开发一种临床相关的 rats 出血性休克模型

每年全球约有200万人死于失血性休克。我们正在研究失血性休克的病理生理机制，旨在发现新的治疗靶点，从而提出创新的治疗策略。失血性休克本身是一种复杂的临床状况，其特征为血流动力学紊乱，伴随代谢损伤和器官功能障碍。

实验方案的多样性使得其研究更加复杂。在本研究中，我们拟建立一种可重复、标准化且具有临床相关性的大鼠失血性休克模型。我们希望该失血性休克模型能够成为未来研究中的标准模型之一。

采用标准模型将有助于推动该领域的发展，至少因为它能够实现不同研究之间关于出血性休克工作的结果比较。首先，在手术过程中，将润滑的直肠探头插入麻醉大鼠体内以监测其体温。在麻醉大鼠右下颈部锁骨上方的颈区定位后，使用DeBakey无创镊子轻轻夹住皮肤，并用精细锐利的剪刀或手术刀进行精确切口。

使用标准齿状镊子轻轻切开组织。找到颈静脉，并从其肌肉包膜中轻柔分离。用4-0丝线缝合线结扎颈静脉远端，确保牢固固定。

使用持针器将缝线张紧于颈静脉。在颈静脉近端侧放置一根4-0缝线，并打一个外科结但暂不收紧。使用Vannas显微解剖剪，在颈静脉上做一个小切口。

用小镊子小心夹住静脉壁后，将PE50导管插入颈静脉。轻微推进导管，为确认其位置正确，可抽出少量血液后再重新注入。收紧先前准备好的结，以固定导管。

在切口区域滴加一滴利多卡因。用湿润的无菌纱布覆盖切口。使用德贝基无创镊夹住左腿斯卡帕三角区的皮肤，用精细锐利的剪刀或手术刀进行切开。

使用标准纹式镊子轻柔地分离组织。找到股三角区，并将一把镊子置于三角下方。然后用第二把标准纹式镊子小心地将动脉与神经及股静脉分开。

在股动脉远端放置一根4-0缝线，并用持针器夹住缝线，使股动脉处于张力状态。接着，在股动脉近端放置另一根4-0缝线，打一个外科方结但暂不收紧。夹闭血管后，使用Vannas显微解剖剪在股动脉上做一横向切口。

用标准齿状镊夹住动脉壁，用镊子夹持导管插入股动脉。轻轻松开动脉夹，确保血液未反流进入导管。若信号良好，将导管稍向前推进入动脉，并拉紧先前准备好的外科结。

向大鼠注射肝素，并在切口区域覆盖一块湿润的无菌纱布。稳定10分钟后，连续记录5分钟的基础血流动力学数值。为诱导出血性休克，使用1 mL注射器在5分钟内从股动脉抽取5 mL血液。

在室温下配制50%乳酸林格液与50%采集血液的混合液。将装有该混合液的2 mL注射器连接至颈静脉导管末端。在维持出血性休克状态时，当平均动脉压超过38 mmHg，从股动脉抽出200 µL血液。

若压力低于32 mmHg，则通过颈静脉注射200微升50%血液与50%乳酸林格液的混合液。用纱布对尾部进行无菌准备后，使用针尖从尾端采集一滴血液，以测定外周血乳酸水平。最后，使用20 mL注射器通过颈静脉导管，以注射泵输注乳酸林格液对大鼠进行复苏。

出血性休克处理后，夹闭麻醉大鼠的颈静脉。从静脉中移除导管。结扎后，应确保血管无血液渗漏。

现在，使用5-0无菌缝线通过皮下和皮肤缝合关闭切口区域。用10%聚维酮碘溶液对术区进行消毒。使用装有26号针头的1 mL注射器，皮下注射布托啡诺。

苏醒后，将大鼠放置于其笼子内的加热垫上。在诱导出血性休克16小时后，从尾端采集一滴血液以测定血乳酸水平。将麻醉后的大鼠置于手术台上，并插入直肠探头。

进行颈动脉插管时，使用DeBakey无创镊夹住皮肤，用精细锋利的剪刀或手术刀在颈部正中做切口。用标准型镊子轻轻钝性分离组织，分开唾液腺并切开气管肌，以暴露气管环。

使用标准纹状镊将左侧颈动脉与神经分离，并用4-0丝线在远端结扎。接着，在动脉近端放置缝合线，打一个外科手术结但暂不收紧。夹闭后，使用Vannas显微解剖剪剪开颈动脉。

使用标准手术镊轻轻夹住动脉壁以扩大开口，并用提供的导管进行动脉插管，操作时用镊子夹持导管。轻轻松开动脉夹，确保血液不会反流进入导管。确认获得正确的血压信号后，将导管稍向前推进入动脉，并拉紧先前准备好的外科结。

假手术组与出血性休克组的基础平均动脉压相似。出血性休克诱导后24小时，由于舒张压降低，出血性休克组的平均动脉压显著下降。各组之间的收缩压、脉压和心率未观察到变化。

尽管休克指数保持不变，但在出血性休克组中，改良休克指数显著升高。作为全身性代谢功能障碍指标的乳酸血症，在出血性休克后显著升高，并在出血性休克持续16小时后进一步上升。在出血性休克诱导后16小时，体温和呼吸频率（全身炎症反应综合征的标志）在各组之间无明显变化。

行为学评估显示，出血性休克组的行为评分升高，提示其姿势和活动发生改变。