利用恒定气压反馈控制微注射针尖开口的湿法倒角技术

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传统上，拉制针头后需通过将其与某物体摩擦来打开针尖，从而形成可用于显微注射的开口，但这种方法得到的针头可能非常理想，也可能完全无法使用。而本方法能够以精确可控的方式制备针头，每次均可获得尖锐且性能稳定的针尖。本方案可提供关于针尖开口大小的反馈信息。

一旦该针头打开，即可逐步降低输送至针尖的压力，气泡停止流出时对应的压力越高，表明该针头的开口尺寸越小。按照制造商的指南准备研磨组件，包括安装研磨板并固定带有磁铁的卡环。然后在基座的光学平面表面滴加10滴基座油。

将研磨组件放置在底座上，并启动研磨操作。打开光源以照亮工作区域，确保光源位于斜面边缘后方，以45度角照射到磨料板和针头上。在90倍放大倍率下原位旋转显微镜镜筒。

短暂停止研磨盘的旋转，以便将显微镜对准研磨盘表面。向棉芯中加入1%润湿剂，直至棉芯完全湿润。然后将1%润湿剂滴加到研磨盘表面，确保润湿剂覆盖整个表面，且不泄漏至黑色固定环上。

将预湿的毛细管放置在旋转的研磨板表面，从顶部俯视时，确保毛细管位于研磨板的左侧，并从“时钟”的11点位置延伸至6点位置。注意毛细管不得接触固定环的黑色部分。在完成研磨组件的准备后，开始对硼硅酸盐玻璃针头进行倒角处理：将针头插入针头夹持器中，并拧紧固定环以固定针头。

打开调节器并将压力增加至24磅每平方英寸。旋转粗调旋钮，使针持升高，直至针尖高于旋转研磨板的表面。旋转整个操纵器，使针摆动至旋转板上方的指定位置。

将针头置于磨砂板上，使板的旋转方向远离针尖。从侧面观察，使用粗调旋钮将针头向下移动，接近磨砂板表面，当针头即将接触液面时停止。调整针头位置，使其位于视野中心。

到达中心位置后，缓慢增加放大倍数，同时进行微调以保持针尖位于视野中央。在最大放大倍数下，停止研磨盘转动，并将显微镜对焦于砂磨板表面。一旦表面清晰对焦，立即重新启动研磨盘旋转。

使用操纵器的粗调旋钮，将针头向下移动至砂纸上。在视野中观察针头及其阴影。当两者接近接触时，切换至微调旋钮。

继续降低针头，直到其接触到自身的投影。此时读取卡尺数值并记录读数。该读数表明磨料板表面位于此卡尺测量值处或低于该值。

使针头在此卡尺读数下保持 5 到 10 秒。使用操纵器微调旋钮缓慢提升针头，同时确保针头始终位于润湿剂液面以下。短暂停止研磨板的旋转，观察是否有气泡从针尖逸出。

若未观察到气泡，则将针头移回上一个卡尺读数位置，稍微降低针头，重新进行卡尺读数，并重复之前演示的步骤。若观察到气泡，重新启动研磨板，观察在研磨板旋转过程中是否产生气泡。一旦在研磨板停止旋转时观察到气泡，通过旋转调压阀调节旋钮缓慢降低气压。

当针尖不再有气泡流出时，记录压力，然后逐渐增加气压，直至针尖重新开始有气泡流出。斜面打磨完成后，将针抬高至磨削板上方，确保其高度足够，以便在整体操作臂移离磨削板和显微镜时不会触碰到任何物体。当针处于可安全取出的位置时，将气压降至零。

取下针头并将其放入培养皿等针头储存盒中，直至使用。