使用旋转纹身机对Xenopus laevis进行纹身标记的方法

我们的研究重点是利用非洲爪蟾卵提取物和支撑脂双层来研究细胞皮层的结构。我们致力于阐明细胞皮层内动态细胞骨架模式的调控机制，以及这些模式如何支持细胞分裂等基本细胞功能。本方案概述了一种有效且安全的非洲爪蟾（Xenopus laevis）标记方法。

这种方法使研究人员能够追踪遗传谱系和实验重复样本，并监测动物健康状况。纹身是一种经济有效的两栖动物永久标记技术，与其他永久性方法（如皮肤移植或标签）相比，其侵入性要小得多。

它也比定性方法（如照片或模式识别）更可靠。首先，将纹身枪和脚踏板连接到电源上，并将脚踏板放置在工作台面下方。

组装纹身枪时，使用六角扳手松开握把上的螺丝。将塑料尖端完全插入握把内，然后拧紧螺丝以固定。接着，将金属管从握把后部插入至其长度的一半，边调整长度边拧紧螺丝。

将纹身针从手柄后部插入，固定在手柄前端的塑料尖端内。将针的后部和金属管穿过管夹。调整金属管位置后，用手拧紧管夹，直至其无法移动。

取下黑色O型圈，将针头钩到转子臂上，然后重新装上O型圈。接下来，在电源上设置所需的电压。电源接通后，踩下脚踏板以检查仪器是否正常工作。

纹身前，将塑料墨水盒装入黑色纹身墨水至约四分之三满。开始时，准备好纹身所需的设备。将麻醉后的青蛙仰卧放置在干燥的未漂白纸巾上。

使用干燥的无绒布擦拭青蛙胸部，清除水分和黏液。然后用手指找到青蛙胸部中央的胸骨，用非惯用手将皮肤绷紧。将组装好的纹身枪垂直于工作台面放置，并将针头浸入墨水中。

保持枪身垂直，将针尖压在青蛙皮肤上，然后踩下脚踏板。在均匀施压的同时，在青蛙皮肤上划线。如果针头卡住，用擦拭纸清除针头上的多余墨水或皮肤碎屑。

如有必要，使用对蛙类安全的水和擦拭布清除蛙胸部多余的墨水，然后用干燥的擦拭布吸去水分。持续在同一区域印染，直至擦去多余墨水后仍能保留清晰、深色的数字。用10至15升新鲜的蛙类安全水注满容器，并加入一块泡沫塑料浮岛，为蛙提供一个不会溺水的苏醒表面。

用对青蛙安全的水浸湿一张纸巾，将其平铺在泡沫塑料岛上。接着，将青蛙腹部朝下放在纸巾上，使其头部朝向水面。将纸巾的一半折过来覆盖在青蛙的后半部分，然后用手掌舀水，润湿青蛙的上半身。

24小时后，当纹身部位愈合，将青蛙放回其长期饲养装置中。在纹身的青蛙中，100%在纹身后立即可见纹身标记，100%在纹身后24小时仍可见，91%在纹身后四个月仍可见。