Rapid Glyco-Qualitative Assessment of Recombinant Proteins Using a Fully Automated System

Sayaka Fuseya; Ayaka Ono; Hiromi Ootani; Saho Mizukado; Tomomi Obayashi; Nana Tanaka; Hiroko Shimazaki; Kenji Kajiyama; Moe Ashitomi; Shiori Yasuda; Takenori Miyabe; Kazuhiro Nakamura; Osamu Segawa; Kazumi Sawakami; Atsushi Kuno

doi:10.3791/66571

JoVE Journal
Biochemistry

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JoVE Journal Biochemistry

Rapid Glyco-Qualitative Assessment of Recombinant Proteins Using a Fully Automated System

使用全自动系统对重组蛋白进行快速糖质定性评估

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June 28, 2024

DOI: 10.3791/66571-v

Sayaka Fuseya¹, Ayaka Ono¹, Hiromi Ootani¹, Saho Mizukado¹, Tomomi Obayashi², Nana Tanaka², Hiroko Shimazaki^1,2, Kenji Kajiyama², Moe Ashitomi², Shiori Yasuda², Takenori Miyabe², Kazuhiro Nakamura², Osamu Segawa², Kazumi Sawakami², Atsushi Kuno¹

¹Molecular & Cellular Glycoproteomics Research Group, Cellular and Molecular Biotechnology Research Institute,National Institute of Advanced Industrial Science and Technology, ²Precision System Science Co., Ltd.

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

之前开发了一种用于自动快速分析蛋白质上糖基的系统。本文介绍了"糖定性分析"方案，该方案针对广泛的用户进行了优化，例如那些从事分析生物制药和其他糖缀合物材料中聚糖结构的用户。

我们的范围是蛋白质糖基化。聚糖结构与生物制药的稳定性和功能的变化有关，并且与宿主细胞种类和培养条件有关。在某些生产条件下，可受到一定程度的污染。

我们的目标是为这种糖基鉴定制造用户友好的工具。主要是 LC 和质谱。但对于简单的测试，基于向量的技术是适用的。

研究人员提供了许多具有不同特异性的凝集素类型，每种凝集素都与一些特定的聚糖结合。因此，我们可以使用逐个凝集素蛋白、凝集素 ELISA 和凝集素微阵列的多用途来估计聚糖结构。糖基化发生在我们体内的功能性蛋白质中。

聚糖结构随着疾病而改变。如今，我们已经使用几种疾病特异性糖基化作为诊断生物标志物，例如 C99 和 FBL3。使用基于下一代的技术不仅发现了新的候选生物标志物，而且为了进行验证，我们需要一个认证系统。

糖鉴定是一项艰苦的工作。我们需要在短时间内分析数百或数千个数字。但是，没有满足需求的系统。

我们的分析方法是唯一一种具有全自动测量过程的方法，大大减少了人力，使我们能够进行有效的验证。我们的工作旨在进一步改进我们的快速仪器，特别是用于定量测量的仪器。在此之后，我们希望实现一种独特的诊断工具，其糖生物标志物面板由我们的多重检测系统测量。

因此，我们专注于发现疾病特异性糖生物标志物。

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