使用硫酸葡聚糖建立大鼠直肠结肠切除及回肠储袋-肛管吻合术后储袋炎模型
2024年5月31日
本方案描述了建立 pouchitis 大鼠模型的方法。通过采用显微外科技术进行回肠储袋-肛管吻合术（IPAA）手术，构建回肠储袋模型。术后，大鼠接受 4% 硫酸葡聚糖钠（DSS）处理，持续 4 天。
由于在贮袋炎上开展临床试验存在诸多挑战，动物模型可作为研究贮袋炎药物及其发病机制的有力工具。本方案描述了建立大鼠贮袋炎模型的方法。该贮袋炎实验动物模型为研究该疾病的发病机制及治疗方法提供了基础。
若已有小鼠喂养及回肠肛管吻合术（IPAA）手术重建的经验，将学习曲线缩短至约10只动物是可行的。该过程中的关键步骤是G形 pouch 的构建与吻合。术后管理在成功建模中也起着至关重要的作用。
成功建立大鼠贮袋炎模型为后续的药物和机制研究提供了坚实的平台。我们的团队将始终致力于研究贮袋炎的发病机制及药物作用机制。首先，将大鼠仰卧置于解剖台上。
用浸有抑菌生理盐水的无菌纱布覆盖手术部位。沿正中做6厘米切口后，使用拉钩暴露腹膜表面，然后切断末端空肠。
将回肠残端置于距离回盲瓣一至两厘米处，然后进行切断。游离终末空肠的血液供应，并使用8-0缝线结扎。现在开始切除右半结肠，仔细结扎右半结肠和中结肠静脉。
接下来，分离肠系膜下动脉并游离直肠下动脉。继续沿直肠向下分离，直至距离肛缘约2厘米处。然后以约45度角斜行切断远端直肠，以防止术后狭窄。
然后将末端回肠折叠成 J 形，以形成回肠储袋。使用锁边缝合法进行后壁吻合，并采用改良的锥形缝合法加强前壁。确保肠系膜无扭转。
间隔缝合储袋开口的前侧壁与直肠残端的侧壁，使用8-0缝线进行牵引。随后，对前壁和后壁均采用全层连续锁边缝合。依次使用4-0缝线关闭腹肌筋膜和皮肤。
为了用DSS处理大鼠回肠贮袋炎模型，将4克DSS溶解于100毫升纯水中，每日新鲜配制。从术后第31天至第35天，给予IPAA组纯水，给予贮袋炎组4% DSS。最初，IPAA组和回肠贮袋炎组的大鼠体重相等，总体状况良好。
术后第35天，回肠贮袋炎组的体重显著低于IPAA组。
概述
本方案描述了袋状炎大鼠模型的建立方法，该模型对于研究袋状炎的发病机制及治疗至关重要。该模型通过回肠储袋-肛门吻合术（IPAA）手术建立，随后采用葡聚糖硫酸钠（DSS）进行处理。
关键研究组成部分
科学领域
- 神经科学
- 生物学
- 动物模型
背景
- 在临床试验中，贮袋炎是一种难以研究的疾病。
- 动物模型为了解贮袋炎的发病机制提供了重要线索。
- 大鼠模型可用于有效探究贮袋炎的治疗方法。
- 既往的回肠肛管吻合术（IPAA）手术经验有助于该模型的建立。
研究目的
- 建立可靠的袋炎研究大鼠模型。
- 了解袋炎的发病机制。
- 评估该疾病的潜在治疗方法。
使用的方法
- 通过回肠肛门袋（IPAA）手术建立大鼠模型。
- 术后管理以确保模型成功。
- 使用4%葡聚糖硫酸钠（DSS）处理4天。
- 采用显微外科技术以实现精确操作。
主要结果
- 成功建立大鼠贮袋炎模型。
- 证明了该模型的可行性，并显著缩短了学习曲线。
- 为贮袋炎的发病机制及治疗提供了新的研究思路。
- 该模型具有进一步开展相关研究的潜力。
结论
- 大鼠模型是研究贮袋炎的有力工具。
- 回肠袋肛管吻合术（IPAA）和DSS处理是建立模型的有效方法。
- 本研究为未来的贮袋炎研究奠定了基础。
常见问题
行业高管相关性
建立一种可重复的、在直肠结肠切除术和回肠储袋-肛门吻合术（IPAA）后发生储袋炎的大鼠模型，填补了炎症性肠病并发症临床前研究中的关键空白。该模型可在临床研究受限的疾病相关体系中，支持治疗靶点的机制性风险排除与验证，推动新疗法的发现。其稳健的设计支持从早期发现到临床前评价的转化连续性，为新型抗炎药物的研发决策提供依据。
生物制药研发中的战略应用
早期发现与靶点验证
- 能够在受控的体内环境中探究贮袋炎的发病机制及免疫介导机制。
- 通过重现人类术后炎症反应，支持对功能靶点的验证。
- 提供可重复的疾病模型，有助于提高候选分子筛选的预测可靠性。
筛选与检测方法开发
- 提供经过验证的动物模型系统，用于定量评估药物疗效和生物标志物反应。
- 标准化体重减轻、食物摄入量和组织病理学等终点指标，以实现不同研究间的可比性。
- 在具有临床相关性的条件下，实现抗炎化合物的可重复筛选。
转化与临床前研究
- 与疾病相关的病理学特征一致，支持转化性生物标志物的发现与验证。
- 将早期的机制性发现与袋状炎干预措施的临床前概念验证衔接起来。
- 通过模拟溃疡性结肠炎患者术后出现的炎症并发症，降低转化风险。
流程与工作流整合
该大鼠贮袋炎模型可融入从发现到临床前研究的连续过程，能够对针对结肠切除术后并发症的抗炎治疗手段进行假设验证、先导化合物筛选和转化验证。
- 发现生物学：支持对与贮袋炎相关的免疫和炎症通路的机制性研究。
- 筛选：提供定量且可重复的输出结果，用于化合物有效性和安全性分析。
- 分析：提供标准化的检测指标，包括体重、摄入量参数和组织病理学结果，以支持可靠的统计分析。
- 转化研究：促进临床前研究结果与临床贮袋炎病理特征及生物标志物谱的对应。
- 企业级复用：建立可重复使用的平台，用于在多个发现项目中迭代评估药物和生物标志物。
运营与企业影响
- 科学价值：提高袋状炎药物发现中预测的可信度，并减少机制上的模糊性。
- 操作价值：增强炎症性疾病临床前模型的标准化、可重复性和可扩展性。
- 战略价值：通过降低早期候选药物的风险，为推进或终止决策提供依据，并优化资源分配。
- 项目组合影响：实现针对术后并发症的抗炎资产的风险调整后优先排序与推进。
实施注意事项
- 需要具备显微外科技术及术后动物护理的专业知识。
- 需要具备进行回肠肛管吻合术（IPAA）和DSS给药的专用仪器设备。
- 需要跨团队对终点指标和分析方案进行标准化。
- 针对不同啮齿类品系或诱发 pouchitis 的试剂，可能需要进行模型调整。
- 该模型的局限性包括手术操作复杂，以及需要严格的术后监测。
