2023年10月27日
本文介绍了一种利用创新性开口器在小鼠中建立牙髓炎模型的简化方案,并随后进行组织学分析。
诸如二维或三维细胞培养等单独实验已被广泛用于检测牙髓细胞的反应。然而,这些实验无法反映牙髓组织与全身免疫系统之间的相互作用。因此,体内实验在牙髓病学研究中正变得越来越受欢迎。
C57小鼠由于其成本效益高、死亡率低且生命力强,正逐渐成为牙髓炎症研究中的常用选择。然而,小鼠体型较小且缺乏配合性,这在实验操作过程中带来了显著挑战。固定过程是一个重要的影响因素,会提高技术门槛。
我们设计了一种使用 readily available 材料和简单组装的新型开口器,以协助研究人员进行牙髓暴露手术。根据我们的研究,该开口器可显著缩短初学者固定小鼠口腔并暴露上颌第一磨牙所需的时间。首先,用左手将一根八微米厚的正畸弓丝拉直,同时右手保持轻微弯曲,抵住弓丝的弧形部分。
使用Young弯制钳在弓丝中点处将梯形的上边缘弯曲约八毫米。确保点a位于钳嘴的边缘。现在,用左手握住弯制钳,用右手拇指和食指夹住弓丝的自由端。
然后从 a 点开始将弓丝弯曲成 120 度角。将弓丝放置在水平桌面上,检查其是否处于同一平面上。在弓丝两侧各预留约 9 毫米,并使用钳子将自由端弯曲成 75 度角。
现在找到点 c,该点距离点 b 约五毫米。在点 c 处将金属丝弯折成 105 度角。同样地,在点 d 和点 e 处弯折金属丝。
同时夹住 ik 和 kj 部分。在点 l、j 和 k 处复制 a、b、c 的弯曲。然后在点 j 处弯曲自由端,使其垂直于 ikj 平面。
为下颌部分弯曲一根额外的压舌板。从点 i 向点 j 方向 5 毫米处夹紧,并弯曲自由端,使其与 ikj 平面和 cd 部分均平行。接着,在点 i 处留出 5 毫米的间隙。
在点 h 处,将弓丝在 ih 和 jih 平面上垂直弯曲。在距 h 点 5 毫米处确定点 g,并夹紧 jihg 区域,然后在点 g 处弯曲弓丝。
现在,将自由端相对于 kj 平面对称弯曲。f 点之后的自由端应与 e 点处的自由端对称。最后,在自由端安装橡胶帽。
首先,将一只麻醉后的小鼠以仰卧位固定在固定板上,用胶带固定其四肢。用拇指和食指按压预先准备好的开口器的自由端。
将小鼠的上门齿固定在开口器两臂之间的梯形凹槽内。确保带有压舌板的一侧臂位于下颌骨上。检查上颌第一磨牙,确保其无龋齿、创伤及牙发育异常。
检查周围牙龈,确保无红肿或瘘管。然后检查对侧牙齿的健康状况。接着,使用牙科钻头在20,000 RPM条件下钻磨上颌第一磨牙的咬合面。
去除牙釉质。使用注射器每隔三分钟向牙齿滴加生理盐水,以防止过热。将8号C-plus锉置于钻孔凹陷的最低位置,穿通最内层牙本质以暴露牙髓腔。
清理牙齿周围的碎屑,然后移除口腔拉钩。使用口腔拉钩固定口腔并定位上颌第一磨牙所需的时间显著短于传统方法。通过显微CT及重建建模确认了牙髓暴露情况。
术后24小时,大部分牙髓组织保持了其形态学结构。
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本文介绍了一种利用创新性开口器在小鼠中建立牙髓炎模型的简化方案,并随后进行组织学分析。
建立一种可重复的小鼠牙髓炎模型,并采用一种新型开口器,解决了体内系统需真实模拟牙髓炎症的关键需求。该进展使得在牙科及炎症性疾病早期研究中,能够进行更具预测性的假设验证和机制性风险评估。该模型支持从发现生物学到临床前验证的转化连续性,有助于提升牙科治疗药物研发组合的决策水平。
这种小鼠牙髓炎模型可融入从发现到临床前研究的连续过程,架起牙科炎症早期机制研究与转化研究之间的桥梁。