Name: 饮食诱导的肥胖糖尿病小鼠的十二指肠-空肠搭桥手术 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-10-18T12:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 50 s
Description: 了解十二指肠-空肠搭桥手术在饮食诱导肥胖糖尿病小鼠模型中的建立方法。该技术可改善葡萄糖代谢并降低胰岛素抵抗，为代谢疾病研究提供可靠的实验框架。

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本研究得到了中国广东省科学技术计划项目（编号：202002020069）的资助。

以下所述的所有实验方案步骤均遵循中国南部战区总医院动物护理与使用委员会在批准号2020112501下的指导方针。
1. 术前常规准备
注意：购入30只6周龄雄性C57BL/6小鼠。小鼠饲养于特定病原体阴性（SPF）级实验室内，光照周期为12小时明/12小时暗，温度为22 ± 2 °C，湿度为55–65%。小鼠可自由饮水，并饲喂60% kcal脂肪饮食持续6周以诱导肥胖。随后连续5天给予腹腔注射链脲佐菌素（40 mg/kg）以诱导糖尿病17。在30只小鼠中，有22只小鼠随机血糖水平&gt; 300 mg/dL，被随机分配至DJB组（n=15）和假手术组（n=7）。另有8只小鼠因血糖未达标被排除于实验之外。
<ol>
	<li>手术前对小鼠禁食 8 小时，术前 2 小时撤去饮水。</li>
	<li>经腹腔注射 1% 戊巴比妥钠溶液（6 mL/kg）和丁丙诺啡（1 mg/kg）。用镊子轻触小鼠足趾或尾巴，确认小鼠无明显抽搐或抖动反应。在充分麻醉状态下，小鼠可自由呼吸，无需辅助供氧。</li>
	<li>将小鼠仰卧置于无菌板上，并在体视显微镜下操作。眼部涂抹眼膏以防干燥。使用电热毯在整个手术过程中维持小鼠体温。采用无菌操作技术，包括穿戴无菌手术衣、无菌手套及使用经高压灭菌的器械。</li>
	<li>对于假手术对照组小鼠，在幽门下方 1 cm 处的十二指肠以及屈氏韧带下方 5 cm 处的空肠分别做两个切口，随后缝合切口。</li>
</ol>
2. 十二指肠空肠旁路术：手术操作
<ol>
	<li>从剑突至腹部涂抹脱毛膏，以去除该区域的毛发。擦去脱毛膏，并确保皮肤清洁。用碘伏溶液和酒精溶液交替擦拭手术区域三次。</li>
	<li>用无菌手术巾覆盖小鼠，暴露手术区域，从剑突至腹部做一条长约2 cm的切口。</li>
	<li>使用腹部牵开器暴露腹腔。用湿润的棉签推开腹部脂肪，并将肝脏移向头侧，以充分暴露胃和肠管。</li>
	<li>胃和幽门位于肝脏下方，屈氏韧带位于远端十二指肠。在屈氏韧带远端5 cm处，用6-0丝线对空肠进行双重结扎（图1A）。在两处结扎的中点切断空肠，并用10-0丝线缝合空肠残端（图1B）。 
	注：操作时避免扭转肠系膜血管。</li>
	<li>将近端空肠切口沿肠管方向向远端拉动5 cm，形成空肠-空肠吻合。将两段肠管水平对齐，然后用10-0丝线行侧侧吻合（图1C）。 
	注：术中用生理盐水保持肠管湿润，以减少水分丢失，防止肠管卷曲，便于缝合。</li>
	<li>固定肠管两端，将切口修剪至等长（图1D）。用全层连续缝合法缝合后壁第二层。 
	注：切口长度约为0.5–0.6 cm，针距约为0.5 mm。</li>
	<li>固定肠管两端，缝合肠管前壁。前壁第一层采用连续单纯缝合，第二层采用水平内翻缝合（图1E-F）。 
	注：用棉签清除肠内容物，防止腹腔感染。</li>
	<li>将远端空肠切口向下拉入十二指肠，在幽门下方1 cm处形成十二指肠-空肠吻合（图1G）。采用与步骤2.6–2.7相同的方法进行缝合（图1H-K）。 
	注：检查吻合口角部缝合情况，以减少吻合口漏的发生。</li>
	<li>用显微镊夹住肠管并用显微剪剪断。在十二指肠-空肠吻合口远端2 mm处，用6-0丝线对十二指肠进行双重结扎。用显微剪在中点剪断，并用10-0丝线缝合残端（图1L）。 
	注：胃十二指肠血管垂直分支于胰腺头部，并邻近幽门，需仔细探查横断面的血管。定位胆总管与十二指肠汇合处，注意避免损伤胰腺或胆总管。</li>
	<li>用30 °C生理盐水冲洗腹腔，将肠管复位至腹腔内。分别用6-0丝线缝合肌肉层和皮肤层，然后用碘伏消毒皮肤。</li>
	<li>术后在背部皮下注射30 °C生理盐水（30 mL/kg），以预防脱水；肌肉注射青霉素（10 mg/kg）以预防感染。</li>
</ol>
<img alt="消化道解剖、使用尺子进行测量的过程、实验手术设置、分步操作。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66049/66049fig01.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="图1"> 
图1：十二指肠-空肠旁路手术操作。（A）空肠位于屈氏韧带远端5 cm处的位置。（B）使用6-0丝线对空肠进行双重结扎，并在结扎线中间切断。（C）空肠-空肠吻合。（D）做一0.5–0.6 cm的切口，并缝合后壁。（E–F）完成空肠-空肠吻合。（G）将远端空肠拉至幽门下方1 cm处与十二指肠连接。（H）十二指肠-空肠吻合。（I）做一0.5–0.6 cm的切口，切断十二指肠-空肠吻合口，并用连续单纯缝合法缝合后壁。（J–K）完成十二指肠-空肠吻合。（L）在距十二指肠-空肠吻合口远端2 mm处，使用6-0丝线对十二指肠进行双重结扎，并在结扎线中间切断。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66049/66049fig01large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
3. 一般术后护理
<ol>
	<li>术后将小鼠置于电热毯上以防止低体温。待小鼠能够自由爬行并完全清醒后，再放回笼中。</li>
	<li>术后当天限制食物和饮水，并于小鼠背部皮下注射 2 mL 生理盐水。术后第 1 天，给予 10 mL 10% 葡萄糖与功能性饮料（1:1 比例）混合液，不给予食物，并皮下注射 1 mL 生理盐水。</li>
	<li>术后第 2 天和第 3 天，给予小鼠 20 mL 10% 葡萄糖与功能性饮料的混合液。术后第 4 天起，给予小鼠纯水和高脂饮食。应根据术后恢复情况按以下顺序进行过渡性喂养：液体、半流质或固体食物。</li>
	<li>术后镇痛：术后第 1 至第 3 天，每 12 小时皮下注射一次丁丙诺啡（0.1 mg/kg），之后每日一次，持续至术后第 5 天。</li>
	<li>术后观察小鼠的进食情况、活动状态、粪便及伤口愈合情况。</li>
</ol>
<img alt="十二指肠转位术示意图，消化道与胆胰支解剖结构，手术步骤示意图。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66049/66049fig02.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="图 2"> 
图 2：DJB 手术示意图。 (A) 十二指肠-空肠吻合。(B) 空肠-空肠吻合。(C) 胆胰支。(D) 消化支。(E) 共同支。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66049/66049fig02large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
<img alt="解剖的蠕虫解剖结构，标注了各部分（A-E）及测量比例尺；生物学研究。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66049/66049fig03.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="图3"> 
图3：DJB 手术的解剖结构。（A）十二指肠-空肠吻合口。（B）空肠-空肠吻合口。（C）胆胰支。（D）消化支。（E）共同支。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66049/66049fig03large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的高清版本。</a>
4. 术后代谢参数的评估
<ol>
	<li>体重测量
	<ol>
		<li>在测量前将小鼠禁食 8 小时。在手术前和手术后 8 周内，每周一测量小鼠体重。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>食物摄入量测量
	<ol>
		<li>每笼饲养一只小鼠。在 24 小时前后分别测量每笼中固体食物的量。两次数值之差即为每日食物摄入量。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>随机血糖测量
	<ol>
		<li>在每周一上午 8:00，从小鼠尾尖采集一滴血液，滴加到已插入血糖仪的血糖试纸上。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>口服葡萄糖耐量试验
	<ol>
		<li>DJB 手术后 8 周，进行口服葡萄糖耐量试验前将小鼠禁食 8 小时。从小鼠尾尖采集一滴血液，滴加到已插入血糖仪的血糖试纸上。给予 20% D-葡萄糖溶液口服（2 g/kg）。在灌胃后 0、15、30、60、90、120、150 和 180 分钟时测量血糖水平。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Lascar, N., Brown, J., Pattison, H., Barnett, A. H., Bailey, C. J., Bellary, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type+2+diabetes+in+adolescents+and+young+adults%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Diabetes+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Type 2 diabetes in adolescents and young adults.</a> Lancet Diabetes Endocrinol. 6 (1), 69-80 (2018).</li>
<li>Song, Y., Zhao, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bibliometric+analysis+of+metabolic+surgery+for+type+2+diabetes%3A+current+status+and+future+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Updates+Surg%22%5BJournal%5D)">Bibliometric analysis of metabolic surgery for type 2 diabetes: current status and future prospects.</a> Updates Surg. 74 (2), 697-707 (2022).</li>
<li>Cummings, D. E., Rubino, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+surgery+for+the+treatment+of+type+2+diabetes+in+obese+individuals%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Metabolic surgery for the treatment of type 2 diabetes in obese individuals.</a> Diabetologia. 61 (2), 257-264 (2018).</li>
<li>Buchwald, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+evolution+of+metabolic%2Fbariatric+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Obes+Surg%22%5BJournal%5D)">The evolution of metabolic/bariatric surgery.</a> Obes Surg. 24 (8), 1126-1135 (2014).</li>
<li>Akalestou, E., Miras, A. D., Rutter, G. A., le Roux, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+weight+loss+after+obesity+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Endocr+Rev%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of weight loss after obesity surgery.</a> Endocr Rev. 43 (1), 19-34 (2022).</li>
<li>Rubino, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mechanism+of+diabetes+control+after+gastrointestinal+bypass+surgery+reveals+a+role+of+the+proximal+small+intestine+in+the+pathophysiology+of+type+2+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">The mechanism of diabetes control after gastrointestinal bypass surgery reveals a role of the proximal small intestine in the pathophysiology of type 2 diabetes.</a> Ann Surg. 244 (5), 741-749 (2006).</li>
<li>Rubino, F., Marescaux, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+duodenal-jejunal+exclusion+in+a+non-obese+animal+model+of+type+2+diabetes%3A+a+new+perspective+for+an+old+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Effect of duodenal-jejunal exclusion in a non-obese animal model of type 2 diabetes: a new perspective for an old disease.</a> Ann Surg. 239 (1), 1-11 (2004).</li>
<li>Akalestou, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishing+a+successful+rat+model+of+duodenal-+jejunal+bypass%3A+A+detailed+guide%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Establishing a successful rat model of duodenal- jejunal bypass: A detailed guide.</a> Lab Anim. 53 (4), 362-371 (2019).</li>
<li>Yu, H. H., Hsieh, M. C., Wu, S. Y., Sy, E. D., Shan, Y. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+duodenal-jejunal+bypass+surgery+in+ameliorating+nonalcoholic+steatohepatitis+in+diet-induced+obese+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Metab+Syndr+Obes%22%5BJournal%5D)">Effects of duodenal-jejunal bypass surgery in ameliorating nonalcoholic steatohepatitis in diet-induced obese rats.</a> Diabetes Metab Syndr Obes. 12, 149-159 (2019).</li>
<li>Garciacaballero, M., Navarrete, S., Favretti, F., Celik, A., Del Castillo, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetes+surgery+in+type+2+BMI+24-29+vs+IMC+30-34+diabetic+patients%3A+is+there+differences+among+restrictive%2C+malabsorptive+and+gastric+bypass+procedures%5BTitle%5D)+AND+%22Nutr+Hosp%22%5BJournal%5D)">Diabetes surgery in type 2 BMI 24-29 vs IMC 30-34 diabetic patients: is there differences among restrictive, malabsorptive and gastric bypass procedures.</a> Nutr Hosp. 28 (2), 23-30 (2013).</li>
<li>Vidal, J., Jiménez, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetes+remission+following+metabolic+surgery%3A+is+GLP-1+the+culprit%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Atheroscler+Rep%22%5BJournal%5D)">Diabetes remission following metabolic surgery: is GLP-1 the culprit.</a> Curr Atheroscler Rep. 15 (10), 357(2013).</li>
<li>Speck, M., Cho, Y. M., Asadi, A., Rubino, F., Kieffer, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Duodenal-jejunal+bypass+protects+GK+rats+from+%7Bbeta%7D-cell+loss+and+aggravation+of+hyperglycemia+and+increases+enteroendocrine+cells+coexpressing+GIP+and+GLP-1%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">Duodenal-jejunal bypass protects GK rats from {beta}-cell loss and aggravation of hyperglycemia and increases enteroendocrine cells coexpressing GIP and GLP-1.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 300 (5), E923-E932 (2011).</li>
<li>Ashrafian, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+surgery%3A+an+evolution+through+bariatric+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Obes+Rev%22%5BJournal%5D)">Metabolic surgery: an evolution through bariatric animal models.</a> Obes Rev. 11 (12), 907-920 (2010).</li>
<li>Rao, R. S., Rao, V., Kini, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+in+bariatric+surgery--a+review+of+the+surgical+techniques+and+postsurgical+physiology%5BTitle%5D)+AND+%22Obes+Surg%22%5BJournal%5D)">Animal models in bariatric surgery--a review of the surgical techniques and postsurgical physiology.</a> Obes Surg. 20 (9), 1293-1305 (2010).</li>
<li>Im, Y. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+review+of+animal+models+of+NAFLD+finds+high-fat%2C+high-fructose+diets+most+closely+resemble+human+NAFLD%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">A systematic review of animal models of NAFLD finds high-fat, high-fructose diets most closely resemble human NAFLD.</a> Hepatology. 74 (4), 1884-1901 (2021).</li>
<li>Kleinert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+obesity+and+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Animal models of obesity and diabetes mellitus.</a> Nat Rev Endocrinol. 14 (3), 140-162 (2018).</li>
<li>Furman, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Streptozotocin-induced+diabetic+models+in+mice+and+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc%22%5BJournal%5D)">Streptozotocin-induced diabetic models in mice and rats.</a> Curr Protoc. 1 (4), e78(2021).</li>
<li>Buchwald, H., Varco, R. L., Moore, R. B., Schwartz, M. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+bypass+procedures.+Partial+ileal+bypass+for+hyperlipidemia+and+jejunoileal+bypass+for+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Probl+Surg%22%5BJournal%5D)">Intestinal bypass procedures. Partial ileal bypass for hyperlipidemia and jejunoileal bypass for obesity.</a> Curr Probl Surg. , 1-51 (1975).</li>
<li>DeMaria, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bariatric+surgery+for+morbid+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Bariatric surgery for morbid obesity.</a> N Engl J Med. 356 (21), 2176-2183 (2007).</li>
<li>Bolling, C. F., Armstrong, S. C., Reichard, K. W., Michalsky, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+and+bariatric+surgery+for+pediatric+patients+with+severe+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Metabolic and bariatric surgery for pediatric patients with severe obesity.</a> Pediatrics. 144 (6), e20193224(2019).</li>
<li>Mason, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gastric+bypass+for+morbid+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Surg+Annu%22%5BJournal%5D)">Gastric bypass for morbid obesity.</a> Surg Annu. 11, 99-126 (1979).</li>
<li>Cheng, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleeve+gastrectomy+with+bypass+of+proximal+small+intestine+provides+better+diabetes+control+than+sleeve+gastrectomy+alone+under+postoperative+high-fat+diet%5BTitle%5D)+AND+%22Obes+Surg%22%5BJournal%5D)">Sleeve gastrectomy with bypass of proximal small intestine provides better diabetes control than sleeve gastrectomy alone under postoperative high-fat diet.</a> Obes Surg. 29 (1), 84-92 (2019).</li>
<li>Rubino, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+the+small+bowel+in+the+regulation+of+circulating+ghrelin+levels+and+food+intake+in+the+obese+Zucker+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">The role of the small bowel in the regulation of circulating ghrelin levels and food intake in the obese Zucker rat.</a> Endocrinology. 146 (4), 1745-1751 (2005).</li>
<li>Zachariah, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compared+to+sleeve+gastrectomy%2C+duodenal-jejunal+bypass+with+sleeve+gastrectomy+gives+better+glycemic+control+in+T2DM+patients%2C+with+a+lower+%CE%B2-cell+response+and+similar+appetite+sensations%3A+mixed-meal+study%5BTitle%5D)+AND+%22Obes+Surg%22%5BJournal%5D)">Compared to sleeve gastrectomy, duodenal-jejunal bypass with sleeve gastrectomy gives better glycemic control in T2DM patients, with a lower β-cell response and similar appetite sensations: mixed-meal study.</a> Obes Surg. 26 (12), 2862-2872 (2016).</li>
<li>Jiang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+proximal+intestinal+glucose+sensing+and+metabolism+in+the+blood+glucose+control+in+type+2+diabetic+rats+after+duodenal+jejunal+bypass+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Obes+Surg%22%5BJournal%5D)">Role of proximal intestinal glucose sensing and metabolism in the blood glucose control in type 2 diabetic rats after duodenal jejunal bypass surgery.</a> Obes Surg. 32 (4), 1119-1129 (2022).</li>
<li>Han, H. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Duodenal-jejunal+bypass+increases+intraduodenal+bile+acids+and+upregulates+duodenal+SIRT1+expression+in+high-fat+diet+and+streptozotocin-induced+diabetic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Duodenal-jejunal bypass increases intraduodenal bile acids and upregulates duodenal SIRT1 expression in high-fat diet and streptozotocin-induced diabetic rats.</a> World J Gastroenterol. 28 (31), 4338-4350 (2022).</li>
<li>Yan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduction+of+intestinal+electrogenic+glucose+absorption+after+duodenojejunal+bypass+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Obes+Surg%22%5BJournal%5D)">Reduction of intestinal electrogenic glucose absorption after duodenojejunal bypass in a mouse model.</a> Obes Surg. 23 (9), 1361-1369 (2013).</li>
<li>Arble, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+comparison+of+one-anastomosis+gastric+bypass%2C+single-anastomosis+duodenal-switch%2C+Roux-en-Y+gastric+bypass%2C+and+vertical+sleeve+gastrectomy+in+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Surg+Obes+Relat+Dis%22%5BJournal%5D)">Metabolic comparison of one-anastomosis gastric bypass, single-anastomosis duodenal-switch, Roux-en-Y gastric bypass, and vertical sleeve gastrectomy in rat.</a> Surg Obes Relat Dis. 14 (12), 1857-1867 (2018).</li>
<li>Liang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Duodenal-jejunal+bypass+surgery+reverses+diabetic+phenotype+and+reduces+obesity+in+db%2Fdb+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Chem+Genom+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Duodenal-jejunal bypass surgery reverses diabetic phenotype and reduces obesity in db/db Mice.</a> Curr Chem Genom Transl Med. 11, 41-49 (2017).</li>
<li>Barataud, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Absence+of+role+of+dietary+protein+sensing+in+the+metabolic+benefits+of+duodenal-jejunal+bypass+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Absence of role of dietary protein sensing in the metabolic benefits of duodenal-jejunal bypass in the mouse.</a> Sci Rep. 7, 44856(2017).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Close-up+on+lab+animal+microsurgery%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim+%28NY%29%22%5BJournal%5D)">Close-up on lab animal microsurgery.</a> Lab Anim (NY). 35 (1), 43(2006).</li>
<li>Couceiro, J., Castro, R., Tien, H., Ozyurekoglu, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Step+by+step%3A+microsurgical+training+method+combining+two+nonliving+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Step by step: microsurgical training method combining two nonliving animal models.</a> J Vis Exp. (99), e52625(2015).</li>
<li>Nasser, K. M., Wahba, H. A., Kamal, E., El-Makhzangy, A. M., Bahaa, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+model+for+training+and+improvement+of+the+surgical+skills+in+endolaryngeal+microsurgery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Voice%22%5BJournal%5D)">Animal model for training and improvement of the surgical skills in endolaryngeal microsurgery.</a> J Voice. 26 (3), 351-357 (2012).</li>
</ol>

作者声明无利益冲突。

1953年，Varco等人18实施了首例空肠-回肠旁路手术，标志着减重外科的开端。自那时以来，外科医生已开展了大量减重手术。这些手术可实现体重下降，并改善代谢相关并发症4,19,20。此外，1967年，Mason和Ito21完成了首例Roux-en-Y胃旁路术（RYGB），该术式能有效减轻体重并改善代谢综合征。与RYGB类似，十二指肠转流术（DJB）是一种保留胃的RYGB改良术式，将小肠分为胆胰支、食物通道支和共同支。DJB手术可在不依赖食物摄入量减少或体重下降的情况下，实现显著且持久的血糖控制22,23。因此，DJB已被推荐作为体重指数较低的2型糖尿病患者合适的减重手术选择24。
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肥胖症和2型糖尿病是世界上最常见的慢性疾病，其在年轻个体中的患病率正在上升1。减重手术是治疗肥胖症和糖尿病最有效的方法，能够促进长期血糖稳定，同时改善与肥胖相关的并发症2,3。减重手术有多种类型，根据其是否减少胃容量或肠道吸收能力可分为限制性、吸收不良性和联合性手术4,5。
十二指肠-空肠旁路术（DJB）最初由 Rubino 和 Marescaux 开发，他们证明连接十二指肠与空肠可缓解2型糖尿病，其效果并非源于胃容量的减少6,7。DJB 保留完整的胃，并绕过整个十二指肠及近端空肠。肠道被分为胆胰支、食物支和共同支6,8。DJB 与多种减重手术具有相似之处，包括 Roux-en-Y 胃旁路术（RYGB）、迷你胃旁路术、胆胰分流术、十二指肠转流术以及 DJB 联合袖状胃切除术9。与 RYGB 相比，DJB 无需进行胃肠吻合，从而缩短了手术时间并提高了手术成功率。DJB 在改善葡萄糖代谢方面与 RYGB 相似，但对体重无明显影响10。DJB 术后，食物快速进入远端小肠，刺激胰高血糖素样肽-1（GLP-1）的分泌，从而改善葡萄糖代谢11,12。
动物模型的使用对于理解代谢、细胞和分子通路至关重要。减重手术的动物模型有助于我们认识肥胖和糖尿病潜在机制13,14。然而，由于物种间的生理差异，无法在动物模型中完全复制人类疾病15。在可用于研究的各种动物模型中，饮食诱导肥胖（DIO）小鼠模型最接近人类肥胖和代谢综合征16。选择小鼠进行十二指肠空肠旁路（DJB）手术旨在评估该手术的可行性，并为后续研究提供技术基础。本文对手术的技术要点和实验细节进行了全面总结。

<table><tbody><tr><td>腹部拉钩</td><td>F.S.T</td><td>17000-03</td><td>Colibri 拉钩 -3cm，拉钩范围 1.5cm/3cm 长</td></tr><tr><td>1% 戊巴比妥钠溶液</td><td>广州化学试剂厂</td><td>/</td><td>&amp;nbsp;将 500mg 戊巴比妥钠粉末溶于 50ml 生理盐水中，配制成 1% 戊巴比妥钠溶液。</td></tr><tr><td>注射用青霉素钠</td><td>华北制药股份有限公司</td><td>F2062121</td><td>青霉素</td></tr><tr><td>丁丙诺啡</td><td>广州化学试剂厂</td><td>/</td><td>镇痛</td></tr><tr><td>丁丙诺啡</td><td>广州大冢制药有限公司</td><td>/</td><td>镇痛药</td></tr><tr><td>柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液</td><td>LEAGENE</td><td>R00522</td><td>缓冲溶液</td></tr><tr><td>棉签</td><td>好正医疗</td><td>60220610</td><td>棉拭子</td></tr><tr><td>脱毛膏</td><td>Veet</td><td>AAPR-S222</td><td>脱毛乳霜</td></tr><tr><td>耳标</td><td>ZEYA</td><td>SUS304</td><td>耳标标记</td></tr><tr><td>电热毯</td><td>ZOSEN</td><td>ZS-CWDRT</td><td>加热垫</td></tr><tr><td>电子天平</td><td>梅特勒-托利多</td><td>20060902-6</td><td>称量体重</td></tr><tr><td>肠内营养粉</td><td>雅培实验室</td><td>/</td><td>营养粉</td></tr><tr><td>眼膏</td><td>广州大冢制药有限公司</td><td>/</td><td>保护眼睛</td></tr><tr><td>血糖仪</td><td>罗氏</td><td>6993788001</td><td>评估血糖水平</td></tr><tr><td>GraphPad Prism 9.4.1 版</td><td>GraphPad Software</td><td>version 9.4.1</td><td>用于统计分析的软件</td></tr><tr><td>高脂饮食（高脂 [60FDC] 纯化啮齿类动物饲料）</td><td>Dyets</td><td>112252</td><td>60kcal% 高脂饮食</td></tr><tr><td>微型镊子</td><td>金钟医疗</td><td>18-1140</td><td>微型镊</td></tr><tr><td>微型持针器</td><td>金钟医疗</td><td>EMT-160-Z</td><td>持针器</td></tr><tr><td>微型剪刀</td><td>金钟医疗</td><td>YBC010</td><td>微型剪</td></tr><tr><td>显微镜相机</td><td>LAPSUN</td><td>E 2000</td><td>视频采集</td></tr><tr><td>眼科剪刀</td><td>金钟医疗</td><td>Y00030</td><td>手术剪</td></tr><tr><td>戊巴比妥</td><td>广州化学试剂厂</td><td>/</td><td>麻醉</td></tr><tr><td>氯化钠注射液</td><td>广州大冢制药有限公司</td><td>B21L0301</td><td>NaCl 0.9%</td></tr><tr><td>体视显微镜</td><td>ZEISS</td><td>Stemi 305</td><td>双目体视显微镜</td></tr><tr><td>链脲佐菌素</td><td>Sigma</td><td>S110910-1g</td><td>STZ</td></tr><tr><td>缝合线</td><td>灵桥缝线</td><td>ZS-LQPMRZ5/0</td><td>Prolene 6/0，Prolene 10/0</td></tr><tr><td>组织镊</td><td>金钟医疗</td><td>H1701</td><td>手术镊</td></tr></tbody></table>

饮食诱导的肥胖糖尿病小鼠十二指肠-空肠旁路手术

Duodenal-Jejunal Bypass Surgery in Diet-Induced Obese Diabetic Mice

肥胖和2型糖尿病的流行已成为严重的全球公共卫生问题。肥胖是2型糖尿病、心血管疾病以及某些癌症的主要致病因素。减重手术为肥胖和糖尿病提供了长期且有效的治疗选择。袖状胃切除术（SG）和Roux-en-Y胃旁路术（RYGB）被广泛认为是最常用的减重手术方式。此外，一些探索性的减重手术也显示出良好的治疗效果。十二指肠-空肠旁路术（DJB）特别适用于体重指数较低的糖尿病患者，并已显示出有益的代谢改善作用。然而，由于动物模型有限，其独立于体重变化的代谢益处尚未完全阐明。本文介绍了在饮食诱导的肥胖（DIO）糖尿病小鼠中实施DJB手术的优化护理方案和外科技术。利用小鼠模型有助于更深入地理解DJB手术所诱导的代谢变化本质，同时推动相关临床实践的发展。

一般情况 
DJB 手术的平均手术时间为 84.5 ± 2.6 分钟。共有 15 只小鼠接受了 DJB 手术，其中 9 只存活。如表 1所示，大多数死亡发生在手术期间或术后 7 天内。术后死亡原因为：术后第 1 天出血（n=2），术后第 4 天吻合口漏（n=1），术后第 7 天吻合口梗阻（n=2），以及术后三周原因不明死亡（n=1）。
在本实验开始前的8周内，我们每周对10只小鼠进行一次DJB手术，作为预实验以简化操作流程。如图4所示，我们获得了预实验期间小鼠每周存活率的变化趋势。观察结果显示，存活率呈逐步上升趋势，表明掌握DJB技术需要进行强化的手术训练。
<img alt="生存率曲线图；术后进展，周 vs. 百分比，统计分析。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload...

十二指肠-空肠旁路（DJB）手术可改善葡萄糖代谢并减轻胰岛素抵抗。本文中，我们介绍一种建立稳定且可靠的小鼠DJB模型的实验方案。

肥胖和2型糖尿病的流行是严重的全球公共卫生问题。肥胖是2型糖尿病、心血管疾病……的主要致病因素

肥胖和2型糖尿病的发病率不断上升，已成为严重的健康问题。十二指肠-空肠旁路手术（DJB）可改善葡萄糖代谢并缓解胰岛素抵抗。然而，该手术在不依赖体重减轻情况下的代谢益处尚未被充分理解。选取饮食诱导的肥胖糖尿病小鼠进行DJB手术，以确定该手术的可行性和垂直结构，并为后续研究提供技术基础。小鼠通过腹腔注射1%戊巴比妥钠溶液和丁丙诺啡。麻醉小鼠后，检查趾捏反射，并将其固定于手术板上。然后将脱毛膏涂抹于小鼠腹部。用碘伏和乙醇对皮肤消毒三次。用无菌洞巾覆盖动物，并从剑突至腹部做一长约2厘米的切口。使用腹部拉钩暴露腹腔。在屈氏韧带远端5厘米处的空肠用6-0丝线进行双重结扎。在两处结扎之间的中点切断空肠。将空肠近端切口沿肠管向远端延伸5厘米，以建立空肠-空肠吻合。两条肠管的吻合口水平对齐，使用10-0丝线进行自然肠吻合。固定肠管两端，然后在此处切开切口。用连续单纯缝合法缝合后壁肠管的第二层，固定肠管两端后缝合前壁。用连续单纯缝合法缝合前壁的第四层，并用水平褥式缝合法缝合浆肌层。将远端空肠切口拉至胰腺下方一厘米处的十二指肠位置，并以相同方法行十二指肠空肠吻合。用6-0缝线在距十二指肠空肠吻合口远端2毫米处对十二指肠进行双层缝合。在中间位置剪断，并用10-0丝线缝合残端。整理并复位肠管至腹腔内。用13摄氏度的生理盐水灌注腹腔。用6-0丝线分别缝合肌肉层和皮肤层。用碘伏消毒皮肤。术后注射生理盐水和青霉素，以防止脱水和感染。注射布托啡诺以进行术后镇痛。术后将小鼠置于电热毯上，防止低体温，直至其苏醒。术后当天，禁食禁水。术后第一天，给予小鼠糖水饮用，每天观察小鼠的健康状况。可以看到，存活率逐渐提高，表明我们需要通过强化的手术训练来掌握DJB技术。小鼠在术前和术后八周的体重及每日食物摄入量相似。与假手术对照组小鼠相比，DJB小鼠在术后八周未表现出显著的体重下降。由于在七天期间内的饮食转换，摄食量有所减少。进行DJB手术和假手术（SHAM）对照，并在术后三周恢复至术前水平。通过检测血糖可知，小鼠在DJB手术后血糖水平显著降低，葡萄糖耐量也明显改善。相信通过之前的介绍，您已对DJB手术有了直观的认识，并充分理解其在改善血糖方面的作用。我们可以在18分钟内掌握这项技术。最重要的是牢记所有操作步骤，并熟练掌握该技术。例如，缝合过程应当严谨规范。在我们的手术流程中，我们认为术前准备和术后护理在整个外科手术过程中起着重要作用。该技术可能解答有关肥胖和代谢的关键问题，并为相关领域的手术操作提供途径。我们希望这项技术能够对您有所帮助。

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医学

饮食诱导的肥胖糖尿病小鼠的十二指肠-空肠搭桥手术

近年来，许多研究采用胃转流大鼠模型来揭示Roux-en-Y胃转流手术背后的生理机制。本文旨在展示并讨论我们已发表的胃转流大鼠模型中的技术与实验细节，以帮助理解该实验工具的优势与局限性。...

大鼠Roux-en-Y胃旁路手术

本视频介绍了一种减肥手术——Roux-en-Y...

Roux-en-Y 胃旁路手术：一种用于小鼠模型胃切除的减重外科手术

减重手术是减轻体重以及与病态性肥胖常伴随的致命性代谢并发症（如糖尿病、肥胖和血脂异常）的最有效方法。减重手术的小鼠模型为解析这些手术对糖尿病、高血压和血脂异常产生有益作用的分子机制提供了独特而重要的研究工具。...

小鼠袖状胃切除术与改良Roux-en-Y胃旁路术的技术方法

本方案演示了小鼠胰岛的分离及其在脱细胞支架上的接种。将支架支持的胰岛移植到链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病小鼠的附睾脂肪垫中。胰岛在移植部位存活，并逆转了高血糖状态。...

支架支持的胰岛移植至糖尿病小鼠附睾脂肪垫

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一种小鼠垂直袖状胃切除术模型

本方案介绍在大鼠上实施单吻合口胃旁路术（OAGB）的操作步骤。术者首先使用吻合器制作一个长管状胃囊，随后手工缝合完成吻合。在此动物模型中，术者需复制与人类手术相同的胆胰支与共同支长度比例，因此胆胰支长度设定为35...

大鼠单吻合口胃旁路术（OAGB）

糖尿病和肥胖症的患病率在全球范围内持续上升。糖尿病、肥胖症及其相关死亡率和共病之间的机制需要进一步研究。本文介绍了一种动物袖状胃切除术（SG）的操作方案，作为一种简单的减重手术临床前模型。...

使用外科夹在小鼠中进行袖状胃切除术

Roux-en-Y 胃旁路术（RYGB）用于治疗肥胖症和糖尿病。然而，RYGB 疗效的潜在机制尚未完全明确，且由于技术难度较高，动物模型研究常因高死亡率而受限。本文提供了在大鼠中实施 RYGB...

使用线性吻合器进行大鼠Roux-en-Y胃旁路术的操作方案

单吻合口十二指肠回肠旁路术（SADI-S）是一种新兴的减重外科手术，具有重要的代谢效应。本文中，我们介绍了一种在小鼠中可靠且可重复的SADI-S模型。...

小鼠单吻合十二指肠-回肠旁路联合袖状胃切除术模型

采用无创的[13C]-辛酸呼气试验测定雌性NOD LtJ小鼠胃排空，用于追踪胃轻瘫。...

使用[13C]-辛酸呼气试验评估非肥胖型糖尿病小鼠的胃排空

了解十二指肠-空肠搭桥手术在饮食诱导肥胖糖尿病小鼠模型中的建立方法。该技术可改善葡萄糖代谢并降低胰岛素抵抗，为代谢疾病研究提供可靠的实验框架。

饮食诱导的肥胖糖尿病小鼠十二指肠-空肠旁路手术

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