Name: 用于评估小鼠模型中伤口闭合动力学的数字平面测量法 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-10T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 56 s
Description: 学习数字平面测量法评估小鼠模型中的伤口闭合动力学。该方法通过标准化成像条件减少测量变异性，提高临床前伤口研究的准确性和可重复性，为伤口愈合机制研究提供可靠数据支持。

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作者感谢国家人文、科学与技术理事会（CONAHCyT，CVU：933600）提供的资助，以及国家核研究所在国家放射性药物研发实验室（LANIDER-ININ）给予的支持。此外，&#160;图2&#160;的绘制得到了BioRender软件（2020年）的协助，该软件可在BioRender.com/p67z056获取。

所有涉及实验小鼠的操作程序均依照墨西哥官方标准（NOM-062-ZOO-1999）中关于实验动物管理和护理的伦理规范和规定进行。本研究方案已由国家核能研究所（ININ）实验动物护理与使用内部委员会（CICUAL）审查并批准，批准编号为 CICUAL-01-23。本研究使用了4只10周龄雄性CD1小鼠，体重范围为28–32 g。所有动物在品系、年龄、性别和体重方面均保持一致，以确保实验结果的均一性，减少变异性。所用试剂和设备的详细信息见材料表。
1. 用于获取宏观图像的拍照装置构建
注意：使用授权的 SolidWorks 软件（版本 2015）设计了一个摄影箱，以消除外部光源的影响。该摄影箱采用一英寸厚的白色铝型材构建，为一个 40 cm × 40 cm 的立方体。该立方体由三个部分依次组装而成：顶板、侧墙和底板（图 1A）。
<ol>
	<li>屋顶结构 
	注意：屋顶被划分为前缘（A）、后缘（B）以及两侧边缘（C 和 D），以进行定位（图 1B）。
	<ol>
		<li>在屋顶侧边缘（C 和 D）内侧固定一条带槽的铝制型材（设计用于固定玻璃），尺寸为宽 1.5 cm、厚 2.51 cm、长 34.9 cm（图 1B）。</li>
		<li>在每条屋顶型材的槽口中放置一块长 34.5 cm、宽 13 cm 的矩形铝板，铝板中心带有聚乙烯材料（见 图 1C 中的板 1 和板 2），以实现沿两个型材槽口的滑动。</li>
		<li>使用双面胶带将一根长 20 cm、色温范围为 2500–9000 K 的 RGB LED 灯管以 45° 角安装在板 1 的底边下侧（图 1C）。</li>
		<li>在屋顶板 1 和板 2 上安装一块尺寸为 32 cm × 12 cm 的矩形泡沫板，其中心设有直径为 7.82 cm 的圆形切口，以便安装相机镜头（图 1C）。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>底板结构
	<ol>
		<li>在底板区域的型材上方放置一块 40 cm × 40 cm 的方形白色泡沫板。从泡沫板每个角裁去边长为 2.54 cm 的正方形（图 1E）。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>侧墙结构
	<ol>
		<li>裁切四块 40 cm × 40 cm 的四边形泡沫板。</li>
		<li>使用硅胶将其中两块板分别粘接在 C 和 D 侧，形成左侧和右侧墙体（图 1F）。</li>
		<li>在铝制型材 A 和 B 上粘贴钩环扣带条，以便于操作摄影箱内部元件。此外，在两条粘扣带的一端距离边缘 1 cm 处分别粘贴到两块泡沫纸板上，并将它们安装在前墙和后墙上（图 1F）。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>参考基准台构建 
	注意：需要一个参考基准台，在麻醉期间及伤口演变记录过程中保持小鼠处于俯卧位。3D 部件采用熔融沉积成型（FDM）技术，使用 PLA 材料通过 3D 打印机制作23,24。
	<ol>
		<li>3D 打印一个底面尺寸为宽 2 cm、长 2 cm、高 2 cm 的面罩，并将其放置在预先裁切好的 40 cm × 28 cm 白色泡沫板矩形边缘 11.5 cm 处，用于维持小鼠吸入麻醉状态（图 1D，红色部分）。</li>
		<li>3D 打印一个矩形平台（长 9 cm、宽 5 cm、高 2.5 cm），其上设有四个凸起区域，用于在图像采集过程中对齐小鼠背部。这些区域支撑头部、四肢和腹部，以维持俯卧姿势。将该平台粘接到参考基准台的中心位置（图 1D，绿色部分）。</li>
		<li>3D 打印一个尺座模块（宽 2 cm、长 8 cm、高 2.5 cm），并将其固定在小鼠基座左侧边缘 1 cm 处，用于放置数字图像处理所需的测量参考元件（图 1D，蓝色部分）。</li>
		<li>将一根长 15 cm 的不锈钢刻度尺安装到尺座模块上，并将整个参考基准台安装至摄影舱内，用于图像比例标定（图 1D）。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
<img alt="静态平衡概念；带标签的立方体组装；示意图展示构建顺序步骤 A-F。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67475/67475fig1.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="图1"> 
图1宏观图像采集柜构建示意图 (A) 客舱各部分（顶部、侧壁、地板）。B)构成屋顶的剖面方向；前方（A），后部（rear）B）以及侧面（红色轮廓的内侧）C，D"). (C屋顶面板1和2、LED灯管安装、相机镜头板及地板安装。D) 参考底座上安装麻醉面罩（RED）、小鼠平台（GREEN）和用于放置测量尺的矩形平台（BLUE）。E) 参考基座的最终位置。F侧壁、前壁和后壁的安装。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67475/67475fig1large.jpg" target="_blank">请点击此处以查看此图的放大版本。</a>
2. 动物饲养
<ol>
	<li>获得机构生物伦理委员会的动物实验许可。使用 CD1 小鼠（n = 4），10 周龄，体重 28–32 g。</li>
	<li>在标准条件下饲养小鼠：保持温度为 21 °C，12小时光照/12小时黑暗循环，45%湿度，并提供 随意 除拍照记录期间外，可自由获取水和食物。</li>
</ol>
3. 创伤性伤口的制备
<ol>
	<li>使用校准过的蒸发器，以1.5 L/min的氧气流速输送浓度为5%的吸入性七氟烷，对小鼠进行麻醉25（遵循机构批准的方案）。
	<ol>
		<li>通过趾间捏夹测试是否出现回缩反射，以确认麻醉深度。在眼睛上涂抹眼用软膏，防止麻醉期间角膜干燥。手术及恢复期间（20分钟）维持小鼠体温稳定在37 °C。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将小鼠置于俯卧位，使用手术刀从颈部向尾侧方向剃除2.5 cm × 3 cm区域的毛发。拉紧皮肤以避免切割损伤。采用聚维酮碘与无菌水交替冲洗多次的方式进行灭菌和消毒处理。</li>
	<li>使用无菌的5 mm活检打孔器，以旋转加压的方式在肩胛骨水平处制作真皮-表皮切口。用带齿镊夹起皮瓣，并用虹膜剪剪除（图2A）。</li>
	<li>若伤口存在出血点，使用电凝设备止血。</li>
	<li>使用钟表镊将直径1 cm的圆形真皮敷料覆盖于伤口上，以防止污染和组织收缩。</li>
	<li>所有可存活手术均须在无菌条件下进行。使用聚维酮碘等消毒剂准备手术区域。佩戴无菌手套和口罩，并在整个操作过程中使用无菌器械，尽量减少与非无菌表面的接触，以维持无菌状态。
	<ol>
		<li>术后将小鼠单独饲养于24 °C的笼具中，并持续观察直至其恢复正常自主活动。术中及术后应使用外部热源控制体温，防止低体温发生。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>通过将酮咯酸（片剂，10 mg）溶解于饮水中（终浓度为0.025 mg/mL）进行镇痛给药。该浓度相当于体重30 g的小鼠每日饮水约6 mL时接受5 mg/kg的剂量。应在手术前48小时开始给药，并持续至创伤后第4天，以确保实现预先镇痛和持续镇痛效果26。</li>
	<li>术后每日至少连续观察动物五天。评估每只小鼠的身体状况评分、毛发外观、疼痛或痛苦的行为表现（如活动减少、姿势异常）以及伤口情况（如分泌物、红肿、肿胀或感染迹象）。将观察结果记录于机构动物护理日志中。持续定期监测至第14天，此时健康啮齿类动物的伤口通常已进入愈合的较晚期阶段。按照国际标准，采用O2置换CO2的方式实施安乐死。此为本研究的实验终点。</li>
</ol>
4. 宏观图像采集
<ol>
	<li>连续14天每天拍摄伤口图像，以监测伤口闭合的连续动力学过程。使用半专业或专业相机，将镜头置于摄影箱顶部的圆形开口中。 
	注意：根据实验条件，可酌情调整时间安排。</li>
	<li>使用RGB LED灯管，设置为相关色温（CCT）模式，色温9000 K，亮度100%，用于照明。</li>
	<li>将参考底座置于摄影箱底部中央。</li>
	<li>将小鼠放入吸入麻醉室中3分钟（图2B）。</li>
	<li>麻醉诱导后，将小鼠俯卧于小鼠固定平台上。将小鼠鼻部固定在七氟烷麻醉面罩内，以1.5 L/min的氧气流速输送5%七氟烷（图2C）。</li>
	<li>拍摄图像前，使用珠宝镊子从伤口处移除皮肤敷料，并将参考底座与相机镜头对齐。</li>
	<li>安装摄影箱的前壁，使用以下参数拍摄宏观图像：光圈f/3.2，曝光时间1/200秒，ISO感光度80，焦距4mm。</li>
	<li>使用珠宝镊子，在移除麻醉面罩前，将直径1 cm的皮肤敷料覆盖于伤口处。将小鼠转移至单独的笼具中，并观察直至运动功能恢复。</li>
</ol>
5. 图像处理
<ol>
	<li>生成宏观图像的备份副本。使用 ImageJ 软件处理图像。</li>
	<li>通过以下路径在 ImageJ 中打开备份图像：文件 &gt; 打开 &gt; 搜索 图像，然后点击“打开”。</li>
	<li>通过参照物进行图像标定：最大化图像，选择 直线 工具，使用 + 键放大鼠标旁的标尺，对标尺图像上 10 mm 的直线段进行绘制，然后进入 分析 &gt; 设置标定 &gt; 在“已知距离”中输入“10” &gt; 将 长度单位 设置为 mm，然后点击 确定。此操作可确定宏观图像的像素与距离比例关系（图 2D）。</li>
	<li>从图像中分离伤口区域：使用矩形工具选择伤口周围的区域（w = 150，h = 150）。记录 X 和 Y 值，右键点击 矩形 &gt; 复制 &gt; 命名样本 &gt; 按 Enter 键。在新图像中按 + 键两次以放大（图 2E）。</li>
	<li>按以下路径保存裁剪后的图像：文件 &gt; 另存为 &gt; Tiff &gt; 输入名称 &gt; 保存。</li>
	<li>创建裁剪图像的副本，以避免在分割过程中修改原图：右键点击 裁剪图像 &gt; 复制 &gt; 命名，在名称末尾添加“Segmentation”，然后按 Enter 键。在新图像中按 + 键两次以放大。</li>
	<li>按以下路径将图像拆分为颜色通道：图像 &gt; 类型 &gt; RGB 堆栈。在红色通道图像（1/3 红）中，右键点击 复制，然后在“复制”窗口中点击 确定。</li>
	<li>对红色通道图像进行分割：点击红色通道图像，选择 图像 &gt; 调整 &gt; 阈值，然后选择 默认 &gt; 应用（图 2F）。</li>
	<li>校正感兴趣区域（ROI），以确保完全覆盖伤口并避免分割失真。 
	注意：如果伤口周围区域未被包含在分割中，请进入 处理 &gt; 二值化 &gt; 填充孔洞。若要去除伤口外的黑色斑点，请进入 处理 &gt; 二值化 &gt; 腐蚀。如果腐蚀操作导致伤口面积缩小，可通过使用 处理 &gt; 二值化 &gt; 膨胀 进行校正。</li>
	<li>标记 ROI 的轮廓：编辑 &gt; 选择 &gt; 创建选区，ROI 将以黄色轮廓标出。通过 编辑 &gt; 选择 &gt; 添加到管理器 将其添加至 ROI 管理器（图 2G）。</li>
	<li>验证分割结果：打开 ROI 管理器窗口，选择 ROI 进行复查：更多 &gt; 平移，输入第 4 步中记录的 X 和 Y 值，然后点击 确定。
	<ol>
		<li>最大化原始图像，然后在 ROI 管理器 中选择 ROI。使用方向键调整 ROI，使其与伤口对齐（图 2H）。若 ROI 与伤口吻合，则分割成功；否则，从第 2 步开始重复操作。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>确认分割无误后，获取伤口测量数据：分析 &gt; 测量。结果表格将显示面积、周长及 X/Y 位置值。将这些数值复制至 SPSS 软件，用于记录和统计分析（图 2I）。</li>
</ol>
<img alt="小鼠伤口愈合过程示意图，显示活检打孔、麻醉、拍照记录和图像分析。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67475/67475fig2.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="图 2"> 
图 2：使用数字平面测量法和图像分割技术进行伤口测量的工作流程。（A）使用无菌 5 mm 活检打孔器进行真皮-表皮切口。（B）将小鼠置于吸入式麻醉舱中麻醉 3 分钟。（C）将麻醉后的小鼠置于拍照舱内，将其鼻部固定于七氟烷面罩中以进行拍照记录。（D）在 ImageJ 中打开所获图像，并以标尺为参考进行图像缩放。（E）使用矩形工具提取伤口区域。（F）将图像分离为 RGB 通道，并对红色通道进行处理。（G）勾画并管理感兴趣区域（ROI）。（H）通过将 ROI 与伤口轮廓匹配来验证分割结果。（I）测量伤口参数，并记录结果用于统计分析。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67475/67475fig2large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
6. 术后安乐死
注意：研究在第14天结束，此时健康啮齿类动物的伤口通常已达到愈合的较晚期阶段。在此阶段，小鼠将按照机构批准的安乐死程序实施人道安乐死。
<ol>
	<li>准备设备。确保安乐死舱干净、干燥，且大小合适，能够容纳小鼠而不至于过度拥挤。将舱体连接至带有流量调节器的医用级 CO2 气源。</li>
	<li>轻柔地将小鼠转移至舱内，以尽量减少应激反应。确保其处于安静环境，尽量减少外界干扰。</li>
	<li>根据《动物安乐死美国兽医医学协会指南》的建议，将 CO2 流速设定为每分钟舱体体积的 30%–70%。逐步增加 CO2 浓度，以避免引起小鼠痛苦或不适。</li>
	<li>在操作过程中密切观察小鼠。注意其逐渐丧失意识的迹象，包括活动减少、呼吸减缓，随后出现呼吸停止和心脏停搏。</li>
	<li>当小鼠停止呼吸且无任何运动迹象时，确认其死亡；再等待额外 1–2 分钟，以确保生命功能完全终止。通过确认反射（如角膜反射）和心脏活动消失来核实死亡。</li>
	<li>将尸体转移至指定的生物危害废物容器中。遵循机构规程和国家指南，安全处理动物遗体。</li>
	<li>记录实施安乐死的动物数量、日期以及任何相关观察结果，以确保符合伦理和机构标准。</li>
</ol>

<ol><li>Martinengo, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+chronic+wounds+in+the+general+population%3A+systematic+review+and+meta-analysis+of+observational+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Epidemiol%22%5BJournal%5D)">Prevalence of chronic wounds in the general population: systematic review and meta-analysis of observational studies.</a> Ann Epidemiol. 29, 8-15 (2019).</li>
<li>Chen, X., Shi, X., Xiao, H., Xiao, D., Xu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Research+hotspot+and+trend+of+chronic+wounds%3A+A+bibliometric+analysis+from%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Research hotspot and trend of chronic wounds: A bibliometric analysis from.</a> 31 (5), to 2022. Wound Repair 597-612 (2013).</li>
<li>Gould, L., Li, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defining+complete+wound+closure%3A+Closing+the+gap+in+clinical+trials+and+practice%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair%22%5BJournal%5D)">Defining complete wound closure: Closing the gap in clinical trials and practice.</a> Wound Repair. 27 (3), 201-224 (2019).</li>
<li>Baron, J. M., Glatz, M., Proksch, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimal+support+of+wound+healing%3A+New+insights%5BTitle%5D)+AND+%22Dermatology%22%5BJournal%5D)">Optimal support of wound healing: New insights.</a> Dermatology. 236 (6), 593-600 (2020).</li>
<li>Tiwari, R., Pathak, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+drug+delivery+strategies+towards+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Local drug delivery strategies towards wound healing.</a> Pharmaceutics. 15 (2), (2023).</li>
<li>Gupta, B., Agarwal, R., Alam, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydrogels+for+wound+healing+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Hydrogels%22%5BJournal%5D)">Hydrogels for wound healing applications.</a> Biomed Hydrogels. , 184-227 (2011).</li>
<li>Pastar, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pre-clinical+models+for+wound-healing+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Skin+Tissue+Models+Regen+Med%22%5BJournal%5D)">Pre-clinical models for wound-healing studies.</a> Skin Tissue Models Regen Med. , 223-253 (2018).</li>
<li>Shen, Z., Zhang, C., Wang, T., Xu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+functional+hydrogel+wound+dressings%5BTitle%5D)+AND+%22A+Review.+Polymers+%28Basel%22%5BJournal%5D)">Advances in functional hydrogel wound dressings.</a> A Review. Polymers (Basel. 15 (9), (2000).</li>
<li>Wong, V. W., Sorkin, M., Glotzbach, J. P., Longaker, M. T., Gurtner, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+approaches+to+create+murine+models+of+human+wound+healing%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Surgical approaches to create murine models of human wound healing).</a> J Biomed Biotechnol. 2011, 1-8 (2011).</li>
<li>Peterson, N., Stevenson, H., Sahni, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Size+matters%3A+How+accurate+is+clinical+estimation+of+traumatic+wound+size%5BTitle%5D)+AND+%22Injury%22%5BJournal%5D)">Size matters: How accurate is clinical estimation of traumatic wound size.</a> Injury. 45 (1), 232-236 (2014).</li>
<li>Öien, R. F., Håkansson, A., Hansen, B. U., Bjellerup, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+the+size+of+ulcers+by+planimetry%3A+a+useful+method+in+the+clinical+setting%5BTitle%5D)+AND+%22J+Wound+Care%22%5BJournal%5D)">Measuring the size of ulcers by planimetry: a useful method in the clinical setting.</a> J Wound Care. 11 (5), 165-168 (2002).</li>
<li>Rogers, L. C., Bevilacqua, N. J., Armstrong, D. G., Andros, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digital+planimetry+results+in+more+accurate+wound+measurements%3A+a+comparison+to+standard+ruler+measurements%5BTitle%5D)+AND+%22J+Diabetes+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Digital planimetry results in more accurate wound measurements: a comparison to standard ruler measurements.</a> J Diabetes Sci Technol. 4 (4), 799-802 (2010).</li>
<li>Shamata, A., Thompson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Documentation+and+analysis+of+traumatic+injuries+in+clinical+forensic+medicine+involving+structured+light+three-dimensional+surface+scanning+versus+photography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Forensic+Leg+Med%22%5BJournal%5D)">Documentation and analysis of traumatic injuries in clinical forensic medicine involving structured light three-dimensional surface scanning versus photography.</a> J Forensic Leg Med. 58, 93-100 (2018).</li>
<li>Foltynski, P., Ladyzynski, P., Ciechanowska, A., Migalska-Musial, K., Judzewicz, G., Sabalinska, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wound+area+measurement+with+digital+planimetry%3A+Improved+accuracy+and+precision+with+calibration+based+on+2+rulers%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Wound area measurement with digital planimetry: Improved accuracy and precision with calibration based on 2 rulers.</a> PLoS One. 10 (8), (2015).</li>
<li>Frank, S., Kämpfer, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Excisional+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Healing%3A+Methods+Protoc%22%5BJournal%5D)">Excisional wound healing.</a> Wound Healing: Methods Protoc. , 3-15 (2003).</li>
<li>Dunn, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+model+of+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Murine model of wound healing.</a> J Vis Exp. 75, (2013).</li>
<li>Barakat, M., DiPietro, L. A., Chen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Limited+Treatment+options+for+diabetic+wounds%3A+Barriers+to+clinical+translation+despite+therapeutic+success+in+murine+models%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Wound+Care+%28New+Rochelle%22%5BJournal%5D)">Limited Treatment options for diabetic wounds: Barriers to clinical translation despite therapeutic success in murine models.</a> Adv Wound Care (New Rochelle. 10 (8), 436-460 (2021).</li>
<li>Goh, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inducing+ischemia-reperfusion+injury+in+the+mouse+ear+skin+for+intravital+multiphoton+imaging+of+immune+responses%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Inducing ischemia-reperfusion injury in the mouse ear skin for intravital multiphoton imaging of immune responses).</a> J Vis Exp. 118, (2016).</li>
<li>Wang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autologous+fat+grafting+promotes+macrophage+infiltration+to+increase+secretion+of+growth+factors+and+revascularization%2C+thereby+treating+diabetic+rat+skin+defect%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%2C+Metab+Syndr+Obes%3A+Targets+and+Therapy%22%5BJournal%5D)">Autologous fat grafting promotes macrophage infiltration to increase secretion of growth factors and revascularization, thereby treating diabetic rat skin defect.</a> Diabetes, Metab Syndr Obes: Targets and Therapy. 13, 4897-4908 (2020).</li>
<li>Notodihardjo, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+the+wound+healing+process+after+the+application+of+three+dermal+substitutes+with+or+without+basic+fibroblast+growth+factor+impregnation+in+diabetic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Plast+Reconstr+Aesthet+Surg%22%5BJournal%5D)">A comparison of the wound healing process after the application of three dermal substitutes with or without basic fibroblast growth factor impregnation in diabetic mice.</a> J Plast Reconstr Aesthet Surg. 73 (8), 1547-1555 (2020).</li>
<li>Thawer, H. A., Houghton, P. E., Woodbury, M. G., Keast, D., Campbell, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+computer-assisted+and+manual+wound+size+measurement%5BTitle%5D)+AND+%22Ostomy+Wound+Manage%22%5BJournal%5D)">A comparison of computer-assisted and manual wound size measurement.</a> Ostomy Wound Manage. 48 (10), 46-53 (2002).</li>
<li>Huang, C. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+digital+and+traditional+skin+wound+closure+assessment+methods+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim+Res%22%5BJournal%5D)">Comparison of digital and traditional skin wound closure assessment methods in mice.</a> Lab Anim Res. 39 (1), (2023).</li>
<li>Subramaniam, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+printing%3A+Overview+of+PLA+progress%5BTitle%5D)+AND+%22AIP+Conf+Proc.+020015%22%5BJournal%5D)">3D printing: Overview of PLA progress.</a> AIP Conf Proc. 020015. , (2019).</li>
<li>Oleksy, M., Dynarowicz, K., Aebisher, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+prototyping+technologies%3A+3D+printing+applied+in+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Rapid prototyping technologies: 3D printing applied in medicine.</a> Pharmaceutics. 15 (8), (2023).</li>
<li>Césarovic, N., Nicholls, F., Rettich, A., Kronenberg, S., Häussler, A. K., Boillat, C. S., Spahn, D. R., Arras, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isoflurane+and+sevoflurane+provide+equally+effective+anaesthesia+in+laboratory+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Isoflurane and sevoflurane provide equally effective anaesthesia in laboratory mice.</a> Lab Anim. 44 (4), 329(2010).</li>
<li>Domer, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+analgesic+activity+of+ketorolac+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Characterization of the analgesic activity of ketorolac in mice.</a> Eur. J. Pharmacol. 177, 127(1990).</li>
<li>Cukjati, D., Reberšek, S., Miklavčič, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+reliable+method+of+determining+wound+healing+rate%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Biol+Eng+Comput%22%5BJournal%5D)">A reliable method of determining wound healing rate.</a> Med Biol Eng Comput. 39 (2), 263-271 (2001).</li>
<li>Payne, W. G., Bhalla, R., Hill, D. P., Pierpont, Y. N., Robson, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wound+healing+trajectories+to+determine+pressure+ulcer+treatment+ef%EF%AC%81cacy%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair%22%5BJournal%5D)">Wound healing trajectories to determine pressure ulcer treatment efﬁcacy.</a> Wound Repair. 11, 1(2011).</li>
<li>Cardinal, M., Eisenbud, D. E., Phillips, T., Harding, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+healing+rates+and+wound+area+measurements+are+reliable+predictors+of+later+complete+wound+closure%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair%22%5BJournal%5D)">Early healing rates and wound area measurements are reliable predictors of later complete wound closure.</a> Wound Repair. 16 (1), 19-22 (2008).</li>
<li>Tallman, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Initial+rate+of+healing+predicts+complete+healing+of+venous+ulcers%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Initial rate of healing predicts complete healing of venous ulcers.</a> Arch Dermatol. 133 (10), 1231(1997).</li>
<li>Hopkins, N. F. G., Jamieson, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibiotic+concentration+in+the+exudate+of+venous+ulcers%3A+The+prediction+of+ulcer+healing+rate%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Antibiotic concentration in the exudate of venous ulcers: The prediction of ulcer healing rate.</a> Br J Surg. 70 (9), 532-534 (2005).</li>
<li>Robson, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wound+healing+trajectories+as+predictors+of+effectiveness+of+therapeutic+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Surg%22%5BJournal%5D)">Wound healing trajectories as predictors of effectiveness of therapeutic agents.</a> Arch Surg. 135 (7), (2000).</li>
<li>Jessup, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+is+the+best+method+for+assessing+the+rate+of+wound+healing%3F+A+comparison+of+3+mathematical+formulas%5BTitle%5D)+AND+%22Wounds%22%5BJournal%5D)">What is the best method for assessing the rate of wound healing? A comparison of 3 mathematical formulas.</a> Wounds. 19 (3), 138-147 (2006).</li>
<li>Landén, N. X., Li, D., Ståhle, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transition+from+inflammation+to+proliferation%3A+A+critical+step+during+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Transition from inflammation to proliferation: A critical step during wound healing.</a> Cell Mol Life Sci. 73 (20), 3861-3885 (2016).</li>
<li>Szpaderska, A. M., DiPietro, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+.+Inflammation+in+surgical+wound+healing%3A+Friend+or+foe%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">A . Inflammation in surgical wound healing: Friend or foe.</a> Surgery. 137 (5), 571-573 (2005).</li>
<li>Hamed, E., Al Balah,, A, O. F., Refaat, M., Badr, A. M., Afifi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy+mediated+by+methylene+blue-loaded+PEG+accelerates+skin+mouse+wound+healing%3A+An+immune+response%5BTitle%5D)+AND+%22Lasers+in+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy mediated by methylene blue-loaded PEG accelerates skin mouse wound healing: An immune response.</a> Lasers in Med Sci. 39 (1), 141(2024).</li>
<li>Ibraheem, W. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+digital+planimetry+and+ruler+methods+for+the+measurement+of+extraction+socket+wounds%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Comparison of digital planimetry and ruler methods for the measurement of extraction socket wounds.</a> 59 (1), Medicina (Kaunas. 135(2023).</li>
<li>Mayrovitz, H. N., Soontupe, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wound+areas+by+computerized+planimetry+of+digital+images%3A+accuracy+and+reliability%29%5BTitle%5D)+AND+%22Wounds%22%5BJournal%5D)">Wound areas by computerized planimetry of digital images: accuracy and reliability).</a> Wounds. 22 (5), 222-229 (2009).</li>
<li>Galiano, R. D., Michaels, J., Dobryansky, M., Levine, J. P., Gurtner, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+and+reproducible+murine+model+of+excisional+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair%22%5BJournal%5D)">Quantitative and reproducible murine model of excisional wound healing.</a> Wound Repair. 12 (4), 485-495 (2004).</li>
<li>Price, A., Grey, J. E., Patel, G. K., Cbe, K. G. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPrice%2C+A+%22ABC+of+wound+healing%22">ABC of wound healing</a>. , John Wiley & Sons. 0470658975(2022).</li>
<li>Eming, S. A., Krieg, T., Davidson, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammation+in+wound+repair%3A+Molecular+and+cellular+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22J+Invest+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Inflammation in wound repair: Molecular and cellular mechanisms.</a> J Invest Dermatol. 127 (3), 514-525 (2007).</li>
<li>Carmeliet, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiogenesis+in+life%2C+disease+and+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Angiogenesis in life, disease and medicine.</a> Nature. 438 (7070), 932-936 (2005).</li>
<li>López, N., Cervero, S., Mj Jiménez,, Sanchez, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+characterization+of+wound+exudate+as+a+predictor+of+wound+healing+phases%5BTitle%5D)+AND+%22Wounds%22%5BJournal%5D)">Cellular characterization of wound exudate as a predictor of wound healing phases.</a> Wounds. 26 (4), 101-107 (2014).</li>
<li>Liu, N. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantifying+the+effects+of+wound+healing+risk+and+potential+on+clinical+measurements+and+outcomes+of+severely+burned+patients%3A+A+data-driven+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Burns%22%5BJournal%5D)">Quantifying the effects of wound healing risk and potential on clinical measurements and outcomes of severely burned patients: A data-driven approach.</a> Burns. 46 (2), 303-313 (2020).</li>
<li>Han, C., Barakat, M., DiPietro, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiogenesis+in+wound+repair%3A+Too+much+of+a+good+thing%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb+Perspect+Biol%22%5BJournal%5D)">Angiogenesis in wound repair: Too much of a good thing.</a> Cold Spring Harb Perspect Biol. 14 (10), (2022).</li>
</ol>

作者声明本研究不存在任何利益冲突。

在临床前模型中，由于伤口大小、局部炎症反应34、位置和/或操作等因素的影响，对创伤性伤口演变过程进行定量分析面临诸多挑战。目前已有直接手动36和间接数字11,16,37,38测面积法用于此类测量。与常受观察者偏倚和光照条件差异影响的手动方法研究相比，本研究采用了标准化的数字测面积法。采用手动测量的研究报告了伤口尺寸具有较高的变异性10,38，而本研究的技术在时间推移中表现出更高的重复性。此外，与其他数字方法11,16,<sup clas...

创伤愈合大约需要21天，具有明确的四个阶段顺序：（1）止血期，（2）炎症期，（3）增殖期，以及（4）重塑期1。如果伤口愈合的任一阶段被延长，可能导致慢性伤口的形成1。由于其高发病率、潜在并发症2以及巨大的经济负担，慢性伤口被视为全球性健康问题。
临床前研究旨在通过促进创面完全再上皮化3,4,5、预防并发症以及降低治疗成本，实现更快的愈合。这些研究评估了多种策略，包括生物材料的开发、药物干预以及其他再生医学技术6,7,8,9。
已开发出多种实验模型用于创伤伤口的研究。一些模型侧重于宏观可见的定性特征，如伤口大小、炎症指标、肉芽组织的存在、分泌物以及结痂形成5。另一些模型则分析定量数据，包括伤口面积、周长、半径、直径、颜色、深度，以及从伤口中心到边缘的距离等。
在这方面，大多数in vivo研究直接测量伤口的半径和深度。然而，在宏观图像中手动勾画伤口边缘可能会引入测量偏差10。其他研究采用机械平面测量法，使用带有网格的透明塑料片，事先在上面勾画出伤口边缘；在这两种情况下，获取面积或周长均需借助尺子或数字测面积仪等手动工具。如今，计算机辅助数字平面测量法可对伤口或塑料片的宏观图像进行计算机化分析。In situ操作以及宏观图像的质量仍存在局限性，但该工具11,12,13,14显著降低了面积和周长测量之间的变异性。
该研究方法在评估小鼠伤口闭合方面相较于现有技术具有显著优势15,16,17,18,19,20。尽管摄影记录被认为是评估伤口闭合动力学的一种准确且一致的工具，但先前的研究21,22已指出人工测量伤口存在的局限性，例如观察者偏差以及因光照和相机位置不一致导致的变异性。本方法通过使用定制成像舱标准化成像条件，解决了上述问题，提高了实验的可重复性和精确性。此外，计算机数字平面测量法可实现更准确的定量评估，增强对治疗干预效果的评价能力，并减少测量误差，这一点已在比较人工与数字技术的其他研究中得到证实12,22，因此该方法特别适用于小鼠模型中的伤口闭合动力学研究，能够在严格控制图像采集条件的基础上，精确评估各类治疗方法的效果。

<table><tbody><tr><td>5 mm 皮肤活检打孔器</td><td>MILTEX, USA</td><td>33-35</td><td>用于标记伤口边缘</td></tr><tr><td>带聚乙烯芯的铝板</td><td>Alucobond,USA</td><td>Bright Silver 119</td><td>用于构建宏观图像采集台</td></tr><tr><td>相机镜头&amp;nbsp;</td><td>Sony, Japan</td><td>SEL2470Z</td><td>用于对拍摄图像进行对焦</td></tr><tr><td>电凝器</td><td>Bonart, USA</td><td>ART-E1</td><td>用于消除伤口中可能存在的出血点</td></tr><tr><td>钩环扣条&amp;nbsp;</td><td>VELCRO</td><td></td><td></td></tr><tr><td>IBM SPSS Statistics 版本 22</td><td>IBM Corporation, USA</td><td>https://www.ibm.com/analytics/spss-statistics</td><td>用于伤口测量数据（包括面积和周长）的统计分析</td></tr><tr><td>ImageJ 版本 1.53t</td><td>美国国立卫生研究院, USA</td><td>https://imagej.nih.gov/ij/</td><td>用于处理宏观图像，包括图像标定、分割以及伤口参数的测量</td></tr><tr><td>酮咯酸</td><td>SIEGFRIED RHEIN, 墨西哥</td><td>493977</td><td>用于术后疼痛管理</td></tr><tr><td>Miltex 睫状体剪刀，4-1/8&quot; 弯型</td><td>MILTEX, USA</td><td>V95-306</td><td>用于剪切由活检打孔器产生的伤口皮瓣</td></tr><tr><td>RGB LED 灯管</td><td>ANDOER, 中国</td><td>&amp;lrm; B09F8RLMSY</td><td>用于为宏观图像采集台提供照明</td></tr><tr><td>半专业相机</td><td>Sony, Japan</td><td>&amp;nbsp;DSC-HX300</td><td>用于拍照</td></tr><tr><td>有齿镊</td><td>MILTEX, USA</td><td>V96-118</td><td>用于在切割过程中夹持皮瓣</td></tr><tr><td>七氟烷</td><td>Baxter, USA</td><td>AMX2L9117PR</td><td>用于吸入麻醉</td></tr><tr><td>戊巴比妥钠</td><td>Aranda, 墨西哥</td><td>734.448.001.212</td><td>用于腹腔注射麻醉</td></tr><tr><td>SolidWorks 版本 2015</td><td>Dassault Syst&amp;egrave;mes, 法国</td><td>&amp;nbsp;https://www.solidworks.com/</td><td>用于设计和创建三维模型，以制造图像记录台的配件&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>手术刀片&amp;nbsp;</td><td>HERGOM, 墨西哥</td><td>H10</td><td>用于剃除将要制造伤口区域的毛发</td></tr><tr><td>透明粘性敷料</td><td>3M, USA</td><td>F51CA07</td><td>用于覆盖创伤性伤口</td></tr></tbody></table>

利用数字平面测量法评估小鼠模型中伤口闭合动力学

Digital Planimetry for Assessing Wound Closure Kinetics in a Mouse Model

由于慢性伤口患病率高，已成为一个严重的全球性健康问题。有效的治疗策略可显著加快愈合过程，从而降低并发症风险，并减轻医疗系统的经济负担。尽管已有大量实验研究探讨伤口愈合过程，但大多数研究依赖于定性观察或直接的定量测量。本研究旨在标准化一种基于数字图像测量法的间接伤口测量方法，结合数字标尺校准与图像分割技术。该方法弥补了目前在伤口准确评估方面缺乏详细、分步操作指南的不足。本研究设计并搭建了一个摄影记录装置，采用计算机辅助的数字图像测量工具，以尽量减少伤口面积、周长以及从伤口中心到边缘距离等参数测量中的变异性。在雄性CD1小鼠（n = 4，10周龄，体重30–35 g）肩胛水平背部中线处制造一个直径为5 mm的圆形创伤性伤口。使用自行设计的摄影装置对伤口演变过程进行为期14天的摄影记录，该装置可控制光照条件、焦距和实验动物体位。利用ImageJ软件中的图像分割功能进行标尺校准和伤口测量，统计分析则通过统计分析软件完成。伤口闭合动力学结果显示，伤口面积和周长在第0天至第2天略有增加，随后逐渐减小，直至第14天完全闭合。摄影记录装置与计算机辅助数字图像测量技术实现了变异度极小的定量测量。综上所述，这些工具为临床前模型中评估伤口闭合动力学提供了一种可靠且可重复的方法。

使用ImageJ软件对图像进行缩放后，通过数字分割法获得了伤口的平均周长（表1）和面积（表2）及其各自的标准差。这些数值记录自第0天至第14天（D0-D14）。
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>天数</td>
			<td>周长（mm）</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0</td>
			<td>22.75 ± 0.8900</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1</td>
			<td>21.65 ± 0.0200</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2</td>
			<td>25.25 ± 0.5900</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3</td>
			<td>24.37 ± 0.1600</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4</td>
			<td>24.61 ...

伤口是全球健康面临的一项挑战。本研究开发了一种利用数字平面测量法的标准化摄影装置，以减少伤口测量的变异性。对小鼠伤口进行为期14天的监测发现，伤口面积和周长在初期增加，随后逐渐闭合。该方法可能有助于评估临床前模型中的伤口闭合动力学。

慢性伤口由于发病率高，已成为一个严重的全球性健康问题。有效的治疗策略可显著加速伤口愈合，……

我们的研究致力于通过建立受控的成像条件（包括光照位置、距离和操作流程的一致性）来标准化宏观伤口测量，旨在减少变异，提高临床前模型中伤口闭合测量的准确性。我们针对显微伤口测量中缺乏标准化的问题展开研究。目前的方法通常缺乏对照条件，导致数据不一致。本方案提供了可适用的设置，可确保光照均匀、位置固定和距离一致，从而降低误差概率并提高可重复性。本方案通过标准化成像条件，消除了测量偏差的常见来源。与手动方法不同，该方案可确保不同实验间的一致性，实现准确比较，并减少伤口面积和周长测量中的变异性。我们的结果通过提供标准化的方法，实现了更精确且可重复的伤口测量数据。这是评估治疗干预措施和临床前伤口研究的基础。首先，将带槽铝型材固定在屋顶侧边缘内侧区域。将两块带有聚乙烯中心的矩形铝板插入屋顶型材的凹槽中，使其能够在两个型材中滑动。使用双面胶带将一根20厘米长的RGB LED灯管以45度角安装在第一块面板的底边下侧。然后，在每块屋顶面板上安装一块带有直径7.82厘米圆形切口的矩形泡沫板，以便安装相机镜头。进行地面构造时，首先从40厘米×40厘米的白色泡沫板的每个角落切割出边长为2.54厘米的正方形。此步骤可确保泡沫板能够正确贴合于地面区域轮廓内。修整角落后，将泡沫板放置在地面区域轮廓的上方。将钩面和毛面搭扣条粘贴至铝型材 A 和 B 上，以便于操作摄影亭内部组件。在两块泡沫纸板的同一侧，距边缘一厘米处固定粘合搭扣，并将纸板分别置于前墙和后墙上。使用硅胶将两块面板粘合至 C 和 D 侧，形成左侧和右侧侧壁。将一个3D打印的麻醉面罩放置在预先切割好的40厘米×28厘米白色泡沫板矩形边缘11.5厘米处，以维持小鼠的吸入麻醉状态。然后将其粘贴至参考底板的中心位置。将3D打印的标尺块固定在小鼠底板左侧1厘米处，以提供用于数字图像处理的测量参考基准。然后，将一根15厘米长的不锈钢刻度尺固定到尺子底座上，并将完整的参考基准装置安装在舱内，用于图像缩放。麻醉小鼠后，使用无菌的5毫米活检打孔器，以旋转方式施加压力，在肩胛骨水平位置制造一个真皮表皮切口。用锯齿状镊子取下皮瓣，并用虹膜剪刀剪除。使用珠宝镊子将一块直径一厘米的圆形真皮膜置于伤口上，以防止污染和收缩。为拍摄伤口图像，将参考底座放置在摄影舱地板的中心位置。然后，将麻醉后的小鼠俯卧于小鼠平台之上。安装拍照亭的前壁并拍摄宏观图像。要在 ImageJ 中打开创建的备份图像，请转到“文件”菜单，选择“打开”并进行搜索，然后点击“打开”。现在将图像最大化，选择直线工具，然后使用加号键放大鼠标旁边的标尺。在标尺图像上绘制一条10毫米的直线。进入分析菜单并设置比例尺。输入已知距离为10。将长度单位设置为毫米，然后单击“确定”。接下来，使用矩形工具选择伤口周围区域，宽度和高度均为150，并记录X和Y值。然后，右键单击矩形并选择复制。为复制的图像命名，然后按回车键。在新图像中，连续按两次加号以放大。要将图像分离为颜色通道，请转到图像、类型和RGB堆栈。在红色通道图像中，右键单击图像，选择复制，并在复制窗口中点击确定。然后，单击红色通道图像，选择图像、调整和阈值以进行分割。选择默认值，然后点击应用以执行阈值处理。校正感兴趣区域（ROI），以确保伤口完全覆盖，并避免分割失真。要定义感兴趣区域的边界，请选择“编辑”，然后进入“选择”并选择“创建选区”。然后，选择“编辑”，再选择“选择”，然后单击“添加到管理器”以将其添加到 ROI 管理器中。为验证分割效果，打开 ROI 管理器窗口并选择要查看的 ROI。单击“更多”、“平移”，输入记录的 X 和 Y 值，然后按“确定”。将原始图像最大化，然后在 ROI 管理器中选择感兴趣区域（ROI）。使用方向键调整 ROI，直至其与伤口轮廓对齐。确认分割无误后，选择“分析”和“测量”以获取伤口的测量数据。由于炎症反应，伤口闭合率在第2天初期上升至138.04%，随后逐渐下降，并进入修复与巩固阶段，第7天后观察到持续的伤口闭合。伤口边缘回缩距离在炎症期初期增加，但自第3天起开始减少，Gilman公式结果表明伤口逐渐收缩。

digital-planimetry-for-assessing-wound-closure-kinetics-mouse

Research

科研

JoVE Journal

Bioengineering

生物工程

用于评估小鼠模型中伤口闭合动力学的数字平面测量法

一种可用于在生理和病理生理条件下评估治疗化合物的皮肤伤口愈合小鼠模型。...

小鼠伤口愈合模型

由于大鼠体型、易得性以及相对温顺的行为，多年来一直被用作研究模型。本实验方案的目的是利用大鼠建立缺血性皮肤伤口愈合模型，以深入了解慢性伤口的病理生理机制。...

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本文介绍了一种利用无毛小鼠建立的新型糖尿病小鼠模型，可用于对发光假单胞菌（Pseudomonas...

来到光的一侧：体内监测糖尿病无毛小鼠模型慢性伤口中铜绿假单胞菌的生物膜感染

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糖尿病小鼠慢性伤口造模方案

我们介绍一种非侵入性的体内成像方案，该方案流程简化且成本效益高，利用化学发光的鲁米诺类似物L-012，对小鼠全层皮肤缺损伤口模型中产生的活性氧（ROS）进行可视化和定量分析。...

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本文介绍了一种利用原代成纤维细胞进行体外划痕实验的方法，以及一种在小鼠中进行的体内皮肤伤口愈合实验方案。这两种实验均为评估体外和体内伤口愈合的简便方法。...

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本文介绍了两种小鼠伤口愈合模型，一种用于评估细胞和细胞因子介导的伤口愈合反应，另一种用于量化伤口闭合速率。这些方法可与糖尿病等复杂疾病模型联合使用，以探究伤口愈合不良各个方面的潜在机制。...

使用背部皮下聚乙烯醇海绵植入和尾部皮肤切除伤口模型评估急性伤口愈合

本研究旨在建立一种小鼠烧伤创面愈合模型。使用预热的黄铜模板在小鼠背部皮肤上诱导产生热力烧伤。烧伤组织经清创后，覆盖取自遗传背景相似的供体小鼠尾巴的皮肤移植物。...

一种利用同种异体皮肤移植物重建的烧伤创面小鼠模型

本方案描述了如何在小鼠身上制备双侧全层切除性伤口，以及如何随后对伤口进行监测、采集和处理，以进行形态计量学分析。文中还包括如何利用连续组织学切片精确定义、定量检测形态计量缺陷的详细说明。...

小鼠全层皮肤缺损伤口愈合模型及组织形态计量学伤口分析

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小鼠伤口模型的建立与单细胞悬液的制备

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一种大鼠外科皮肤伤口模型：用于伤口愈合研究与生物材料评估的方法

学习数字平面测量法评估小鼠模型中的伤口闭合动力学。该方法通过标准化成像条件减少测量变异性，提高临床前伤口研究的准确性和可重复性，为伤口愈合机制研究提供可靠数据支持。

利用数字平面测量法评估小鼠模型中伤口闭合动力学

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