用于延长啮齿类动物心脏移植物灌注时间的改良式朗根多夫灌注法

本研究旨在突出Langendorff灌注作为一种研究工具所具有的动态性与广泛应用前景，及其在心血管疾病研究中的巨大实用价值。同时强调了根据实验需求，对流量、压力、灌注液和温度等不同灌注参数进行优化调整的重要性。本方案为当前Langendorff灌注的常规方法提供了一种替代性策略。

这表明，使用低于常规的灌注压力（例如 30 至 35 毫米汞柱，而非通常的 60 至 80 毫米汞柱）可能对某些类型的实验有益，并可提高相关研究的整体科学结果。该方案通过消除依赖于技术本身的功能丧失，增强了 Langendorff 灌注作为心血管研究技术的重要性。此外，该方案有望引发关于临床灌注心脏移植物（如用于移植保存的心脏）最佳灌注实践的讨论。

首先，在确认反射消失后，将已麻醉的大鼠从麻醉舱中取出。将其置于手术区域，并通过面罩持续给予3%异氟烷。进行足趾夹捏测试后，经由动物的阴茎静脉注射30单位肝素。

将大鼠整个腹部和上胸部区域的毛发剃除，然后清除手术区域的毛发碎屑。用胶带固定每一只肢体，以防止手术过程中动物移动。

现在在下腹部皮肤上做一条水平正中切口，以暴露腹肌。然后通过腹肌做第二条水平正中切口，以暴露内脏器官。接下来，暴露胸骨。

用止血钳固定并向上牵拉以暴露肝脏和门静脉。使用16号血管造影导管，将导管插入门静脉，并将含有肝素化生理盐水的60毫升注射器连接至血管造影导管。然后在下腔静脉和腹主动脉处做切口以进行排气。

通过门静脉将全部生理盐水冲洗通过。随后，在膈肌上做一水平切口，接着在胸骨两侧的肋骨近端做切口，以暴露胸腔。将心脏从胸腔中取出，并立即置于含有冰上生理盐水的培养皿中。

然后辨认主动脉弓，用止血钳夹住，并清除残留的结缔组织以暴露降主动脉。使用解剖显微剪刀，在降主动脉壁上做一水平切口，切至管壁半周，插入14号血管造影导管。在套管上方用缝线固定导管，并松开止血钳。

首先，将蠕动泵的流速设定为1.0毫升每分钟。在将分离的大鼠心脏和插管连接到系统之前，先称量其质量。将插管连接至系统的接头，并启动计时器。

当心脏完全收缩后，以每分钟0.2毫升的幅度逐步增加流量，同时监测压力。当达到目标压力或流量达到最低3.5毫升/分钟时，停止增加流量。对于30至35毫米汞柱之间的压力，将流量设定为4.5毫升/分钟。

然后启动腺苷注射泵。使用鲁尔锁接头将导管连接至压力传感器，并将整个装置固定在夹具架上。随后，将一个小型乳胶气球连接到带有锥形尖端的球囊导管上。

使用连接在压力传感器顶端的注射器，向球囊导管和压力传感器内注入约 200 µL 生理盐水。然后借助血压计校准压力传感器。接下来，在左心房上方做一个小的横向切口。

通过回抽压力传感器顶部的注射器并将其插入左心室来放空气囊。随后，开始数据采集，并充气气囊直至舒张压显示为零毫米汞柱。心率与灌注压之间建立了明确的相关性。

值得注意的是，在整个研究过程中，除初始测量值外，高压心脏的心率均显著高于低压心脏。两组之间的左心室脉压（LVPP）存在显著差异，高压心脏在所有时间点的LVPP均具有统计学意义上的升高。随着时间推移，高压心脏功能呈进行性下降，在两小时后LVPP明显降低。

相反，低压心脏在整个灌注过程中左心室舒张末期压力（LVPP）保持稳定。与低压心脏相比，高压心脏表现出更优的心脏功能。