优化小鼠尿动力学技术以提高准确性

本研究的目的是改进尿动力学技术，以提高尿液测量的准确性。准确测量清醒状态下的尿道参数对于理解下尿路功能障碍至关重要，尤其是在神经源性膀胱、创伤后脊髓损伤等情况下。我们开发了一种独特的方法，利用氰基丙烯酸酯粘合剂在尿道外口及腹部周围建立防水皮肤屏障，防止尿液被吸收，从而确保排尿量的精确测量。

我们将使用这种更精确的检测方法来评估脊髓损伤动物模型以及其他神经退行性疾病中的尿液功能。首先，剪取一段30厘米长的聚乙烯PE 30管。将25号针头约四分之三的部分小心插入管子的一端。

准备一支1毫升注射器，用无菌0.9%氯化钠溶液充满，并连接至25号针头。然后缓慢注入生理盐水，检查针头是否具有良好的圆形尖端，且针头两端无泄漏。准备两根钢丝，每根长20厘米。

然后将一根25号针头插入导线的一端。使用焊料将引脚连接到带条纹导线的另一端。首先，用胶带固定麻醉动物的四肢。

使用电动剃须刀剃除下腹部及尿道口周围的毛发。在手术显微镜下，使用直头钝性梅岑鲍姆剪刀在腹盆部皮肤正中线处做一个1至2厘米的切口。沿正中线切开筋膜和肌肉，通过切口暴露膀胱。

当通过切口可见膀胱时，根据需要牵开周围的器官或组织，以获得清晰的手术视野。然后抓住膀胱顶部，使用带圆锥形针头的5/0不可吸收单丝缝线缝置荷包缝合线。使用显微剪刀在荷包缝合线内做一个小的膀胱造口，并打孔直至尿液流出。

现在，握住导管的圆头端，将其穿过孔洞。当导管尖端穿过孔洞后，用荷包缝合法将缝线围绕导管结扎。随后，轻柔地向外牵拉导管，直至在缝线处可触及导管尖端。

然后从导管的另一端缓慢注入1毫升生理盐水以扩张膀胱，并检查导管周围是否有渗漏。当生理盐水从尿道流出后，回抽生理盐水以解除膀胱的压力。使用手术剪将腹部切口向上延伸至盆底。

沿着膀胱方向，移动肌肉和膜性结构至阴部管，定位尿道及尿道外括约肌。使用带有电极的针头，在尿道外口两侧距其1厘米处穿刺皮肤。然后用镊子小心夹住钩状针尖，轻柔地将针头从皮肤中抽出。利用电极尖端，仔细在两侧钩住尿道外括约肌。

使用3/0非吸收性单丝缝线缝合骨盆和腹部的肌肉及皮肤。为固定电极位置，将少量氰基丙烯酸酯胶水涂抹于电极穿出皮肤的部位。随后，使用0.5至10微升的微量移液器吸取加速液，以干燥胶水。

然后加入促凝液以确保粘合剂发生适当的粘附反应。准备一个倒置的聚苯乙烯称量皿，长、宽、深均为4.5厘米。将其裁剪成底边为4厘米的三角形，以便将小鼠的尿道外口置于该空间内。

将一次性基底模具置于尿液收集区域下方。然后将小鼠重新置于俯卧位，并小心地将其移至配备有气体麻醉面罩的定制板上。确保尿道外口准确地位于凹槽内。

用胶带轻轻固定小鼠的头部和四肢，并将培养皿置于加热垫上，直至小鼠完全恢复意识。首先，在麻醉的小鼠体内植入膀胱导管和尿道外括约肌（EUS）电极。在对小鼠皮肤进行防水处理后，准备进行尿动力学实验操作。

确保小鼠已完全从麻醉中恢复，并全程监测其呼吸功能。然后取一支 20 毫升注射器，用室温的无菌 0.9% 氯化钠溶液充满。将注射器固定在输液泵上，并将输液速度设置为 0.01 毫升/分钟。

现在将注射器通过PE 30管连接至三通接头的一侧。将膀胱导管连接至三通接头的另一侧，并连接至压力传感器。将压力传感器固定在与小鼠膀胱同一水平的位置。

然后将一根接地线钩连接至皮肤，另一根连接至电极连接点。在软件中记录压力。启动软件后，检测膀胱内压力和外尿道括约肌的肌电图信号。

保存样品名称并设置时间。最后，启动泵注并记录信号。