建立模拟性别确认激素治疗的大鼠模型

我们的研究建立了动物模型，以模拟跨性别个体的性别肯定激素治疗，即对跨性别男性使用睾酮，对跨性别女性使用雌激素联合抗雄激素治疗。我们正在探究接受此类治疗的个体对环境化学物质的易感性是否与一般人群相当，以及激素治疗是否存在长期副作用。该模型在其领域内具有独特性，因为目前尚缺乏可用于评估接受激素治疗的跨性别人群对化学物质潜在差异性易感性及其副作用的数据和工具。

我们研究中的一个重要发现是利用性别特异性的肝脏CPS作为评估激素治疗效果的标志物。这一方法在本研究中首次建立，为验证模型的准确性和有效性提供了一个有价值的工具。

本方案旨在解决当前对激素治疗长期效应认知不足的问题。同时，本研究还探讨日常接触的食物和环境化学物质是否会随着时间的推移与激素治疗产生相互作用或改变其治疗效果。

未来，我们将探索该模型是否适用于长期测试，并将研究其他生物标志物，例如精细的行为学检测，以更准确地评估治疗效果。

[指导教师] 首先捏起并提起注射部位的皮肤，以注射溶解于芝麻油中的睾酮，或雌二醇联合醋酸环丙孕酮。将1毫升注射器的针头平行于动物背部刺入。当针头进入体内后，根据实验模型，缓慢注入100微升睾酮或200微升雌二醇联合醋酸环丙孕酮。给药两周后，将每只麻醉的大鼠仰卧置于加热垫上。接着，准备一支5毫升注射器，安装21号针头，并确保排尽其中的空气。用手指定位心脏位置。轻轻清洁胸壁，将针头垂直于身体，在屈曲肘部对齐的位置、第五与第六肋骨之间，小心刺入侧胸壁。当针头到达心室时，血液将通过毛细作用进入注射器。缓慢且持续地回抽注射器活塞，直至血液被抽出。处死后，将每只动物仰卧放置于解剖台上，前肢朝上，后肢朝下。用大头针固定四肢，然后在动物腹侧表面喷洒消毒液，以备解剖。使用剪刀从耻骨沿中线向上腹部剪开。从腹中线切口处，沿两侧后肢内侧表面各作一横向切口，暴露腹腔脏器。在雄性大鼠中，切除位于腹腔内阴囊鞘膜内的睾丸。按压阴囊鞘膜以确保睾丸突出，然后轻柔抓取。使用镊子夹住脏器脂肪，再小心将睾丸从脏器组织上剪下。在将睾丸储存于Bois溶液进行组织病理学分析前，称量其重量。在雌性大鼠中，轻柔抓取子宫。在两侧子宫角末端识别卵巢，并将其从周围内脏脂肪组织中剪离。切除后称量卵巢重量。接着，用镊子夹住肝脏，确保其不破裂。用镊子夹住剑突，用剪刀完全剪断膈肌。用剪刀将肝脏与膈肌分离。用镊子提起剑突，将肝脏从腹腔中取出。切除后称量肝脏重量，并妥善保存。使用剪刀沿动物颈部垂直剪开。去除皮肤和肌肉组织，暴露气管，甲状腺即位于此处。轻柔修剪气管两端，以分离甲状腺。切除睾丸后，抓取附着于睾丸后缘并包埋于阴囊内的附睾。为采集精液，使用剪刀去除右侧附睾尾部的脂肪和结缔组织，进行清洁。将附睾尾部分离出来，放入含有1毫升DMEM的培养皿中。用剪刀剪碎附睾尾部，使用移液枪轻轻吹打内容物，促进精子释放。随后，将收集的液体转移至15毫升离心管中，并用DMEM定容至10毫升，使稀释倍数达到1:10。吹打混匀，制成悬浮液。轻柔振荡后，取10微升悬浮液加入血细胞计数板（Neubauer计数室）中进行计数。