参与并掌控所处情境，从而改善动物福利，并可能有助于获得更稳健、可靠的科学数据16。
许多动物训练程序依赖于操作性条件反射原理，尤其是正向强化和行为塑造17,18,19。操作性条件反射要求动物产生某种行为，随后该行为可被增强或减弱20。描述操作性条件反射的常见四种依随关系包括：正向强化、负向强化、正向惩罚和负向惩罚21,22。在兔子训练中，当人接近动物（非期望刺激）以驱使其远离或移向某一特定位置时，即使用了正向惩罚23。在实验台上操作兔子的情境中，负向强化的一个例子是当兔子保持静止时，解除对其身体施加的压力（非期望刺激）；负向惩罚的例子则是当兔子开始挣扎时，撤除食物奖励（期望刺激）。在动物训练中，不推荐使用正向/负向惩罚或负向强化。惩罚会引起负面情绪反应24，例如在犬类中观察到的痛苦表现25。相反，正向强化应作为动物训练的首选方法25,26。正向强化训练（PRT）是指在动物表现出期望行为后，给予一种期望刺激（如食物奖励），从而提高该动物未来再次表现该期望行为的可能性27。PRT 通常涉及使用条件性强化物。条件性强化物（次级强化物）通常是一种中性刺激，例如某种声音，动物通过学习将其与非条件性强化物（初级强化物，如食物奖励）关联起来28。当动物表现出期望行为后，立即呈现条件性强化物，随后给予食物奖励26。PRT 的一个著名例子是响片训练，其中使用响片发出“咔哒”声作为次级强化物26。
训练应遵循可预测的模式，这可通过设计训练方案来实现。训练方案描述了如何逐步达到目标行为（即行为塑造），其中每一步都由客观标准定义，并应易于完成26。如果训练遵循特定的方案，则实验室动物工作人员可以轮换进行动物训练。需要注意的是，相关人员必须了解学习原理和训练技术，才能正确地加以应用26。动物训练通常包含行为塑造。行为塑造法最早由斯金纳（Skinner）及其同事在20世纪40年代初有意使用29。相比之下，在此前的研究中，斯金纳更关注&#34;对物理环境进行微小改变，以实施逐步逼近的程序&#34;29。他在《科学美国人》杂志发表的一篇文章中解释道，强化某种行为会增加该行为被重复的可能性，这&#34;使得塑造动物行为几乎如同雕塑家塑造一块黏土一般&#34;30。自那时起，行为塑造在圈养动物中的重要性日益增加29,30,31,32。为了复制和改进行为塑造方案，以系统且客观的方式评估这些方案至关重要33,34,35,36。
Pfaller-Sadovsky 等人最近发表的一项系统综述与荟萃分析发现，条件性强化研究最常在马和狗中进行，但猫、牛、鱼、山羊以及非人灵长类动物也已被研究37。在实验动物科学领域，阳性强化训练（PRT）被广泛应用于非人灵长类动物38,39,40和狗41,42。此外，在实验室环境中，猪43、山羊44以及小型哺乳动物如小鼠13和大鼠45,46,47也已成功通过使用响片进行训练。据作者所知，针对实验兔的 PRT 应用报道仍极为罕见48；数十年前发表的现有同行评审文献已过时，无法满足现代伦理研究的标准。尽管一些非同行评审的信息表明，兔子可通过 PRT 成功训练49，但在实验动物设施中饲养的兔子适用训练方案方面，目前仍缺乏系统知识。其潜在原因可能多种多样。例如，研究文章中可能未详细描述所使用的训练技术，或相关数据是为监管性研究生成因而未予发表。此外，由于小鼠和大鼠在科研中使用更为频繁，兔子可能并未成为优化研究的主要关注对象。由于兔子能够极好地掩饰压力与不适，其在被操作时的负面情绪状态常常未被识别。兔子的体型使得人类可在操作过程中徒手固定这些动物，而其他物种如非人灵长类动物若以类似方式徒手约束，则可能导致严重伤害50。然而，这些事实不应成为阻碍实验兔 PRT 方案开发与共享的理由。
关于PRT的潜在益处，研究人员首次尝试填补实验室兔适用训练方案方面的知识空白。为了便于进行日常操作，如抓取、健康检查和称重，研究开发了训练方案，并评估了这些方案对雌性新西兰白兔的可行性。通过比较分析，评估训练方案中描述的替代抓取技术是否比传统抓取技术更具温和性，以及这些训练方案是否可作为优化动物福利的改进措施。 图1展示了本研究的时间安排。
动物维持
从商业渠道获得13只雌性新西兰白兔（到达动物设施时年龄约为七周）。这些动物无费拉萨（FELASA）建议所列的所有病毒、细菌和寄生虫病原体。51穿戴防护服和设备（手套、口罩、发网）以执行本方案的步骤。分别将六只和七只动物共同饲养在面积为 2.8 m × 2.8 m 的地面围栏（地面饲养）中。地面铺有细碎的片状木屑垫料（经高压灭菌）。此外，在垫料上方撒有筑巢材料和纸棉。提供三个带两个开口的塑料屋（37 cm × 60 cm；高 30 cm）和一个塑料隧道（长度：58 cm；直径：16 cm）作为遮蔽所。另提供 enrichment 物品，如木制啃咬块、干草和柳枝球，以及装有饲料颗粒的零食球（移动时颗粒会掉落）。兔子可自由获取自来水、颗粒饲料、高压灭菌的干草和稻草。有关饲料和 enrichment 物品的更多信息列于 材料表动物房每周四进行清洁。
兔子在标准条件下饲养（室温和相对湿度以均值±标准差表示：20.3 ± 0.4 °C 和 50 ± 5 %），光照周期为12:12小时明暗循环（人工光源辅以自然日光）。在每日光照阶段开始前30分钟打开收音机，持续约8小时，以使兔子适应周围环境噪音。

<table><tbody><tr><td>床&amp;rsquo;巢</td><td>美国莫米，安德森公司</td><td></td><td>该方案的成功实施不依赖于本特定产品，您可使用其他公司的同类产品。&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>手指点击器</td><td>ASCO</td><td></td><td>https://ascoshop.de/products/fingerclicker</td></tr><tr><td>G*Power</td><td></td><td>版本 3.1.9.7</td><td></td></tr><tr><td>Heu-Proppen</td><td>Ssniff Spezialdi&amp;auml;ten GmbH，德国索斯特</td><td></td><td>该方案的成功实施不依赖于本特定产品，您可使用其他公司的同类产品。&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>IBM Corp. 发布于 2020 年。IBM SPSS Statistics for Windows，&amp;nbsp; 美国纽约州阿蒙克：IBM 公司</td><td>IBM 公司</td><td>版本 27.0</td><td>在文中称为 &quot;用于高级统计分析的软件&quot;</td></tr><tr><td>家兔饲养 + 25 mg/kg 盐霉素钠特殊混合物</td><td>Ssniff Spezialdi&amp;auml;ten GmbH，德国索斯特</td><td></td><td>该方案的成功实施不依赖于特定的此款产品，您可使用其他公司提供的类似产品。&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>木质素纤维块</td><td>Lignocel J. Rettenmaier &amp;amp;S&amp;ouml;hne GmbH + Co KG，德国罗森贝格</td><td></td><td>该方案的成功实施不依赖于本特定产品，您可使用其他公司生产的类似产品。&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Lillebro gesch&amp;auml;向日葵籽&amp;rdquo;，Martina 公司，M&amp;uuml;德国南肯）和 Rainbow 采食颗粒（Bio-Serv，美国弗莱明顿）&amp;nbsp;</td><td>Martina GmbH, M&amp;uuml;德国南肯</td><td></td><td>该方案的成功实施不依赖于本特定产品，您可使用其他公司生产的类似产品。&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Microsoft Excel for Microsoft 365 MSO</td><td>微软公司</td><td>版本 2305</td><td>在文中称为 &quot;电子表格&quot;</td></tr><tr><td>新西兰白兔&amp;nbsp;</td><td>查尔斯河实验室法国公司</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DE 35K5DL 平台秤</td><td>KERN &amp;amp; SOHN GmbH，德国巴林根-弗罗梅尔恩</td><td></td><td>该方案的成功实施不依赖于本特定产品，您可使用其他公司的同类产品。&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>优质科学实验垫料（细） &amp;和薄片）</td><td>SAFE，奥吉，法国</td><td></td><td>该方案的成功实施不依赖于本特定产品，您可使用其他公司生产的类似产品。&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>彩虹觅食颗粒</td><td>Bio-Serv，弗莱明顿，美国</td><td></td><td>该方案的成功实施不依赖于本产品，您可使用其他公司的同类产品。&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Snackball f&amp;uuml;r 兔 &amp;ndash; 7 cm</td><td>TRIXIE 宠物用品有限公司 &amp;amp; Co. KG，德国塔普</td><td></td><td>该方案的成功实施不依赖于本特定产品，您可使用其他公司生产的类似产品。&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>带集成式点击器的目标棒</td><td>TRIXIE 宠物用品有限公司 &amp;amp; Co. KG，德国塔普</td><td></td><td>该方案的成功实施不依赖于本特定产品，您可使用其他公司的同类产品。&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Trixi 运输箱 Capri 敞口型</td><td>TRIXIE 宠物用品有限公司 &amp;amp; Co. KG，德国塔普</td><td></td><td>该方案的成功实施不依赖于本特定产品，您可使用其他公司生产的类似产品。&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>魏登-许巴尔</td><td>JR FARM GmbH，德国霍尔茨海姆-佩森堡海姆</td><td></td><td>该方案的成功实施不依赖于本特定产品，您可使用其他公司生产的类似产品。&amp;nbsp;</td></tr></tbody></table>

训练实验室兔以优化常规饲养管理操作

Training Laboratory Rabbits to Refine Routine Husbandry Procedures

非厌恶性操作与训练技术在实验动物管理中至关重要，有助于促进实验及常规饲养操作，同时提升动物福利与科研质量。本研究采用响片训练法，为家兔建立训练方案，以优化通常因抓举（即从地面拾起）或约束（即被人抱在怀中）而引发应激的常规饲养操作。13只雌性新西兰白兔接受了为期三周的训练。所有家兔均学会了预设的目标行为：跟随目标棒、跳上称重台、进入运输箱，并以后肢直立、前肢搭在训练员手上的姿势站立。此外，其中10只动物能够从地面跳到坐着的训练员腿上，并在训练员腿上就座时允许训练员将其前肢抬离表面。对于部分个体，需增加额外的中间步骤以调整训练方案。训练结束时，即使经过短期或长期的训练间歇，家兔仍能稳定表现出预期的目标行为。除少数例外情况外，除训练员外的熟悉人员也能够引发家兔的目标行为（泛化），但实现泛化仍需额外训练。在自主接近测试中，家兔更倾向于与训练员互动st 试验中，但与陌生人相处的时间与和训练者相处的时间一样长nd 试验。行为观察表明，按照本方案所述，使用运输箱捕捉兔子，而不是抓住其颈背部皮肤并将其托在手臂上，对兔子的负面影响更小。总体而言，这些训练方案切实可行，可作为实验动物设施中的优化策略。出于动物福利的考虑，应尽可能应用这些训练方案。

已制定并验证了在兔子日常饲养管理操作中采用正向强化的训练方案，结果表明该方案是成功的，因为兔子在每周的常规检查中均能稳定地表现出所训练的行为。使用运输箱抓取兔子比传统的抓取方法更不易引起动物的应激反应。

为促进实验操作和常规饲养管理，需要采用非厌恶性动物操作与训练技术，以改善……

我们致力于改善动物福利。只要动物实验仍在进行，尽可能减少实验动物的痛苦就是我们的道德责任和义务。这还包括以最温和的方式照顾和处理动物。例如，通过使用正向强化训练方法。我们的研究表明，温和的抓取技术和正向强化训练可降低实验动物的应激水平。目前，动物饲养人员和研究人员面临着对实验动物进行训练的要求。然而，对于没有任何动物训练经验的人来说，这极具挑战性。因此，我们的实验方案提供了逐步指导，使每个人都能在训练兔子的过程中获得首次积极的经验。首先，该方法对动物友好。我们比较了兔子被放入运输箱或采用传统抓取方法后的行为表现。结果显示，运输箱造成的应激更小，因此可作为一种有效的优化改良措施。实验开始前，需获取已建立“咔哒声”与奖励关联的兔子，且在听到咔哒声后能从碗中取食奖励。首先，将目标物放在靠近兔子鼻子的位置。当兔子触碰目标物后，点击并给予奖励。然后，将目标物放置在不同位置，确保兔子仅通过头部移动即可触碰到目标物。接下来，将目标物放置在距离兔子较远的位置，使兔子需要跳跃一次才能到达目标物。进一步地，将目标物置于兔子鼻前，然后缓慢地将目标物从兔子前方移开，使其进行数量不等的跳跃。为了使兔子做好进入训练区域的准备，将目标物放在兔子鼻前，然后缓慢地将目标物移开，引导兔子穿过走廊。持续移动目标物，直到兔子最终进入训练区域并与群体分开。首先，选取那些已将咔嗒声与奖励建立关联，并在发出咔嗒声后能从碗中取食奖励的兔子。使用目标棒引导兔子走向称重台。将目标物稍微移至秤的上方，让兔子用前爪踏上秤。然后，将目标物置于秤中心稍偏前方的位置，并继续移动，使兔子用前爪和后爪踏上秤以触碰目标物。接着，引导兔子完全站到秤上，数秒后给予奖励。使用目标棒引导兔子靠近运输箱。然后，将目标棒从箱盖开口处伸入，引导兔子进入箱内。关闭箱门数秒钟，然后打开。再次将兔子引导进入箱子后，重新关上箱门并小心地将其略微抬起。最后，使用目标棒将兔子从箱中引导出来。对七只兔子收集的行为数据表明，与抓住其颈部皮毛并用手臂抱起的方式相比，使用该方法时兔子与运输箱的互动时间更长。此外，兔子在使用运输箱进行抓握后，躲在庇护所中的时间也减少了。首先，选取那些已将咔嗒声与奖励建立关联，并且在发出咔嗒声后会从碗中取食奖励的兔子。将目标棒置于兔子头部上方。重复上述步骤，并将目标物抬高，使兔子抬起前爪。然后，将手掌置于兔子前方，移动目标物至兔子头部上方，让兔子将前爪放在手上。接着，使用目标棒引导兔子靠近训练者，并将目标物稍微移至兔子腿部上方，使兔子将前爪放在腿上。然后，重复上述步骤，并将目标物逐渐移远，使兔子向前伸展身体。接着，再将目标物稍移远一些，使兔子跳跃到膝上触碰目标物。用另一只手从兔子的肩部向尾部轻轻抚摸。然后，轻轻抚摸兔子的耳朵。为进行视觉检查，重复上述步骤，最后抓住兔子的一只耳朵。接着，用空着的手抚摸其前肢或后肢的脚掌。并小心地抬起一只爪子。

training-laboratory-rabbits-to-refine-routine-husbandry-procedures

Research

科研

JoVE Journal

Behavior

行为

训练实验兔改进常规饲养程序

用于评估普通人群感知与感觉运动时序能力的行为任务即，...

揭示节拍失聪：通过同步手指敲击与感知计时任务检测节奏障碍

同步手指敲击，感知计时任务，节拍感知，节奏障碍，听觉-运动同步，节拍失聪，神经认知评估，音乐认知，时间感知，运动协调

本文提供了详细的训练方法，指导如何训练大鼠自愿潜入水下，通过一个长5...

训练大鼠自主潜水：哺乳动物潜水反应的研究

评估大鼠行为灵活性等执行功能的能力，有助于研究完整动物和疾病模型中的认知神经生物学机制。本文描述了用于评估策略转换和反转学习的自动化任务，这些任务对前额叶皮层网络的功能障碍尤为敏感。...

评估大鼠行为灵活性的操作性实验方法

本文介绍了一种在大鼠中诱导经典条件性接近行为的实验方案。该方法可用于测量个体对奖励相关线索产生接近行为并赋予其奖赏显著性的倾向性差异，并用于研究成瘾易感性。...

大鼠的巴甫洛夫条件性接近训练

开发用于实验小鼠的新优化策略是一项具有挑战性的任务，有助于实现3R原则。本方案将点击器训练作为一种认知丰富化项目引入实验小鼠的饲养管理中。...

将点击器训练引入作为实验小鼠的认知丰富化方法

我们开发了一种评估小鼠在全身麻醉过程中福利状况的方案。该方案分析了一系列反映福利水平的行为学参数以及糖皮质激素代谢物。本方案可作为一种通用工具，以科学且以动物为中心的方式评估实验操作的严重程度。...

使用全身麻醉的小鼠程序中系统性评估其健康状况

尽管欧洲兔是群居物种，但将其进行群养仍具有挑战性。因此，必须充分了解成对饲养的实验兔的行为特征和社会结构。本文介绍了一种用于识别配对方法、典型物种等级建立行为以及需要及时干预的行为的实验方案。...

通过行为谱、监测与干预实现新西兰白兔（Oryctolagus cuniculus）配对及配对维持的方法

本方案介绍了一种通过响片训练实现大鼠笼具更换的方法。大鼠不仅可以通过直接训练学习目标行为，还能通过观察学习掌握该行为。实施这一快速且简便的方案，可能有助于改善啮齿类动物饲养设施中的福利与卫生状况。...

使用点击器训练与社会观察法教会大鼠自愿更换笼子

我们介绍了三种用于评估大鼠及其他小型哺乳动物不同形式冲动行为的实验方案。跨期选择程序用于评估个体对延迟结果的价值贴现倾向。低反应率差异强化和特征阴性辨别分别用于评估在有或无不当反应惩罚条件下动物的反应抑制能力。...

评估大鼠不同冲动行为表现的三种实验方法

本文所述方法旨在获得熟悉或不熟悉雄性大鼠配对中的传染性呵欠曲线。通过使用带有孔洞的笼子，并以透明或不透明隔板（有孔或无孔）分隔，来检测视觉、嗅觉或这两种感觉线索是否能够诱发呵欠的传染。...

一种测量大鼠传染性打哈欠行为的实验室方法

学习使用正强化训练技术改进实验兔的常规饲养程序。本研究通过运输箱操作与行为观察，展示温和处理方法如何减少兔子应激反应并提升动物福利水平。

训练实验室兔以优化常规饲养管理操作

探索更多视频