Name: 基于量子点纳米珠的荧光侧向层析免疫测定 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-06-28T14:40:00.000+00:00
Duration: 7 min 13 s
Description: 学习基于量子点纳米珠的荧光侧向层析免疫测定方法，用于疾病生物标志物的快速检测。该方法操作简便，可在15分钟内获得高灵敏度的定性及定量结果，为临床即时诊断提供可靠工具。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

本工作由上海市科学技术委员会项目（STCSM）（22S31902000）和上海皮肤病医院临床研究孵化计划（编号：lcfy2021-10）资助。

本研究经上海皮肤病医院机构审查委员会批准（编号：2020-15）。所有涉及人血样本的实验操作均在生物安全二级实验室中进行。本研究所用试剂与设备的详细信息列于下文 材料表.
1. 量子点纳米微球的制备
注意：量子点纳米珠的合成采用乳液-溶剂蒸发法，油相与水相的比例为1:5。微乳液的制备如下 通过 超声处理后，通过溶剂（氯仿）蒸发使纳米微珠固化。使用氢氧化钠催化纳米微珠表面酸酐基团的水解，将其转化为羧基。
<ol>
	<li>油相和水相溶液的制备
	<ol>
		<li>制备1 mL油相：0.4 mL聚（苯乙烯-共-马来酸酐）（PSMA）溶液（50 mg/mL），0.1 mL量子点（QDs）溶液（100 mg/mL），用氯仿补足体积至1 mL。</li>
		<li>制备5 mL水相：十二烷基硫酸钠（SDS）水溶液（0.5 wt %）。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>乳液的制备与固化
	<ol>
		<li>将1 mL油相和5 mL水相加入一个样品瓶（15 mL）中，并将样品瓶置于磁力搅拌器上。开启磁力搅拌器电源。</li>
		<li>待油相和水相完全混合后，立即将样品瓶转移至程序设定的超声处理仪中（60 s，3 s脉冲后接3 s暂停，50%振幅），并开启电源。</li>
		<li>观察超声处理后的溶液。初始呈深红色的溶液转变为具有红调的乳光相态。</li>
		<li>将样品瓶&#160;重新放回磁力搅拌器，在室温下持续搅拌过夜。氯仿逐渐挥发，乳液固化形成复合纳米微球。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>纳米微球的表面修饰
	<ol>
		<li>向纳米微球悬浮液中加入0.1 mL 0.1 mM氢氧化钠溶液，反应1 h。纳米微球表面的酸酐基团水解为羧基。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>纳米微球的纯化
	<ol>
		<li>关闭磁力搅拌器，将固化的纳米微球转移至离心管中。在室温下以13523 × g 离心10 min，弃去上清液。</li>
		<li>向沉淀中加入初始体积的去离子水，盖上管盖，将其浸入超声水浴中，并保持浸没状态直至沉淀完全分散。</li>
		<li>重复步骤1.4.1–1.4.2两次，最后将纳米微球转移至玻璃瓶中。4 °C保存备用。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>纳米微球的表征
	<ol>
		<li>采用透射电子显微镜（TEM）成像对量子点纳米微球的尺寸和形貌进行表征22。 
		注：通过改变量子点溶液与PSMA溶液的比例可获得不同尺寸的纳米微球。量子点纳米微球的尺寸也可通过动态光散射（DLS）测定27。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. QDNB-抗体偶联物的制备
<ol>
	<li>羧基活化
	<ol>
		<li>将100 µL已配制的QDNB（10 mg/mL）加入200 µL磷酸盐缓冲液（PB，20 mM，pH 6.0）中，然后加入6 µL EDC（20 mg/mL）。</li>
		<li>在室温下于旋转混合仪中孵育混合物30分钟。</li>
		<li>孵育结束后，在室温下以13523 × g 离心10分钟，弃去上清液。</li>
		<li>向沉淀中加入100 µL PB（20 mM，pH 6.0），盖上管盖，并将离心管浸入工作中的超声水浴中，直至沉淀完全分散。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>抗体与纳米珠的偶联
	<ol>
		<li>将100 µg抗体分散于200 µL PB（20 mM，pH 6.0）中，并将步骤2.1中获得的活化QDNB悬液加入抗体溶液中。</li>
		<li>在室温下持续旋转孵育混合物30分钟。在室温下以6010 × g 离心5分钟以去除未结合的抗体，然后小心弃去上清液。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>纳米珠的封闭
	<ol>
		<li>向残余物（步骤2.2.2中获得）中加入200 µL 1%酪蛋白溶液（溶于20 mM PB缓冲液，pH 7.4），盖上管盖，并将离心管浸入工作中的超声水浴中，直至残余物完全分散。</li>
		<li>在室温下持续旋转孵育混合物2小时。 
		注：此步骤的目的是封闭QDNB表面未反应的位点。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>偶联物的保存
	<ol>
		<li>向混合物中加入100 µL保存液（20 mM PB缓冲液，pH 7.4，1% BSA，5%海藻糖，6%蔗糖，0.1% S9，pH 7.4），于4 °C保存以供后续使用。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. 侧向流动免疫测定试纸条的制备
注意：免疫层析试纸条由硝酸纤维素（NC）膜、样品垫、结合物垫、吸收垫和聚氯乙烯（PVC）板组成（图1）。所有溶液应现配现用。建议在湿度可控的洁净室中制备侧向流动免疫分析试纸条。
<ol>
	<li>NC 膜的制备
	<ol>
		<li>配制检测线（T 线）和质控线（C 线）包被液：用 PB 缓冲液将 CRP 捕获抗体和羊抗兔 IgG 稀释至终浓度为 1 mg/mL。</li>
		<li>将 PVC 板妥善放置，并移除距 PVC 板边缘 25 mm 处的保护纸。将 NC 膜沿剩余保护纸的下边缘对齐并粘贴至 PVC 板上。</li>
		<li>以 1 µL/cm 的点样速率将 T 线和 C 线包被液点样到 NC 膜上，确保其距离上边缘 20 mm，形成一条宽度为 1 mm 的检测线。</li>
		<li>将 NC 膜置于湿度低于 30%、温度范围为 18–26 °C 的条件下干燥，干燥时间应不少于 24 小时。 
		注意：确保 NC 膜的上下边缘与相邻区域的对应边缘对齐。不得用手直接接触 NC 膜。此步骤中的湿度应控制在 45% 至 65% 范围内。在进行下一步前，T 线包被液、C 线包被液和 NC 膜应平衡至相同温度。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>结合物垫的制备
	<ol>
		<li>将结合物垫浸入结合物垫处理液（20 mM PB 缓冲液，pH 7.4，1% BSA）中。</li>
		<li>将浸透的结合物垫置于干燥烘箱中，在室温下过夜干燥。</li>
		<li>将修饰后的结合物垫轻轻粘附到 PVC 板上。</li>
		<li>用保存液（20 mM PB 缓冲液，pH 7.4，1% BSA，5% 海藻糖，6% 蔗糖，0.1% S9，pH 7.4）稀释已制备的 QDNB-抗体结合物溶液。</li>
		<li>以 1 µL/cm 的点样速率将 QDNB-抗体结合物溶液点样到结合物垫上，并将结合物垫干燥 24 小时。 
		注意：具体的稀释比例应根据检测目标进行调整。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>样品垫的制备
	<ol>
		<li>将样品垫浸入样品垫处理液（20 mM PB 缓冲液，pH 7.4，1% BSA，5% 海藻糖，6% 蔗糖，0.1% S9，pH 7.4）中。</li>
		<li>将浸透的样品垫放入干燥烘箱（45 °C）中干燥 24 小时。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>卡片组装及切割成条
	<ol>
		<li>如图 1所示，依次将吸水纸（吸水垫）、结合物垫和样品垫放置在带有 NC 膜的 PVC 板上。</li>
		<li>将卡片切割成宽度为 3.8 mm 的试纸条。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>试纸条的包装
	<ol>
		<li>将试纸条装入塑料卡壳中，并密封含有干燥剂的铝箔袋。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
4. 检测操作与定性评估
注意：涉及人血样本的操作建议在生物安全二级实验室中进行。人血浆样本来自临床实验室（来源于去身份化的人类受试者）。通常使用EDTA真空采血管采集人血，并按照标准方案34分离血浆。在室温下以3,000 × g离心10分钟以分离血浆。用移液器收集上层黄色血浆，置于1.5 ml离心管中，于-80 °C保存备用。
<ol>
	<li>取10 µL血浆样本或校准液，加入含0.1% Tween 20的1 mL PBS缓冲液中。然后，将100 µL稀释后的样本转移至试纸条的样品垫上。</li>
	<li>反应15分钟后，在紫外光照射下观察T线和C线的荧光信号，以获得定性结果。</li>
	<li>将试纸条插入荧光侧向流动检测仪，获取荧光强度用于定量分析。 
	注：本示例采用夹心免疫分析法35,36；一条红线（对照线）表示阴性结果，两条红线（检测线和对照线）表示阳性结果。若对照线未出现，则表明该检测无效。</li>
</ol>

Quantum Dot Nanobeads for Enhanced Sensitivity in Biomarker Detection

<ol><li>de Puig, H., Bosch, I., Gehrke, L., Hamad-Schifferli, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenges+of+the+nano-bio+interface+in+lateral+flow+and+dipstick+immunoassays%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Challenges of the nano-bio interface in lateral flow and dipstick immunoassays.</a> Trends Biotechnol. 35 (12), 1169-1180 (2017).</li>
<li>Miller, B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spin-enhanced+nanodiamond+biosensing+for+ultrasensitive+diagnostics%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Spin-enhanced nanodiamond biosensing for ultrasensitive diagnostics.</a> Nature. 587 (7835), 588-593 (2020).</li>
<li>Gao, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platinum-decorated+gold+nanoparticles+with+dual+functionalities+for+ultrasensitive+colorimetric+in+vitro+diagnostics%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Lett%22%5BJournal%5D)">Platinum-decorated gold nanoparticles with dual functionalities for ultrasensitive colorimetric in vitro diagnostics.</a> Nano Lett. 17 (9), 5572-5579 (2017).</li>
<li>Fan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deeply-dyed+nanobead+system+for+rapid+lateral+flow+assay+testing+of+drugs+at+point-of-care%5BTitle%5D)+AND+%22Sensors+Actuators+B+Chem%22%5BJournal%5D)">Deeply-dyed nanobead system for rapid lateral flow assay testing of drugs at point-of-care.</a> Sensors Actuators B Chem. 362, 131829(2022).</li>
<li>Garcia, V. S., Guerrero, S. A., Gugliotta, L. M., Gonzalez, V. D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+lateral+flow+immunoassay+based+on+colored+latex+particles+for+detection+of+canine+visceral+leishmaniasis%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Trop%22%5BJournal%5D)">A lateral flow immunoassay based on colored latex particles for detection of canine visceral leishmaniasis.</a> Acta Trop. 212, 105643(2020).</li>
<li>You, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Household+fluorescent+lateral+flow+strip+platform+for+sensitive+and+quantitative+prognosis+of+heart+failure+using+dual-color+upconversion+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Household fluorescent lateral flow strip platform for sensitive and quantitative prognosis of heart failure using dual-color upconversion nanoparticles.</a> ACS Nano. 11 (6), 6261-6270 (2017).</li>
<li>Ye, Z., Tan, M., Wang, G., Yuan, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+fluorescent+europium+chelate-doped+silica+nanoparticles%3A+preparation%2C+characterization+and+time-resolved+fluorometric+application%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mater+Chem%22%5BJournal%5D)">Novel fluorescent europium chelate-doped silica nanoparticles: preparation, characterization and time-resolved fluorometric application.</a> J Mater Chem. 14 (5), 851(2004).</li>
<li>Xu, Y., Li, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+fluorescent+labeling+of+silica+nanoparticles+with+lanthanide+chelates+for+highly+sensitive+time-resolved+immunofluorometric+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Chem%22%5BJournal%5D)">Multiple fluorescent labeling of silica nanoparticles with lanthanide chelates for highly sensitive time-resolved immunofluorometric assays.</a> Clin Chem. 53 (8), 1503-1510 (2007).</li>
<li>Zhang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+detection+sensitivity+by+oriented+bioconjugation+of+antibodies+to+quantum+dots+with+a+flexible+spacer+arm+for+immunoassay%5BTitle%5D)+AND+%22RSC+Adv%22%5BJournal%5D)">Improving detection sensitivity by oriented bioconjugation of antibodies to quantum dots with a flexible spacer arm for immunoassay.</a> RSC Adv. 6 (55), 50119-50127 (2016).</li>
<li>Li, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+and+sensitive+detection+of+protein+biomarker+using+a+portable+fluorescence+biosensor+based+on+quantum+dots+and+a+lateral+flow+test+strip%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Rapid and sensitive detection of protein biomarker using a portable fluorescence biosensor based on quantum dots and a lateral flow test strip.</a> Anal Chem. 82 (16), 7008-7014 (2010).</li>
<li>Wang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescent+strip+sensor+for+rapid+determination+of+toxins%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Commun%22%5BJournal%5D)">Fluorescent strip sensor for rapid determination of toxins.</a> Chem Commun. 47 (5), 1574-1576 (2011).</li>
<li>Medintz, I. L., Uyeda, H. T., Goldman, E. R., Mattoussi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantum+dot+bioconjugates+for+imaging%2C+labeling+and+sensing%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Mater%22%5BJournal%5D)">Quantum dot bioconjugates for imaging, labeling and sensing.</a> Nat Mater. 4 (6), 435-446 (2005).</li>
<li>Smith, A. M., Nie, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compact+quantum+dots+for+single-molecule+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Compact quantum dots for single-molecule imaging.</a> J Vis Exp. (68), e4236(2012).</li>
<li>Wang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Layer-by-layer+assembly+of+magnetic-core+dual+quantum+dot-shell+nanocomposites+for+fluorescence+lateral+flow+detection+of+bacteria%5BTitle%5D)+AND+%22Nanoscale%22%5BJournal%5D)">Layer-by-layer assembly of magnetic-core dual quantum dot-shell nanocomposites for fluorescence lateral flow detection of bacteria.</a> Nanoscale. 12 (2), 795-807 (2020).</li>
<li>Hu, J., Tang, F., Jiang, Y. Z., Liu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+screening+and+quantitative+detection+of+Salmonella+using+a+quantum+dot+nanobead-based+biosensor%5BTitle%5D)+AND+%22Analyst%22%5BJournal%5D)">Rapid screening and quantitative detection of Salmonella using a quantum dot nanobead-based biosensor.</a> Analyst. 145 (6), 2184-2190 (2020).</li>
<li>Wang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Introduction+of+graphene+oxide-supported+multilayer-quantum+dots+nanofilm+into+multiplex+lateral+flow+immunoassay%3A+A+rapid+and+ultrasensitive+point-of-care+testing+technique+for+multiple+respiratory+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Res%22%5BJournal%5D)">Introduction of graphene oxide-supported multilayer-quantum dots nanofilm into multiplex lateral flow immunoassay: A rapid and ultrasensitive point-of-care testing technique for multiple respiratory viruses.</a> Nano Res. 16 (2), 3063-3073 (2023).</li>
<li>Wang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colorimetric-fluorescent+dual-signal+enhancement+immunochromatographic+assay+based+on+molybdenum+disulfide-supported+quantum+dot+nanosheets+for+the+point-of-care+testing+of+monkeypox+virus%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Eng+J%22%5BJournal%5D)">Colorimetric-fluorescent dual-signal enhancement immunochromatographic assay based on molybdenum disulfide-supported quantum dot nanosheets for the point-of-care testing of monkeypox virus.</a> Chem Eng J. 472, 144889(2023).</li>
<li>Zheng, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dual-color+MoS2%40QD+nanosheets+mediated+dual-mode+lateral+flow+immunoassay+for+flexible+and+ultrasensitive+detection+of+multiple+drug+residues%5BTitle%5D)+AND+%22Sensors+Actuators+B+Chem%22%5BJournal%5D)">Dual-color MoS2@QD nanosheets mediated dual-mode lateral flow immunoassay for flexible and ultrasensitive detection of multiple drug residues.</a> Sensors Actuators B Chem. 403, 135142(2024).</li>
<li>Wang, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+incorporation+of+quantum+dots+into+porous+microspheres+through+a+solvent-evaporation+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Efficient incorporation of quantum dots into porous microspheres through a solvent-evaporation approach.</a> Langmuir. 28 (14), 6141-6150 (2012).</li>
<li>Li, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescent+lateral+flow+immunoassay+for+highly+sensitive+detection+of+eight+anticoagulant+rodenticides+based+on+cadmium-free+quantum+dot-encapsulated+nanospheres%5BTitle%5D)+AND+%22Sensors+Actuators+B+Chem%22%5BJournal%5D)">Fluorescent lateral flow immunoassay for highly sensitive detection of eight anticoagulant rodenticides based on cadmium-free quantum dot-encapsulated nanospheres.</a> Sensors Actuators B Chem. 324, 128771(2020).</li>
<li>Gao, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rational+design+of+dendritic+mesoporous+silica+nanoparticles%27+surface+chemistry+for+quantum+dot+enrichment+and+an+ultrasensitive+lateral+flow+immunoassay%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Appl+Mater+Interfaces%22%5BJournal%5D)">Rational design of dendritic mesoporous silica nanoparticles' surface chemistry for quantum dot enrichment and an ultrasensitive lateral flow immunoassay.</a> ACS Appl Mater Interfaces. 13 (18), 21507-21515 (2021).</li>
<li>Xu, L. D., Zhu, J., Ding, S. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunoassay+of+SARS-CoV-2+nucleocapsid+proteins+using+novel+red+emission-enhanced+carbon+dot-based+silica+spheres%5BTitle%5D)+AND+%22Analyst%22%5BJournal%5D)">Immunoassay of SARS-CoV-2 nucleocapsid proteins using novel red emission-enhanced carbon dot-based silica spheres.</a> Analyst. 146 (16), 5055-5060 (2021).</li>
<li>Tao, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SARS-Cov-2+Spike-S1+antigen+test+strip+with+high+sensitivity+endowed+by+high-affinity+antibodies+and+brightly+fluorescent+QDs%2Fsilica+nanospheres%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Appl+Mater+Interfaces%22%5BJournal%5D)">SARS-Cov-2 Spike-S1 antigen test strip with high sensitivity endowed by high-affinity antibodies and brightly fluorescent QDs/silica nanospheres.</a> ACS Appl Mater Interfaces. 15 (23), 27612-27623 (2023).</li>
<li>Wang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+an+ultrasensitive+fluorescent+immunochromatographic+assay+based+on+multilayer+quantum+dot+nanobead+for+simultaneous+detection+of+SARS-CoV-2+antigen+and+influenza+A+virus%5BTitle%5D)+AND+%22Sensors+Actuators+B+Chem%22%5BJournal%5D)">Development of an ultrasensitive fluorescent immunochromatographic assay based on multilayer quantum dot nanobead for simultaneous detection of SARS-CoV-2 antigen and influenza A virus.</a> Sensors Actuators B Chem. 345, 130372(2021).</li>
<li>Chen, L., Chen, C., Li, R., Li, Y., Liu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CdTe+quantum+dot+functionalized+silica+nanosphere+labels+for+ultrasensitive+detection+of+biomarker%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Commun%22%5BJournal%5D)">CdTe quantum dot functionalized silica nanosphere labels for ultrasensitive detection of biomarker.</a> Chem Commun. 19, 2670-2672 (2009).</li>
<li>Chu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+method+for+preparing+quantum+dot+nanospheres+with+narrow+size+distribution%5BTitle%5D)+AND+%22Nanoscale%22%5BJournal%5D)">A novel method for preparing quantum dot nanospheres with narrow size distribution.</a> Nanoscale. 2 (4), 542-547 (2010).</li>
<li>Zhang, P., Lu, H., Chen, J., Han, H., Ma, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simple+and+sensitive+detection+of+HBsAg+by+using+a+quantum+dots+nanobeads+based+dot-blot+immunoassay%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">Simple and sensitive detection of HBsAg by using a quantum dots nanobeads based dot-blot immunoassay.</a> Theranostics. 4 (3), 307-315 (2014).</li>
<li>Ouyang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+on-site%2C+ultra-sensitive%2C+quantitative+sensing+method+for+the+determination+of+total+aflatoxin+in+peanut+and+rice+based+on+quantum+dot+nanobeads+strip%5BTitle%5D)+AND+%22Toxins%22%5BJournal%5D)">An on-site, ultra-sensitive, quantitative sensing method for the determination of total aflatoxin in peanut and rice based on quantum dot nanobeads strip.</a> Toxins. 9 (4), 137(2017).</li>
<li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+ciprofloxacin+on-site+rapid+detections+using+quantum+dot+microsphere+based+immunochromatographic+test+strips%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chem%22%5BJournal%5D)">Quantitative ciprofloxacin on-site rapid detections using quantum dot microsphere based immunochromatographic test strips.</a> Food Chem. 335, 127596(2021).</li>
<li>Chen, Y., Fu, Q., Xie, J., Wang, H., Tang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+high+sensitivity+quantum+dot-based+fluorescent+quenching+lateral+flow+assay+for+the+detection+of+zearalenone%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Bioanal+Chem%22%5BJournal%5D)">Development of a high sensitivity quantum dot-based fluorescent quenching lateral flow assay for the detection of zearalenone.</a> Anal Bioanal Chem. 411 (10), 2169-2175 (2019).</li>
<li>Zhang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SARS-CoV-2+detection+using+quantum+dot+fluorescence+immunochromatography+combined+with+isothermal+amplification+and+CRISPR%2FCas13a%5BTitle%5D)+AND+%22Biosens+Bioelectron%22%5BJournal%5D)">SARS-CoV-2 detection using quantum dot fluorescence immunochromatography combined with isothermal amplification and CRISPR/Cas13a.</a> Biosens Bioelectron. 202, 113978(2022).</li>
<li>Zhong, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CRISPR-based+quantum+dot+nanobead+lateral+flow+assay+for+facile+detection+of+varicella-zoster+virus%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Microbiol+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">CRISPR-based quantum dot nanobead lateral flow assay for facile detection of varicella-zoster virus.</a> Appl Microbiol Biotechnol. 107 (10), 3319-3328 (2023).</li>
<li>Liu, Y., Xiao, M., Xu, N., Yang, M., Yi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Point-of-need+quantitation+of+2%2C4-dichlorophenoxyacetic+acid+using+a+ratiometric+fluorescent+nanoprobe+and+a+smartphone-based+sensing+system%5BTitle%5D)+AND+%22Sensors+Actuators+B+Chem%22%5BJournal%5D)">Point-of-need quantitation of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid using a ratiometric fluorescent nanoprobe and a smartphone-based sensing system.</a> Sensors Actuators B Chem. 367, 132083(2022).</li>
<li>McCafferty, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+collection+processing+and+handling+for+plasma+and+serum+proteomics+BT+-+Serum%2Fplasma+proteomics%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Blood collection processing and handling for plasma and serum proteomics BT - Serum/plasma proteomics.</a> Methods Mol Biol. 2628, 33-40 (2023).</li>
<li>Zhang, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+and+quantitative+detection+of+C-reactive+protein+based+on+quantum+dots+and+immunofiltration+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">Rapid and quantitative detection of C-reactive protein based on quantum dots and immunofiltration assay.</a> Int J Nanomedicine. 10, 6161-6173 (2015).</li>
<li>Hu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitive+and+quantitative+detection+of+C-reaction+protein+based+on+immunofluorescent+nanospheres+coupled+with+lateral+flow+test+strip%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Sensitive and quantitative detection of C-reaction protein based on immunofluorescent nanospheres coupled with lateral flow test strip.</a> Anal Chem. 88 (12), 6577-6584 (2016).</li>
<li>Fan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One-component+dual-readout+aggregation-induced+emission+nanobeads+for+qualitative+and+quantitative+detection+of+c-reactive+protein+at+the+point+of+care%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">One-component dual-readout aggregation-induced emission nanobeads for qualitative and quantitative detection of c-reactive protein at the point of care.</a> Anal Chem. 96 (1), 401-408 (2024).</li>
<li>Gui, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colorimetric+and+reverse+fluorescence+dual-signal+readout+immunochromatographic+assay+for+the+sensitive+determination+of+sibutramine%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Omega%22%5BJournal%5D)">Colorimetric and reverse fluorescence dual-signal readout immunochromatographic assay for the sensitive determination of sibutramine.</a> ACS Omega. 9 (6), 7075-7084 (2024).</li>
</ol>

Pengfei Zhang 是上海坤道生物技术有限公司的创始人，与该公司存在潜在的经济利益关系。

本文介绍了一种量子点纳米珠（QDNB）27的制备方法，以及利用QDNB制备荧光侧向流动免疫分析（LFIA）的方法。文中展示了对样本中C反应蛋白（CRP）进行定性和定量检测的应用。这种基于QDNB的LFIA还可用于其他疾病生物标志物25,32、食品毒素29,30、病毒16,27等多种目标物的检测。
本方案中的关键步骤是QDNB及QDNB-抗体偶联物的制备。应优化QDNB的粒径以及纳米微珠中的量子点含量，以获得在侧向流动免疫分析（LFIA）中荧光信号强且背景信号低的QDNB。捕获抗体与检测抗体配对对免疫分析至关重要，应从不同供应商中筛选出最佳匹配的抗体对。抗体与QDNB的偶联条件需要优化，包括抗体/QDNB比例、缓冲液pH值以及封闭试剂的选择。具体而言，应通过优化偶联过程中的缓冲液pH值、盐浓度和反应时间，避免QDNB和抗体发生聚集。
与其他量子点纳米微球制备方法相比，本方案具有操作简便、易于操作和高产率的优点。此外，聚合物复合纳米微球具有生物相容性，而二氧化硅纳米微球通常需要额外的聚合物表面修饰。然而，采用本方案制备的量子点纳米微球（QDNBs）的单分散性不如采用聚合物19或二氧化硅21模板纳米微球制备的产品。QDNBs的粒径通常在70 nm至200 nm之间。
基于量子点纳米球（QDNB）的侧向流动免疫分析（LFIA）试纸条的制备方法与其他荧光LFIA类似。由于量子点（QDs）具有高量子产率以及QDNB具有信号放大效应，采用本方案的QDNB基LFIA比其他基于荧光微球的LFIA（如时间分辨荧光微球和荧光素微球）更灵敏。此外，QDNB的稳定性优于传统的荧光素，使基于QDNB的LFIA具有更长的保存时间。
然而，量子点表面的镉容易与蛋白质中的巯基在水环境中发生螯合。避免使用高浓度蛋白质对于基于QDNB的侧向流动免疫分析的稳定性至关重要。镉具有毒性，在某些情况下其使用受到限制，因此需要制备具有高量子产率和稳定性的无镉量子点。
综上所述，本文提供了一种一步法制备量子点纳米微球的多功能方法，且该方法可扩展用于工业化生产。利用所制备的量子点纳米微球，构建了用于疾病生物标志物定性与定量检测的荧光侧向流动免疫分析试纸条。适用于侧向流动免疫分析的理想量子点纳米微球应为粒径较小、包载大量量子点且无荧光淬灭的纳米微球。

侧向流动免疫分析（LFIA）试纸条是现场快速检测的关键工具1,2，尤其在疫情流行期间的疾病筛查中具有重要作用。然而，传统的胶体金基LFIA试纸条检测灵敏度较低，且仅能提供定性结果3。为了提高LFIA的检测灵敏度，多种新型纳米颗粒被开发应用，包括彩色乳胶颗粒4,5、上转换荧光纳米颗粒6、时间分辨荧光微球7,8以及量子点9,10,11。量子点（QDs）12,13，又称半导体纳米晶体，具有可调的发射波长、宽广的激发范围和高发光效率，是生物成像的理想标记物。
然而，单个量子点发出的荧光信号仍然较弱，导致免疫分析中的检测灵敏度相对较低。将大量量子点封装于微球内可实现信号放大，提高基于量子点的免疫分析的灵敏度。已有多种方法被用于将量子点封装在微球内部，例如层层自组装法14,15,16,17,18、溶胀法19,20以及二氧化硅微球封装法21,22,23,24。例如，可通过增加每个夹心免疫反应中量子点的负载量来制备量子点功能化的二氧化硅纳米球标记物25。此外，已有研究使用配备超声雾化器的喷雾干燥器制备纳米级QD-BSA纳米球26。然而，上述方法存在步骤复杂、荧光猝灭以及产率低等缺点。
在我们之前的研究27中，报道了一种通过乳液-溶剂蒸发法将量子点封装于聚合物纳米微球内的方法。该制备技术操作简便，能够保持量子点的荧光效率，确保高封装效率，并易于实现规模化生产。已有多个研究团队成功利用通过该方法制备的量子点纳米微球开发了侧向流动免疫分析试纸条，并将其应用于食品毒素检测28,29,30、传染病生物标志物检测31,32以及环境监测33等领域。
本方案介绍了量子点纳米珠（QDNB）的特定制备步骤、QDNB与抗体的偶联、基于QDNB的侧向流动免疫分析（LFIA）的制备，以及人血浆样本中C反应蛋白（CRP）的检测。

<table><tbody><tr><td>(二甲氨基)丙基-N&amp;rsquo;-乙基碳二亚胺盐酸盐</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>03450</td><td></td></tr><tr><td>吸水纸&amp;nbsp;</td><td>金碧生物技术</td><td>CH37K</td><td></td></tr><tr><td>牛血清白蛋白</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>B2064</td><td></td></tr><tr><td>酪蛋白</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C8654</td><td></td></tr><tr><td>CdSe/ZnS量子点</td><td>苏州迈世莱特科技有限公司</td><td>CdSe/ZnS-625</td><td></td></tr><tr><td>氯仿</td><td>国药集团化学试剂有限公司</td><td>10006818</td><td></td></tr><tr><td>CRP抗体</td><td>海思特生物科技</td><td>4C28</td><td></td></tr><tr><td>荧光侧向层析检测仪</td><td>苏州赫尔门斯精密仪器有限公司</td><td>FIC-H1</td><td></td></tr><tr><td>玻璃纤维垫</td><td>金碧生物技术</td><td>SB06</td><td></td></tr><tr><td>羊抗兔IgG</td><td>生工生物工程</td><td>D111018</td><td></td></tr><tr><td>硝酸纤维素膜&amp;nbsp;</td><td>Satorious</td><td>CN140</td><td></td></tr><tr><td>聚（苯乙烯-马来酸酐）共聚物&amp;nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S458066</td><td></td></tr><tr><td>兔IgG</td><td>生工生物工程</td><td>D110502</td><td></td></tr><tr><td>十二烷基硫酸钠</td><td>国药集团化学试剂有限公司</td><td>30166428</td><td></td></tr><tr><td>氢氧化钠</td><td>国药集团化学试剂有限公司</td><td>10019718</td><td></td></tr></tbody></table>

基于量子点纳米珠的荧光侧向流免疫分析法

Fluorescent Lateral Flow Immunoassay Based on Quantum Dots Nanobeads

量子点（又称半导体纳米晶体）是用于生物成像和传感的新型荧光标记物。然而，通过繁琐的纯化步骤制备的尺寸较小（约10 nm）的量子点-抗体偶联物，在使用侧向流动免疫层析试纸条检测某些痕量疾病标志物时，灵敏度有限。本文介绍了一种采用一步乳化蒸发法制备量子点纳米微球（QDNB）的方法。利用所制备的QDNB，构建了一种荧光侧向流动免疫分析方法，并以C-反应蛋白（CRP）为例检测疾病生物标志物。与单个量子点纳米粒子不同，量子点纳米微球-抗体偶联物由于在一个聚合物复合微球中包封了数百个量子点，实现了信号放大，因而作为免疫分析标记物具有更高的灵敏度。此外，QDNB较大的尺寸有利于在与抗体偶联时进行更简便的离心分离。基于QDNB的荧光侧向流动免疫层析试纸条被成功制备，可在15分钟内完成样本中CRP浓度的检测。检测结果可在紫外光照射下进行定性评估，并在15分钟内使用荧光读板仪进行定量测定。

QDNB 的制备流程如图1A所示。将含有量子点（QDs）和聚合物的氯仿油相与水相混合，通过超声处理形成微乳液。通过氯仿的缓慢蒸发使乳液固化。QDNB 的透射电子显微镜（TEM）图像见图2A。QDNB 呈球形形貌，根据 TEM 图像中 50 个 QDNB 的测量结果，其平均直径为 96 nm。在纳米珠内部可清晰观察到量子点纳米颗粒，表明封装成功。图2B 和 图2D 分别展示了 QDNB 的荧光光谱和吸收光谱。
采用碳二亚胺化学法将QDNB与抗体进行偶联，如图1B所示。使用QDNB-抗体偶联物制备基于QDNB的侧向流动免疫分析（LFIA）。LFIA的结构如图1C所示。若样本中存在C反应蛋白（CRP）抗原，QDNB-抗CRP偶联物将在检测线处富集。
如图3所示，通过将100 µL稀释后的样品加入样品孔中进行检测。反应15分钟后，可在紫外光照射下定性读取检测结果。定量结果可通过荧光试纸条读取仪获得，并利用试纸条读取仪软件中内置的校准方程计算样品浓度37,38。
<img alt="量子点合成与应用：超声处理、PSMA 化学偶联、侧向流动检测示意图。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67000/67000fig01.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="图 1"> 
图 1：基于量子点纳米珠的荧光侧向流动免疫分析示意图。 （A）量子点纳米珠（QDNB）的制备流程。（B）QDNB-抗体偶联物的原理。（C）基于 QDNB 的侧向流动免疫分析法（LFIA）检测 C 反应蛋白（CRP）的原理。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67000/67000fig01large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
<img alt="纳米颗粒透射电镜图像；光谱图；吸光度与波长关系图；光学分析。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67000/67000fig02.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="图 2"> 
图 2：QDNB 的表征。（A）QDNB 的透射电镜（TEM）图像。比例尺：100 nm。（B）QDNB 的荧光发射光谱。（C）QDNB 的吸收光谱。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67000/67000fig02large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的高清版本。</a>
<img alt="通过侧向流动测定法检测CRP；包括试纸条、浓度图、分光光度计、结果。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67000/67000fig03.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Figure 3"> 
图3：CRP侧向流动免疫分析的操作流程。（A）检测原理示意图。（B）在紫外光下，基于QDNB的LFIA试纸条对浓度范围为0–30 mg/L的CRP样本进行检测的实物照片。（C）用于结果定量的荧光读数仪。（D）定量结果的实物照片。（E）采用逻辑转换结合线性回归对C反应蛋白（CRP）进行检测。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67000/67000fig03large.jpg" target="_blank">请点击此处查看此图的放大版本。</a>

本文介绍了一种量子点纳米微球（QDNB）的制备方法，以及利用基于QDNB的侧向层析免疫检测试纸条检测疾病生物标志物的方案。检测结果可在15分钟内通过紫外光照射进行定性判读，或使用荧光试纸条读数仪进行定量测定。

量子点，也被称为半导体纳米晶体，是用于生物成像和传感的新型荧光标记物。然而，量子点-抗体……

目前，我们的研究重点是构建高质量的多功能纳米材料，并将其应用于超灵敏即时检测技术的开发。侧向流动免疫分析试纸条是即时检测中关键的快速检测工具，尤其在流行病期间的疾病筛查中具有重要作用。为了提高侧向流动免疫分析的检测灵敏度，已涌现出多种新型纳米颗粒，包括彩色乳胶颗粒、上转换荧光纳米颗粒、时间分辨荧光微球以及量子点。我们介绍了一种一步乳化蒸发法制备量子点纳米微球，并将其应用于高灵敏度检测，例如侧向荧光免疫分析。与其他制备量子点纳米微球的方法相比，该方案具有操作简便和产率高的优势。此外，这种聚合物复合纳米微球具有良好的生物相容性，而二氧化硅纳米微球通常需要额外的聚合物表面修饰才能实现类似性能。利用制备的量子点纳米珠已开发出高灵敏度的荧光侧向流动免疫分析试纸条。这些试纸条可用于在临床现场对疾病生物标志物进行定性和定量检测。这种新型检测方法可帮助医疗专业人员快速、准确地诊断疾病。首先，将 0.4 毫升苯乙烯-马来酸酐共聚物溶液与 0.1 毫升量子点溶液混合，制备 1 毫升油相。然后用氯仿补足至总体积为 1 毫升。接着，使用十二烷基硫酸钠溶液制备水相。将1毫升油相与5毫升水相加入一个样品瓶中。将样品瓶置于磁力搅拌器上并启动搅拌。待油相与水相充分混合后，立即将样品瓶转移至预设程序的超声处理装置，并开启电源。然后将小瓶放回室温下的磁力搅拌器上，持续搅拌过夜。溶剂蒸发后，向纳米微珠悬浮液中加入0.1毫升0.1毫摩尔的氢氧化钠，并使其反应一小时。首先，将100微升制备好的量子点纳米微珠加入200微升磷酸盐缓冲液中。然后加入6 µL的EDC。随后，在室温下于旋转混合仪中孵育混合物30分钟。在室温下以13,523 ×g离心10分钟，弃去上清液。接下来，向沉淀物中加入100 µL磷酸盐缓冲液。盖上管盖，并将其浸入工作中的超声水浴中，直至沉淀物完全分散。将100 µg抗体分散于200 µL磷酸盐缓冲液中，然后将活化的量子点纳米微球悬浮液加入抗体溶液中。将混合物在室温下孵育30分钟，并持续旋转。然后，在室温下以6,010×g离心5分钟以去除过量抗体，并小心弃去上清液。为封闭纳米珠，向残渣中加入200 µL的1%酪蛋白溶液。将试管盖上盖子后浸入运行中的超声水浴中，直至残留物完全分散。将混合物在室温下孵育两小时，并持续旋转。向混合物中加入100微升防腐溶液，于4摄氏度保存以供后续使用。首先，制备检测线和质控线的包被溶液。用磷酸盐缓冲液稀释C反应蛋白捕获抗体和羊抗兔免疫球蛋白G。接着，将聚氯乙烯板正确放置，并揭去距板边缘25毫米处的保护纸。将硝酸纤维素膜沿剩余保护纸的下边缘对齐并粘附于聚氯乙烯板上。将检测线和质控线包被液分别点加到硝酸纤维素膜上，确保其距离上边缘20毫米处，形成检测线。干燥时，将硝酸纤维素膜置于湿度低于30%、温度为18至26摄氏度的条件下。为制备结合垫，将结合垫浸入结合垫处理液中。然后将浸透的结合垫置于干燥烘箱中过夜干燥。用保存液稀释制备好的量子点纳米微球抗体结合物溶液，并将其滴加到结合垫上。样品垫制备时，将样品垫浸入样品垫处理液中。随后将浸透的样品垫置于45摄氏度的干燥烘箱中干燥24小时。接着，将吸水纸、结合物垫和样品垫依次放置在带有硝酸纤维素膜的聚氯乙烯板上。取10微升血浆样本或校准液，加入到含有0.1% Tween 20的1毫升PBS缓冲液中。然后将100微升稀释后的样本转移至试纸条的加样垫上。反应15分钟后，在紫外光照射下观察检测线和质控线的荧光信号，以获得定性结果。将试纸条插入荧光侧向流动分析仪中，以获取荧光强度进行定量分析。

fluorescent-lateral-flow-immunoassay-based-on-quantum-dots-nanobeads

Research

科研

JoVE Journal

Biochemistry

生物化学

基于量子点纳米珠的荧光侧向层析免疫测定

基于液滴的微流控平台有望用于高通量实验，因其能够以千赫兹速率低成本生成皮升级、自成隔室的微小反应容器。通过与快速、灵敏且高分辨率的荧光光谱方法相结合，可高效地提取、利用并整合这些系统中产生的大量信息。...

微流控液滴平台的荧光检测方法

利用Luminex公司的xMAP微球技术，我们开发了用于多种实验动物血清学监测的多重荧光免疫分析法（MFIA）。MFIA是一种悬浮微阵列技术，其中抗原、组织对照或免疫球蛋白被共价连接至带有颜色编码的聚苯乙烯微球上。本文介绍了MFIA检测方法以及若干常见问题的解决方案。...

多重荧光免疫测定检测方法及故障排除

本视频介绍了一种使用荧光磁性微珠或微球的免疫分析技术，该微珠或微球偶联了不同抗原，可同时检测血清样本中的多种抗体亚型。该检测方法有助于了解感染期间或接种疫苗后的血清学转化过程。...

多分析物免疫珠检测：一种基于流式技术的免疫分析方法，用于同时检测人血清样本中的多种抗体亚型

本视频展示了一种基于磁性纳米颗粒的免疫分析微流控系统。该检测系统采用了一种在其通道内集成磁性捕获结构的微流控装置。将预先形成的免疫复合物——由抗原包被的磁性纳米颗粒与一抗及辣根过氧化物酶标记的二抗结合而成——引入通道中。在外加磁场作用下，免疫复合物被截留在多孔磁性捕获结构中。通过使用一种在过氧化物酶催化下可发出荧光的荧光底物，在显微镜下对被捕获的免疫复合物进行检测。...

基于磁性纳米颗粒的微流控芯片免疫分析法

来源：Rhea Kang1, Gabby Mora1, Sherry Dunbar11Luminex, A DiaSorin Company,...

使用染料标记的磁性微球进行多重定量细菌检测

在液滴微流控中，多色荧光检测通常需要使用体积庞大且结构复杂的基于倒置荧光显微镜的检测系统。本文介绍一种紧凑且模块化的多色检测方案，该方案利用光纤阵列通过单个光电探测器对采集的多色数据进行时间编码。...

使用光纤实现液滴微流控的多色荧光检测

目前用于检测寨卡病毒、基孔肯雅病毒和登革病毒的多重诊断方法需要复杂的样品制备过程和昂贵的仪器设备，难以在资源有限的环境中应用。我们展示了一种基于等温扩增技术并结合靶标特异性链置换探针的诊断方法，可高灵敏度、高特异性地检测并区分这些病毒。...

基于多重等温扩增的诊断平台用于检测寨卡病毒、基孔肯雅病毒和登革病毒1型

采用一种用于基于微球的多重检测的流式分析系统，该系统提供双报告信号读出，用于开发多重血清学和抗体中和检测方法，可同时检测SARS-CoV-2的中和性IgG和IgM抗体。...

一种用于多重微球流式分析系统的快速、多重双报告基因IgG和IgM SARS-CoV-2中和检测方法

基于膜的侧向流动免疫层析试纸条（ICSs）是用于低成本自我诊断的实用工具，已有效应用于毒素、...

用于小分子化合物快速定量检测的侧向流动免疫层析试纸条的开发

微流控技术是开发诊断检测方法的有力工具。然而，该技术通常需要昂贵的设备和材料，以及繁琐的制备和操作步骤。本文详细描述了一种丙烯酸微流控装置的制备方案，可用于低成本且易于使用的磁性微纳米粒子免疫分析。...

用于磁性纳米颗粒免疫分析的阶梯式微流控丙烯酸装置的计算机数控微铣削

针对紧迫的登革热诊断需求，本文介绍了一种与智能手机应用程序集成的基于纸张的登革热NS1抗原检测装置（DEN-NS1-PAD），可用于定量临床血清/血液样本中的登革热NS1抗原浓度。该创新技术有助于在各类医疗环境中进行临床决策，即使在资源有限的地区也能提升登革热的管理水平。...

便携式纸质免疫分析法结合智能手机应用程序用于登革病毒NS1抗原的比色与定量检测

学习基于量子点纳米珠的荧光侧向层析免疫测定方法，用于疾病生物标志物的快速检测。该方法操作简便，可在15分钟内获得高灵敏度的定性及定量结果，为临床即时诊断提供可靠工具。

基于量子点纳米珠的荧光侧向流免疫分析法

探索更多视频