Name: 使用人工宿主从寄生蜂 Trichogramma dendrolimi 中提取毒液 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-10-06T13:50:00.000+00:00
Duration: 3 min 53 s
Description: 学习利用人工宿主从寄生蜂Trichogramma dendrolimi中提取毒液的高效方法。该技术采用聚乙烯薄膜和氨基酸溶液，可避免组织污染，为毒液蛋白组成和功能研究提供可靠手段。

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我们感谢海南省自然科学基金（资助号：323QN262）、国家自然科学基金委员会（资助号：31701843 和 32172483）、江苏省农业科技创新基金（资助号：CX(22)3012 和 CX(21)3008）的经费支持。 &#34;双床医生&#34; 江苏省基础研究计划（项目编号：202030472）以及南京农业大学启动基金（项目编号：804018）。

1. 昆虫饲养
<ol>
	<li>喂养 Corcyra cephalonica 在26 ± 1°C温度和40% ± 10%相对湿度条件下，以玉米粉为培养基质。</li>
	<li>品种 T. dendrolimi 使用吉林昆虫饲养室室内饲养的卵来源的品系 Corcyra cephalonica 作为宿主. 用10%蔗糖水喂养成年黄蜂 黑腹果蝇 在温度26 ± 1 °C、相对湿度70% ± 10%、光周期（L）: 暗周期（D）为14小时:10小时的条件下培养试管。</li>
</ol>
2. 聚乙烯塑料薄膜卵卡的制备
<ol>
	<li>取一块长度为 16 cm、宽度为 12 cm、厚度为 20 µm 的聚乙烯塑料薄膜。使用玻璃研磨棒按照标准 96 孔 PCR 板布局压出 30 个直径为 2–3 mm、高度约为 3 mm 的半球形凸起。 
	注意：使用玻璃研磨棒压出 30 个半球形凸起时需注意施加的压力，压力过大可能刺穿塑料薄膜，导致提取无毒的研磨棒被污染。</li>
	<li>将压制成型的聚乙烯塑料薄膜两面暴露于紫外（UV）光下照射 1 小时，进行消毒。</li>
	<li>在半球形表面加入少量 10% 聚乙烯醇。</li>
</ol>
3. Trichogramma dendrolimi 寄生作用
<ol>
	<li>使用 CO2 麻醉后，将 T. dendrolimi 雌性成蜂放入收集盒中，蜂数约为 3000 头。</li>
	<li>将薄膜卵卡的凸面朝向收集盒，并用橡皮筋固定边缘。</li>
	<li>在每个半圆形突起处添加 4 µL 氨基酸溶液（6 g/L 亮氨酸、4 g/L 苯丙氨酸、4.25 g/L 组氨酸），然后覆盖一张长 16 cm、宽 12 cm 的平展聚乙烯塑料薄膜。用橡皮筋将两层塑料膜紧密覆盖在收集盒上。</li>
	<li>让 T. dendrolimi 成蜂自由寄生 4–8 小时，并通过湿润的棉球提供 10% 蔗糖水。</li>
</ol>
4. 收集T. dendrolimi 毒液
<ol>
	<li>从人工卵卡的内突起处获取寄生氨基酸溶液，并转移至1.5 mL离心管盖中。</li>
	<li>用直径为25 mm、孔径为10 µm的尼龙网覆盖管盖，将尼龙网与离心管紧密固定。将离心管直立放置，使用小型离心机进行短时离心（1360 × g，10 s），收集滤过液（约100 µL的T. dendrolimi毒液）。</li>
	<li>使用双辛可宁酸（BCA）检测试剂盒（材料表）测定收集的T. dendrolimi毒液浓度。</li>
	<li>将毒液于-80 °C保存，用于后续分析。</li>
</ol>
5. SDS-PAGE 分析
<ol>
	<li>将 30 µL 的 T. dendrolimi 毒液加入 10 µL 的 4x 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）上样缓冲液（材料表）中，在 95 °C 下加热 10 分钟。</li>
	<li>以 130 V 电压进行 SDS-PAGE 凝胶电泳，持续 120 分钟。</li>
	<li>使用蛋白质染色装置（材料表）对 SDS-PAGE 凝胶进行染色和脱色。</li>
</ol>

Artificial Host Parasitization by Trichogramma dendrolimi and Venom Extraction

<ol><li>Pennacchio, F., Strand, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+developmental+strategies+in+parasitic+hymenoptera%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Entomology%22%5BJournal%5D)">Evolution of developmental strategies in parasitic hymenoptera.</a> Annual Review of Entomology. 51, 233-258 (2006).</li>
<li>Yan, Z. C., Ye, X. H., Wang, B. B., Fang, Q., Ye, G. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Research+advances+on+composition%2C+function+and+evolution+of+venom+proteins+in+parasitoid+wasps%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Biological+Control%22%5BJournal%5D)">Research advances on composition, function and evolution of venom proteins in parasitoid wasps.</a> Chinese Journal of Biological Control. 33 (1), 1-10 (2017).</li>
<li>Asgari, S., Rivers, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Venom+proteins+from+endoparasitoid+wasps+and+their+role+in+host-parasite+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Entomology%22%5BJournal%5D)">Venom proteins from endoparasitoid wasps and their role in host-parasite interactions.</a> Annual Review of Entomology. 56, 313-335 (2011).</li>
<li>Moreau, S. J. M., Guillot, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+and+prospects+on+biosynthesis%2C+structures%2C+and+functions+of+venom+proteins+from+parasitic+wasps%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Biochemistry+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Advances and prospects on biosynthesis, structures, and functions of venom proteins from parasitic wasps.</a> Insect Biochemistry and Molecular Biology. 35 (11), 1209-1223 (2005).</li>
<li>Yan, Z. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+venom+serpin+splicing+isoform+of+the+endoparasitoid+wasp+Pteromalus+puparum+suppresses+host+prophenoloxidase+cascade+by+forming+complexes+with+host+hemolymph+proteinases%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">A venom serpin splicing isoform of the endoparasitoid wasp Pteromalus puparum suppresses host prophenoloxidase cascade by forming complexes with host hemolymph proteinases.</a> Journal Biological Chemistry. 292 (3), 1038-1051 (2017).</li>
<li>Woelke, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Description+and+biology+of+two+new+egg+parasitoid+species+%28Hymenoptera%3A+Trichogrammatidae%29+reared+from+eggs+of+Heliconiini+butterflies+%28Lepidoptera%3A+Nymphalidae%3A+Heliconiinae%29+in+Panama%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Natural+History%22%5BJournal%5D)">Description and biology of two new egg parasitoid species (Hymenoptera: Trichogrammatidae) reared from eggs of Heliconiini butterflies (Lepidoptera: Nymphalidae: Heliconiinae) in Panama.</a> Journal of Natural History. 53 (11-12), 639-657 (2019).</li>
<li>Zang, L. S., Wang, S., Zhang, F., Desneux, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+control+with+Trichogramma+in+China%3A+History%2C+present+status%2C+and+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Entomology%22%5BJournal%5D)">Biological control with Trichogramma in China: History, present status, and perspectives.</a> Annual Review of Entomology. 66, 463-484 (2021).</li>
<li>Nettles, W. C. J., Morrison, R. K., Xie, Z. N., Ball, D., Shenkir, C. A., Vinson, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synergistic+action+of+potassium+chloride+and+magnesium+sulfate+on+parasitoid+wasp+oviposition%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Synergistic action of potassium chloride and magnesium sulfate on parasitoid wasp oviposition.</a> Science. 218, 4568(1982).</li>
<li>Tilden, R. L., Ferkovich, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kairomonal+stimulation+of+oviposition+into+an+artificial+substrate+by+the+endoparasitoid+Microplitis+croceipes+%28Hymenoptera%29Braconidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+the+Entomological+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Kairomonal stimulation of oviposition into an artificial substrate by the endoparasitoid Microplitis croceipes (Hymenoptera)Braconidae).</a> Annals of the Entomological Society of America. 81 (1), 152-156 (1988).</li>
<li>Xie, Z. N., Li, L., Xie, Y. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+culture+of+Habrobracon+hebetor%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Biological+Control%22%5BJournal%5D)">In vitro culture of Habrobracon hebetor.</a> Chinese Journal of Biological Control. 5 (2), 49-51 (1989).</li>
<li>Han, S. T., Liu, W. H., Li, L. Y., Chen, Q. X., Zeng, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breeding+Trichogramma+ostriniae+with+artificial+eggs%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Breeding Trichogramma ostriniae with artificial eggs.</a> Journal of Environmental Entomology. 21 (1), 9-12 (1999).</li>
<li>Li, L. Y., Chen, Q. X., Liu, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oviposition+behavior+of+twelve+species+of+Trichogramma+and+its+influence+on+the+efficiency+of+rearing+them+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Oviposition behavior of twelve species of Trichogramma and its influence on the efficiency of rearing them in vitro.</a> Journal of Environmental Entomology. 11 (1), 31-35 (1989).</li>
<li>Xing, J. Q., Li, L. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rearing+of+an+egg+parasite+Anastatus+japonicus+Ashmead+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Entomologica+Sinica%22%5BJournal%5D)">Rearing of an egg parasite Anastatus japonicus Ashmead in vitro.</a> Acta Entomologica Sinica. 33 (2), 166-173 (1990).</li>
<li>Moreau, S. J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%22It+stings+a+bit+but+it+cleans+well%22%3A+Venoms+of+Hymenoptera+and+their+antimicrobial+potential%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">"It stings a bit but it cleans well": Venoms of Hymenoptera and their antimicrobial potential.</a> Journal of Insect Physiology. 59 (2), 186-204 (2013).</li>
<li>Moreau, S. J. M., Asgari, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Venom+proteins+from+parasitoid+wasps+and+their+biological+function%5BTitle%5D)+AND+%22Toxins%22%5BJournal%5D)">Venom proteins from parasitoid wasps and their biological function.</a> Toxins. 7 (7), 2385-2412 (2015).</li>
</ol>

作者声明无任何披露事项，且无竞争性经济利益。

本文介绍了一种利用人工寄主提取T. dendrolimi毒液的方法。毒液采集实验的关键要点如下。（1）在制备过程中，必须使用适当浓度的CO2对T. dendrolimi进行快速麻醉。若CO2浓度过低，则不足以迅速麻醉Trichogramma；反之，若浓度过高，可能导致Trichogramma死亡，从而降低其对人工寄主的寄生能力。（2）必须确保氨基酸溶液的无菌性，因为溶液污染可能对寄生效率产生不利影响。（3）人工卵卡的寄生操作应在黑暗条件下进行，以促进寄生行为。（4）建议直接进行后续实验，或立即将样品冷冻，以保持毒液活性并防止降解。
建议通过观察产下的卵来判断寄生情况。若在显微镜下未观察到产卵，则可能未成功提取毒液。该技术的局限性在于需要大量寄生蜂。单次毒液提取约需3,000只寄生蜂，增加了工作量。
先前提取寄生蜂毒液的方法是解剖毒液囊。然而，寄生蜂体型微小；例如，Trichogramma 的体长...

寄生蜂是一类具有寄生性的膜翅目昆虫，在生物防治中具有重要的资源价值1。寄生蜂种类繁多，估计物种数量超过60万种2。其多样性远超其他有毒节肢动物，如蛇类、芋螺、蜘蛛、蝎子和蜜蜂。毒液是寄生蜂实现寄生的重要因子之一。为了成功寄生，寄生蜂会将毒液注入宿主体内，调控宿主的行为、免疫、发育和代谢过程3。此外，寄生蜂毒液在分子结构、作用靶点和生物学功能方面表现出显著的多样性，反映了其与宿主之间复杂的协同进化关系。因此，寄生蜂毒液是一种宝贵但尚未被充分重视的活性分子资源，可用于杀虫剂开发或医学用途4。与蛇类、芋螺、蜘蛛、蝎子和蜜蜂的毒液不同，寄生蜂毒液无法通过直接刺激或电刺激的方式采集5。目前提取寄生蜂毒液的主要方法是解剖毒液囊。然而，寄生蜂个体通常较小，对其解剖操作需要较高的技术水平。因此，若能建立一种高效且便捷的寄生蜂毒液采集方法，将极大促进寄生蜂毒液的研究。
Trichogramma（膜翅目：赤眼蜂科）是一类微小的（体长约0.5 mm）寄生蜂6。这类寄生蜂是应用最广泛的生物防治制剂之一，尤其用于防治农业和林业中多种鳞翅目害虫的卵。例如，在中国广泛应用的赤眼蜂种类之一——T. dendrolimi，已被大量用于防控多种农林害虫，如Dendrolimus superans、Ostrinia furnacalis和Chilo suppressalis。先前的研究表明，Trichogramma寄生蜂可将其卵注入人工寄主中7。人工寄主可由石蜡8、琼脂9、Parafilm膜10或塑料薄膜11等材料制成。在人工寄主中，能够有效诱导Trichogramma产卵的溶液成分可十分简单，例如氨基酸或无机盐12。基于T. dendrolimi能够寄生人工寄主的特性，本研究提出一种利用人工寄主提取寄生蜂毒液的新方法。该方法旨在克服当前提取技术中产量低、纯度低以及易受污染等缺陷。通过该方法，可大量提取高纯度的T. dendrolimi毒液，满足科学研究以及杀虫或医学用途生物活性分子筛选的需求。

<table><tbody><tr><td>10 &amp;mu;m 尼龙网</td><td>Millipore</td><td>NY1002500</td><td>用于过滤卵</td></tr><tr><td>10% 聚乙烯醇</td><td>Aladdin</td><td>P139533</td><td>用于吸引&amp;nbsp; &lt;em&gt;T. dendrolimi&amp;nbsp; &lt;/em&gt;产卵</td></tr><tr><td>10% 蔗糖水</td><td>国药集团化学试剂&amp;nbsp;</td><td>10021463</td><td>饲喂 &lt;em&gt;Trichogramma dendrolimi&lt;/em&gt;</td></tr><tr><td>4x LDS 上样缓冲液</td><td>Ace Hardware</td><td>B23010301</td><td>SDS-PAGE</td></tr><tr><td>收集盒</td><td>Deli</td><td>8555</td><td>用于 &lt;em&gt;T. dendrolimi &lt;/em&gt;寄生</td></tr><tr><td>Future PAGE&amp;nbsp; 4&amp;ndash;12% (12 孔)</td><td>Ace Hardware</td><td>J70236502X</td><td>SDS-PAGE</td></tr><tr><td>GenScript eStain L1 蛋白染色仪</td><td>GenScript</td><td>L00753</td><td>SDS-PAGE</td></tr><tr><td>玻璃研磨棒&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td><td>Applygen</td><td>tb6268</td><td>半圆形突起结构&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>L-亮氨酸</td><td>Solarbio</td><td>L0011</td><td>人工寄主组分</td></tr><tr><td>L-组氨酸</td><td>Aladdin</td><td>A2219458</td><td>人工寄主组分</td></tr><tr><td>L-苯丙氨酸</td><td>Solarbio</td><td>P0010</td><td>人工寄主组分</td></tr><tr><td>微型离心机</td><td>Scilogex</td><td>D1008</td><td>离心</td></tr><tr><td>MOPS-SDS 电泳缓冲液</td><td>Ace Hardware</td><td>B23021</td><td>SDS-PAGE</td></tr><tr><td>Omni-Easy 即用型 BCA 蛋白检测试剂盒</td><td>上海雅酶生物医药科技&amp;nbsp;</td><td>ZJ102</td><td>用于测定毒液蛋白浓度</td></tr><tr><td>96 孔 PCR 板布局</td><td>Thermo Fisher</td><td>AB1400L</td><td>半圆形突起结构&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>聚乙烯塑料薄膜</td><td>苏州奥庞贸易 &amp;nbsp;</td><td>001c5427</td><td>人工卵卡</td></tr><tr><td>预染色蛋白 Marker (10&amp;ndash;180 kDa)</td><td>伊菲克生物技术</td><td>YWB007</td><td>SDS-PAGE</td></tr><tr><td>橡胶圈</td><td>广州千睿生物科技</td><td>009</td><td>固定塑料薄膜与收集盒</td></tr><tr><td>硅胶垫片，96 孔，圆孔型</td><td>生工生物</td><td>F504416-0001</td><td>半圆形突起结构&amp;nbsp;</td></tr></tbody></table>

利用人工寄主从寄生蜂trichogramma dendrolimi中提取毒液

Extracting Venom from the Parasitoid Wasp Trichogramma dendrolimi Using an Artificial Host

寄生蜂是一类多样化的膜翅目昆虫，作为害虫生物防治的宝贵资源具有重要意义。为了确保成功寄生，寄生蜂会向宿主体内注入毒液，以抑制宿主的免疫反应，并调控其发育、代谢甚至行为。据估计，寄生蜂的物种数量超过60万种，其多样性远超其他有毒动物，如蛇类、芋螺和蜘蛛。寄生蜂毒液是一种尚未充分开发的生物活性分子来源，在害虫防治和医学领域具有潜在应用价值。然而，由于无法采用直接刺激或电刺激方式取毒，且因其体型微小导致解剖困难，寄生蜂毒液的采集极具挑战性。Trichogramma 是一类体型微小（约0.5 mm）的卵寄生蜂，广泛应用于农业和林业中鳞翅目害虫的生物防治。本文报道了一种利用人工宿主提取 T. dendrolimi 毒液的方法。该人工宿主由聚乙烯薄膜和氨基酸溶液制成，并接种 Trichogramma 寄生蜂以完成寄生过程。随后收集并浓缩毒液。该方法能够大量提取 Trichogramma 毒液，同时避免了传统毒囊解剖过程中常见的组织污染问题。这一创新方法为研究 Trichogramma 毒液提供了便利，推动了相关新研究及潜在应用的发展。

采用蛋白检测试剂盒测定代表性毒液样品的蛋白浓度，结果如表1所示。结果显示，通过该方法收集的毒液蛋白浓度范围为0.35 µg/µL至0.46 µg/µL，而氨基酸溶液的阴性对照组蛋白浓度仅为0.03 µg/µL至0.05 µg/µL。该方法收集的毒液蛋白浓度显著高于阴性对照组，表明该方法能够有效收集寄生蜂毒液。此外，寄生时间与蛋白浓度之间无明显相关性，因为不同批次的寄生蜂可能具有不同的活力。
此外，通过 SDS-PAGE 分析了 T. dendrolimi 的毒液，结果显示其毒液蛋白的分子量范围从低于 10 kDa 到超过 130 kDa（图 1）。然而，当对氨基酸阴性对照进行 SDS-PAGE 分析时，发现其中不含任何蛋白质（补充图 1），这进一步证明通过该方法收集的蛋白确实是寄生蜂的毒液蛋白。
<...

本文介绍了一种利用聚乙烯薄膜和氨基酸溶液制备的人工寄主提取Trichogramma dendrolimi毒液的实验方案。

利用人工寄主从寄生蜂Trichogramma dendrolimi中提取毒液

寄生蜂是一类多样化的膜翅目昆虫，可作为害虫生物防治中不可多得的资源。为确保成功寄生，……

缺乏高效的毒液提取方法常常限制了对寄生蜂毒液的研究，尤其是在微小寄生蜂中。本研究提供了一种提取赤眼蜂毒液的高效方法，并为进一步开展赤眼蜂毒液研究，如蛋白质组补偿和毒液功能分析，奠定了基础。目前所知的寄生蜂及其毒液提取方法需要区分毒液节律。然而，寄生蜂体型微小，不仅区分毒液的技术要求较高，解剖过程中也常混入其他组织。我们的常规方法使用人工寄主，从而避免了此类问题。未来，我们将专注于赤眼蜂毒液在农业和医学领域的应用。我们的目标是利用特异性的杀虫毒液基因进行害虫防控。同时，我们计划探索赤眼蜂毒液在数学肿瘤学（MathOncology）中尚未开发的潜力，特别是其在增强免疫治疗技术以及新型抗生素分子发现方面的潜在应用。首先，取一段长16厘米、宽12厘米、厚20微米的聚乙烯塑料薄膜。使用玻璃研磨工具，在标准96孔PCR板布局上压出30个半圆形凸起。将压制成型的聚乙烯塑料薄膜两面暴露于紫外光下照射一小时，以进行消毒。在半圆形表面加入少量10%聚乙烯醇。随后，将约3000只麻醉的雌性赤眼蜂（Trichogramma dendrolimi）放入收集盒中。将薄膜卵卡的凸面朝向收集盒，并用橡皮筋固定边缘。然后，向每个突起处加入4 µL氨基酸溶液，再用另一片聚乙烯塑料薄膜覆盖。用橡皮筋将两张塑料膜紧紧固定在收集盒上。让蜂类自由寄生 4 到 8 小时。在寄生期间通过湿润的棉球提供 10% 蔗糖水。接下来，从人工卵卡的内突起处获取寄生的氨基酸溶液，并将其转移至1.5毫升离心管的管盖中。用直径为25毫米、孔径为10微米的尼龙网覆盖管盖，然后轻轻固定尼龙网和管盖。将右上角的试管在 1,360 G 离心 10 秒。收集含有毒液的滤过溶液。将毒液在 -80 摄氏度下保存，以备后续分析。对毒液样本进行BCA分析显示，毒液蛋白浓度范围为0.35至0.46微克每微升。氨基酸溶液的阴性对照组蛋白浓度仅为0.03至0.05微克每微升。毒液的SDS-PAGE分析显示，蛋白质分子大小范围从低于10千道尔顿到超过130千道尔顿。

extracting-venom-from-parasitoid-wasp-trichogramma-dendrolimi-using

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使用人工宿主从寄生蜂 Trichogramma dendrolimi 中提取毒液

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本文提供了一种利用电刺激从蜘蛛中提取毒液的实验方案，旨在：1）进行毒液的蛋白质组学表征，2）刺激毒液腺基因表达，3）开展毒液的功能研究。随后描述了用于基因表达研究的毒液腺显微解剖方法。...

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用于Nasonia vitripennis基因组操作的胚胎显微注射与移植技术

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我们提出了设计合成“化学转导剂”的指南，这类转导剂能够诱导原本不相关的天然蛋白质之间产生相互作用。此外，还提供了合成和测试一种特定“转导剂”的详细实验方案，该转导剂可使生长因子激活一种解毒酶，从而调控抗癌前体药物的裂解过程。...

模拟信号蛋白的功能：迈向人工信号转导治疗

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使用快速纳米定位系统从单分子FRET实验中获取结构信息

我们已成功建立了一种从富含油脂、蛋白质和多酚的植物种子中分离RNA的方法，这些成分会抑制高纯度RNA的提取。本方法适用于检测种子中低丰度转录本基因的表达。...

一种高效分离高纯度种子RNA用于定量转录组分析的方法

学习利用人工宿主从寄生蜂Trichogramma dendrolimi中提取毒液的高效方法。该技术采用聚乙烯薄膜和氨基酸溶液，可避免组织污染，为毒液蛋白组成和功能研究提供可靠手段。

利用人工寄主从寄生蜂Trichogramma dendrolimi中提取毒液

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