建立子宫内膜异位囊肿小鼠实验模型以研究其相关不孕症

我们的研究范围集中在了解子宫内膜异位症相关不孕症的潜在机制。我们的目标是通过开发模拟子宫内膜异位症的小鼠模型并研究其对生育能力的影响来弥补知识差距。在子宫内膜异位症研究领域，最近的发展包括了解子宫内膜异位症的分子机制、识别用于诊断和治疗的新标志物以及开发研究子宫内膜异位症等特定亚型的创新模型。这些发展有助于提高子宫内膜异位症的知识和潜在的治疗策略。目前子宫内膜异位症研究的实验挑战包括缺乏可靠的动物模型、对发病机制和生育影响的了解有限，以及需要复发研究和诊断测试。子宫内膜异位症小鼠模型和研究结果的结合解决了这些挑战并推动了该领域的发展。

与其他技术相比，我们的协议具有明显的优势。它特别专注于模拟子宫内膜异位症，而尚未通过这种方法建立其他亚型。凭借很高的成功率，它可以进行基因改造并复制与人类相似的生殖特征，使其成为研究子宫内膜异位症相关不孕症的宝贵工具。我们的发现为子宫内膜异位症研究的新时代铺平了道路。通过填补长期存在的空白，我们的模型有望带来变革性的见解，彻底改变我们对子宫内膜异位症的理解、治疗和潜在的预防。通过整合复发和诊断研究的结果，我们的研究增强了子宫内膜异位症研究和患者护理的更广泛背景。

[旁白]收集含有雄性信息素的垫料后，将它们引入雌性小鼠笼中48小时。将 10 毫升 PBS 倒入培养皿中，然后将棉签的一端浸入其中以吸收液体。轻轻地从笼子里取出一只老鼠，然后把它放在盖子上。将湿润的棉签轻轻插入阴道，然后将棉签轻轻旋转 45 度，绕动物身体的长轴。从阴道发光壁收集细胞后，小心地取出拭子。在干净的预标记载玻片上轻轻滚动拭子尖端，以转移收集的细胞。在显微镜下检查载玻片是否存在表明发情期的角化上皮细胞。首先，用70%乙醇对供体安乐死发情期雌性小鼠的腹部区域进行消毒。使用无菌手术剪刀沿腹膜中线切开一厘米的切口，露出肌肉层。然后，使用另一把剪刀剪开肌肉层并露出骨盆腔。关闭镊子的尖端，用钝的中央部分轻轻提起肠道。找到子宫后，无菌解剖整个子宫角，确保切除两个子宫角。将切除的组织放入含有PBS的培养皿中，去除多余的脂肪组织。使用无菌手术刀，将组织细微地解剖成一毫米的立方体。定期添加PBS以保持组织湿润。将麻醉的受体小鼠置于无菌手术板上的仰卧位。通过轻轻纵后腿来识别手术部位，以感觉皮肤下的骨质突出。用 70% 乙醇拭子消毒手术区域，然后用 Betadine 消毒。在所选部位，在三到五毫米之间做一个精确的侧切口。用非惯用手镊子稳定卵巢，并将 100 微升 PBS 注射到卵巢滑囊中，观察轻微分离。在滑囊上做一个小缝，并使用微型镊子移植一毫米立方的子宫组织碎片。手术后，用可吸收缝合线缝合肌肉层，用不可吸收缝合线缝合皮肤。四个星期后，将移植的受体小鼠从外壳中取出。在安乐死的受体小鼠上做一个中线切口，露出腹腔进行器官检查。彻底检查腹腔是否有外来子宫内膜异位症病变。然后，取出有可见病变的卵巢进行摄影。用10%中性缓冲福尔马林固定有病变的卵巢。将组织切片切片并安装在载玻片上后，放置载玻片二甲苯溶液以去除石蜡。通过将载玻片置于一系列降低的乙醇浓度中来重新水化组织切片。在室温下用 1% 过碘酸处理组织切片 5 至 10 分钟。然后，用蒸馏水彻底冲洗载玻片，以去除任何残留的过碘酸。现在，用移位溶液染色组织切片 15 分钟。用热自来水冲洗载玻片以去除多余的污渍，然后用蒸馏水冲洗。用梅耶苏木精复染组织切片两到三分钟。在涂抹发蓝试剂 30 秒之前，用流动的自来水冲洗载片。用蒸馏水冲洗载玻片后，在增加乙醇浓度的情况下对切片进行脱水。将切片浸入二甲苯中，使其透明。在切片上涂抹封固剂，然后轻轻放置盖玻片，避免气泡。干燥后，在光学显微镜下检查载玻片是否存在子宫内膜腺体、基质和出血性囊肿，以确认卵巢中存在子宫内膜异位症。与假对照组相比，子宫内膜组在移植后 4 周可以看到异位子宫内膜囊性生长与卵巢形态相关。进一步的组织病理学检查证实了异位子宫内膜组织在子宫内膜组中成功植入。