一种用于现场和实验室条件下诊断人畜共患线虫的简易粪便漂浮法
2023年12月15日
本研究描述了一种浮选法的应用，用于鉴定2017年至2021年在墨西哥野外条件下采集的犬类粪便样本中检测到的Toxocara canis和Ancylostoma spp.。
目前，一项针对犬类人畜共患寄生虫的全国性地理定位研究正在开展，旨在为这些疾病的进一步防控策略提供依据。墨西哥多样的生态系统影响着犬类寄生虫感染的发生频率。因此，有必要开展实地调查并鉴定这些寄生虫，以便根据每种寄生虫的流行病学特征，制定针对不同地区的驱虫指南。
简易漂浮法的敏感度不足以检测隐孢子虫卵囊、贾第鞭毛虫包囊或毛首线虫卵。我们提出一种浓缩步骤，以提高对这些寄生虫的粪便寄生虫学检测效果。该技术可加快并便于在缺乏实验室基础设施或设备的地区对犬类蠕虫感染进行诊断。
每次显微镜检查后可立即给出检查结果和驱虫建议。本方案有助于在野外或实验室条件下开展常规粪便检查，以评估犬弓首蛔虫（Toxocara canis）和钩口线虫（Ancylostoma）在犬类中的感染频率。开始时，应在犬排便后立即或10分钟内，从地面采集至少两克粪便样本。
彻底密封装有粪便样本的袋子，并将袋子置于 4°C 冰箱中冷藏。为制备饱和盐溶液，先用清水彻底清洗一个空的 1 升装苏打水瓶。
在12至14盎司的塑料杯中称取420克盐，并将其加入1升的瓶子中。向瓶中加水至满，拧紧瓶盖，剧烈摇晃瓶子直至溶液达到饱和。
首先，采集犬的粪便样本，并在1升瓶中配制饱和盐溶液。取约3克粪便放入塑料杯中，加入1毫升饱和盐溶液，搅拌1分钟，制成糊状物。
向杯中加入100毫升饱和盐溶液。将悬浮液通过塑料滤网倒入新的塑料杯中，以去除粗颗粒。让悬浮液静置15至20分钟。
将接种环加热一秒钟，以确保其无卵、包囊或卵囊残留，然后冷却五秒钟。用接种环从粪便悬液表面取约三滴，分别在玻片上放置三个独立的液滴。
在显微镜下使用10倍物镜观察每滴样本。在样本上放置盖玻片，以便在40倍放大倍数下观察样本。40倍放大倍数下的光学显微镜图像显示存在犬弓首蛔虫（Toxocara canis）和钩口属（Ancylostoma）物种的虫卵。
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概述
本研究采用漂浮法检测墨西哥犬类粪便样本中的犬弓首蛔虫（Toxocara canis）和钩口线虫属（Ancylostoma spp.），旨在明确其感染情况。该研究强调应根据这些寄生虫的流行病学特征，制定针对特定地区的驱虫策略。
关键研究要素
科学领域
- 寄生虫学
- 兽医学
- 流行病学
背景
- 墨西哥犬类人畜共患寄生虫的地理定位研究。
- 不同生态系统对寄生虫感染率的影响。
- 需要通过野外工作鉴定寄生虫，以实现有效防控。
- 简单漂浮法在检测某些寄生虫方面的局限性。
研究目的
- 鉴定犬粪便样本中的犬弓首蛔虫（Toxocara canis）和钩口线虫属（Ancylostoma spp.）。
- 制定基于地区的驱虫指南。
- 改进蠕虫感染的诊断技术。
使用的方法
- 用于寄生虫鉴定的浮聚法。
- 在墨西哥各地犬只中采集野外样本。
- 建议采用浓缩步骤以提高检出率。
- 在资源有限环境下评估诊断技术。
主要结果
- 在样本中鉴定出犬弓首蛔虫（Toxocara canis）和钩口线虫属（Ancylostoma spp.）。
- 表明需要改进诊断方法。
- 所提出的浓缩技术显示出更佳检测效果的潜力。
- 研究结果支持制定针对性驱虫策略的开发。
结论
- 寄生虫的野外鉴定对公共卫生至关重要。
- 改进的方法有助于控制人畜共患感染。
- 研究表明，寄生虫管理需要采取针对性的策略。
常见问题
行业高管相关性
在犬类粪便样本中可靠地检测人畜共患线虫（如犬弓首蛔虫和钩口线虫属物种）对于转化寄生虫学中的早期靶点验证和流行病学风险评估至关重要。基于漂浮法的诊断流程可在野外和实验室环境中实现可操作的监测，支持针对特定地区的干预策略。该能力有助于提高公共卫生和兽医研发领域在应对人畜共患传播风险时的预测可信度。
生物制药研发中的战略应用
早期发现与靶点验证
- 能够在多种生态背景下直接检测寄生虫的流行情况。
- 支持对人畜共患线虫诊断靶标的功能验证。
- 通过量化不同地理区域的感染率，助力生物学风险降低。
- 提供数据以指导针对特定区域制定的干预策略。
筛选与检测方法开发
- 提供一种标准化、可重复的漂浮法操作流程，适用于野外和实验室环境。
- 生成用于寄生虫卵检测和频率估算的定量结果。
- 制备经验证的生物样本，用于后续流行病学分析。
- 可在资源有限的条件下实现大规模样本队列的高效筛查。
转化与临床前研究
- 将诊断结果与疾病相关的监测和生物标志物追踪相统一。
- 支持从现场检测到实验室确诊及干预规划的全过程衔接。
- 为基于风险评估的驱虫和防控策略优化提供依据。
- 为动物源性传播模型提供机制层面的风险降低支持。
流程与工作流整合
这种基于浮力的诊断方法在人畜共患线虫的早期发现、流行病学监测和转化干预规划的交叉领域中实现了整合。
- 发现生物学： 可在犬类群体中对寄生虫分布和流行率进行假设检验。
- 筛查： 可重复、定量地检测犬弓首蛔虫（T. canis）和钩口属（Ancylostoma spp.）虫卵。
- 分析： 支持对不同地区和时间点的感染率进行统计学比较。
- 转化研究： 将实地监测与实验室验证相结合，推动靶向驱虫策略的发展。
- 企业级复用： 提供一种便携、可适应的方案，适用于持续的监测和干预研究。
运营与企业影响
- 科学价值：提高对人畜共患病风险评估和靶点验证的预测可信度。
- 操作价值：在不同环境中实现诊断工作流程的标准化，以确保可重复性和可扩展性。
- 战略价值：支持基于数据的快速决策，判断是否部署干预措施。
- 项目组合影响：支持根据风险调整对监测和控制项目的优先级排序。
实施注意事项
- 需要经过培训的人员通过显微镜识别寄生虫卵。
- 对仪器设备需求极少，可在资源有限的环境中开展。
- 样本采集和漂浮程序的标准化对于结果可重复性至关重要。
- 对于不适用于简单漂浮法检测的寄生虫，可能需要进行方法调整。
- 对某些原虫寄生虫的检测灵敏度有限，需结合其他方法以实现全面监测。
