Name: 细粒棘球蚴小细胞外囊泡的分离和树突状细胞摄取 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-28T13:15:00.000+00:00
Duration: 9 min 4 s
Description: 了解细粒棘球蚴小细胞外囊泡的分离方法及其被树突状细胞摄取的过程。本研究通过动态光散射和共聚焦显微镜技术，揭示了寄生虫与宿主免疫系统的相互作用机制。

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作者感谢阿根廷国家科学技术研究委员会电子显微镜服务中心的Cecilia Gutiérrez Ayesta学士（Lic.）以及阿根廷拉普拉塔国立大学INIFTA研究所的Leonardo Sechi学士（Lic.）和Eliana Maza学士（Lic.），分别为透射电子显微镜和动态光散射实验提供了技术协助。我们还感谢阿根廷INBIOTEC-CONICET-FIBA的Graciela Salerno博士（Dra.）、Corina Berón博士（Dra.）和Gonzalo Caló博士（Dr.）提供超速离心机的使用支持。作者衷心感谢阿根廷马德普拉塔SENASA的Kelly学士（Lic.）和阿根廷马德普拉塔国立大学国家科学技术研究委员会的H. Núñez García学士（Lic.）在小鼠福利评估方面的合作，同时感谢兽医J. Reyno、兽医S. Gonzalez和兽医L. Netti在寄生虫材料获取方面的贡献。本研究工作（包括实验、试剂和设备费用）由阿根廷国家科学技术促进局（ANPCyT）资助的PICT 2020 No. 1651项目支持。

作者声明不存在利益冲突。

培养寄生虫、分离寄生虫来源的小细胞外囊泡（sEVs）、从骨髓分化树突状细胞以及分析这些细胞对sEVs摄取的实验流程如图1所示。本方案旨在详细描述各个实验步骤，这些步骤可整体或独立实施，并强调确保方法成功实施的关键注意事项。对来源于完整寄生虫生物体的细胞外囊泡（EVs）群体进行分析，对于研究寄生虫与宿主之间的相互关系具有重要意义，本实验方案正是在此背景下制定的。
寄生虫病的新见解一直受到以下困难的阻碍： 体外 培养这些寄生虫中的一些种类。由于寄生性蠕虫在人工条件下无法完成其整个生命周期，因此它们只能以完整生物体的形式在培养中存活。因此，本方案提出的研究蠕虫-宿主相互作用界面的方法是：分别独立培养每种寄生形态（成虫及不同幼虫阶段），以富集和分离小细胞外囊泡（sEVs），随后将这些sEVs与宿主靶器官细胞或免疫系统细胞共孵育，使其分别被细胞内化或吞噬。此外，建立用于分离细胞外囊泡（EVs）的蠕虫培养体系的关键步骤是严格筛选活体寄生虫作为起始材料 体外 培养并尽量缩短孵育时间，以减少寄生虫死亡和...

细粒棘球绦虫 是一种人畜共患的寄生性蠕虫，可引起一种称为囊型包虫病的长期感染1在中间宿主（如家畜和人类）中，该寄生虫感染主要影响肝脏和肺脏，其幼虫阶段发育为充满液体的囊泡或含原头节（一种幼虫形态）的中绦期幼虫。与所有绦虫一样，该寄生虫缺乏消化系统和排泄系统，因此进化出了活跃的内吞和外排细胞过程，以调控代谢物的摄取与排出，并释放细胞外囊泡。2,3细胞外囊泡（EVs）是由几乎所有细胞类型分泌的脂质双层包裹的颗粒。特别是小细胞外囊泡（sEVs），定义为直径小于200 nm的EVs，无论其生物发生来源如何4，可作为细胞间免疫介质。这一功能在寄生虫中尤为重要，因为寄生虫依赖宿主免疫调节以确保其存活3通过宿主树突状细胞摄取sEVs实现免疫调控，树突状细胞是唯一能够激活初始T细胞的细胞 体内 并启动适应性免疫反应，导致这些寄生蠕虫的慢性感染。树突状细胞是先天免疫系统的专职抗原呈递细胞，可加工抗原并将抗原肽装载至主要组织相容性复合体I类和II类（MHC I和MHC II），随后将其呈递于细胞膜表面，以特异性激活初始T细胞（CD8+ 和 CD4+ T细胞，分别）5树突状细胞在识别外源性抗原后，通过诱导共刺激分子标记物CD80/CD86和CD40以及MHC-II的表达，促进自身成熟，并从外周组织迁移至次级淋巴器官，进而将抗原呈递给初始T细胞以启动特异性免疫应答。6因此，本实验方案的总体目标是以更贴近实际的方式研究蠕虫寄生虫与宿主之间的相互作用，分析寄生虫成分以sEVs形式进行的包装与递送过程，这些sEVs在到达宿主免疫细胞后，将影响感染的发生以及慢性寄生虫病的进展。
通过研究sEVs来分析蠕虫-宿主界面具有多个优势。首先，扁形动物的外表皮（tegument）是一种双层膜结构，构成了寄生虫与其宿主之间物质交换的主要通道，使得sEVs能够直接由此结构生成或穿透释放7。其次，sEVs富含寄生虫生活史各个阶段的蛋白质抗原，代表了宿主免疫系统在蠕虫感染过程中识别抗原的天然途径8,9。由于sEVs具有生物学来源、易于纯化（无需组织破碎或蛋白质分级分离），并能直接与宿主细胞相互作用，因此可被用于建立体外（in vitro）实验模型，以模拟体内（in vivo）寄生虫-宿主相互作用的条件。最后，sEVs提供了一种可被宿主细胞吞噬或内化的寄生性结构，克服了使用完整寄生虫（尤其是包囊型蠕虫）进行此类实验的不可行性。
考虑到上述优势以及蠕虫病具有高发性和慢性特征，且寄生虫可能通过调控宿主免疫系统作为其生存策略，分离寄生虫来源的细胞外囊泡（EVs）并研究其与树突状细胞的相互作用，为探索这种免疫调节机制提供了有价值的框架10在这方面，已有研究描述了包括线虫和扁形动物门（如吸虫和绦虫）在内的寄生蠕虫来源的细胞外囊泡（EVs）的内化过程 曼氏血吸虫, 肝片形吸虫， 布鲁氏丝虫，以及 E. granulosus，可诱导树突状细胞的成熟与活化9,11,12,13,14,15.
分离寄生蠕虫来源的细胞外囊泡（EVs）不仅有助于研究免疫相互作用，可能推动针对过敏性疾病或自身免疫性疾病的保护性疫苗或免疫治疗剂的开发，还能促进对其他生物学相互作用和功能的探索8,16,17。在此背景下，EVs 作为寄生感染自然史中的重要参与者，可用于研究寄生虫的发育过程及其与特定宿主细胞的相互作用。此外，EVs 还可能作为寄生虫病早期诊断或鉴别诊断的生物标志物，在监测治疗反应以及寄生虫感染的防控与管理中具有潜在应用价值17,18。
此外，如先前研究所证实，E. granulosus 的幼虫阶段对胞质钙离子浓度的变化具有敏感性，而钙离子浓度不仅影响寄生虫的存活能力，还调控外泌体的释放速率19,20。在此背景下，鉴于细胞内钙离子水平的升高可促进细胞外囊泡（EV）的释放，使用如洛哌丁胺等细胞内钙离子增强剂可能成为增加EV数量的关键策略。该方法对于需要大量细胞以获得足够数量EV用于载荷分析和功能研究的细胞体系尤为有意义11,21,22。本实验方案（图1）详细描述了获取纯培养的 E. granulosus 幼虫阶段的方法及其促进小细胞外囊泡（sEV）生成的条件。同时，方案还阐述了这些囊泡的分离与表征流程，以及其被小鼠树突状细胞摄取的过程——这是研究宿主免疫系统调控机制的初始阶段中至关重要的一步。

<table><tbody><tr><td>1.5 mL 离心管</td><td>Henso</td><td>N14059</td><td></td></tr><tr><td>24孔板&amp;nbsp;</td><td>JetBiofil</td><td>CAP011024</td><td>聚苯乙烯，平底，无菌</td></tr><tr><td>6孔板&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td><td>Henso Medical Co. Ltd.</td><td>N14221</td><td>平底，聚苯乙烯材质，无菌</td></tr><tr><td>70 mm 聚丙烯细胞筛</td><td>Biologix集团有限公司</td><td>15-1070</td><td>无菌的</td></tr><tr><td>阿尔新蓝 8 GX 染料&amp;nbsp;</td><td>Santa Cruz</td><td>sc-214517B</td><td></td></tr><tr><td>自动 CO&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt; 培养箱</td><td>Nuarire</td><td>UN-5100E/G DH</td><td></td></tr><tr><td>牛血清白蛋白</td><td>维纳实验室</td><td>1443151</td><td></td></tr><tr><td>CD11c 单克隆抗体-PECy5&amp;nbsp;&amp;nbsp; 100 &amp;micro;g</td><td>eBioscience</td><td>15-0114-82</td><td>克隆（N418）</td></tr><tr><td>CD40 单克隆抗体-FITC 100 &amp;micro;g</td><td>eBioscience</td><td>11-0402-82</td><td>克隆（HM40-3）</td></tr><tr><td>CD80 单克隆抗体-APC 100 &amp;micro;g</td><td>eBioscience</td><td>17-0801-82</td><td>克隆（16-10A-1）</td></tr><tr><td>CD86单克隆抗体-FITC&amp;nbsp; 100 &amp;micro;g</td><td>eBioscience</td><td>11-0862-82</td><td>克隆（GL-1）</td></tr><tr><td>离心</td><td>赛默飞世尔科技</td><td>IEC CL31R 多速</td><td></td></tr><tr><td>共聚焦显微镜</td><td>尼康</td><td>尼康共聚焦显微镜 C1</td><td></td></tr><tr><td>15 mL 圆锥形管，直径 17 x 120 mm</td><td>Citotest</td><td>4610-1865</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma</td><td>107K4034</td><td></td></tr><tr><td>D-葡萄糖</td><td>默克</td><td>1.78343</td><td></td></tr><tr><td>二甲基亚砜&amp;nbsp;</td><td>Anedra</td><td>6646</td><td></td></tr><tr><td>胎牛血清 500 mL</td><td>Sigma-Aldrich&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td><td>12352207</td><td></td></tr><tr><td>流式细胞仪系统</td><td>BD 生物科学</td><td>BD FACSCanto&amp;trade; II</td><td></td></tr><tr><td>折叠毛细管Zeta电位池&amp;nbsp;</td><td>马尔文帕纳科</td><td>DTS1070</td><td></td></tr><tr><td>硫酸庆大霉素盐</td><td>Sigma</td><td>G1264</td><td></td></tr><tr><td>戊二醛溶液</td><td>Fluka</td><td>49630</td><td></td></tr><tr><td>Hepes</td><td>Gibco</td><td>11344041</td><td></td></tr><tr><td>皮下&amp;nbsp; 21 G × 1 针头&quot;25/8</td><td>Weigao</td><td></td><td>无菌的</td></tr><tr><td>皮下&amp;nbsp; 25 G × 5/8 英寸针头&quot;</td><td>Weigao</td><td></td><td>无菌的</td></tr><tr><td>倒置显微镜&amp;nbsp;</td><td>Leica</td><td>DMIL LED 荧光&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>氯胺酮</td><td>霍利迪</td><td></td><td></td></tr><tr><td>脂多糖&amp;nbsp; 5 mg</td><td>Invitrogen</td><td>tlrl-rslps</td><td>来自革兰氏阴性菌大肠杆菌K12的脂多糖。TLR2/4激动剂</td></tr><tr><td>盐酸洛哌丁胺</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>5.08162</td><td></td></tr><tr><td>Medium 199&amp;nbsp;</td><td>Gibco</td><td>11150059</td><td></td></tr><tr><td>亚甲蓝</td><td>Anedra</td><td>6337</td><td></td></tr><tr><td>MHC I类分子（H2kb）单克隆抗体-PE 100 &amp;micro;g</td><td>eBioscience</td><td>12-5958-82</td><td>克隆（AF6-88.5.5.3）</td></tr><tr><td>MHC II类分子（IA/IE）单克隆抗体-FITC&amp;nbsp; 100 &amp;micro;g</td><td>eBioscience</td><td>11-5321-82</td><td>克隆（M5/114.15.2）</td></tr><tr><td>显微镜</td><td>Olympus</td><td>CX31</td><td></td></tr><tr><td>小鼠重组鼠源 Flt3L</td><td>PrepoTech</td><td>250-31L-10UG</td><td></td></tr><tr><td>Nanodrop</td><td>赛默飞世尔科技</td><td>ND-One</td><td></td></tr><tr><td>多聚甲醛</td><td>Agar Scientific</td><td>R1018</td><td></td></tr><tr><td>青霉素G钠盐</td><td>Sigma</td><td>P3032-10MU</td><td></td></tr><tr><td>PKH26</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>MINI26</td><td></td></tr><tr><td>磷酸二氢钾</td><td>Timper</td><td></td><td>磷酸盐缓冲盐水（PBS）</td></tr><tr><td>红细胞裂解缓冲液 100 mL</td><td>罗氏</td><td>11814389001</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 培养基&amp;nbsp; 1640 1x 500 mL</td><td>Sigma-Aldrich (Gibco)</td><td>11875093</td><td></td></tr><tr><td>二甲胂酸钠&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C0250</td><td></td></tr><tr><td>氯化钠</td><td>Anedra</td><td>7647-14-5</td><td>磷酸盐缓冲盐水（PBS）</td></tr><tr><td>磷酸氢二钠（无水）p. a.</td><td>生物包</td><td>1639.07</td><td>磷酸盐缓冲盐水（PBS）</td></tr><tr><td>硫酸链霉素盐</td><td>Sigma</td><td>S9137</td><td></td></tr><tr><td>10 mL 注射器</td><td>不来梅</td><td></td><td>无菌的</td></tr><tr><td>厚壁聚碳酸酯管</td><td>贝克曼库尔特</td><td></td><td>13 × 55 毫米，标称容量 4 毫升</td></tr><tr><td>透射电子显微镜</td><td>Jeol</td><td>JEOL JSM 100CX II</td><td></td></tr><tr><td>超速离心机</td><td>贝克曼</td><td>Optima LE-80k&amp;nbsp;</td><td>90 Ti 转子</td></tr><tr><td>赛拉嗪</td><td>里士满</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Zetasizer Nano&amp;nbsp;</td><td>Malvern&amp;nbsp;</td><td>Nano ZSizer-ZEN3600</td><td>进行动态光散射和Zeta电位测量</td></tr></tbody></table>

小细胞外囊泡的分离及其树突状细胞摄取 细粒棘球绦虫

Isolation And Dendritic Cell-Uptake of Small Extracellular Vesicles from Echinococcus granulosus

绦虫分泌的细胞外囊泡对于寄生虫之间以及与宿主组织之间的细胞通讯至关重要。特别是小细胞外囊泡（sEVs）可作为纳米级载体，传递天然抗原，在宿主免疫调节和寄生虫存活中发挥关键作用。本文提供了一种从绦虫幼虫阶段培养物中分离sEVs的逐步实验方案 细粒棘球绦虫 并分析这些物质被从小鼠骨髓获得的树突状细胞的摄取情况，这些细胞在培养一周后成熟，获得黏附能力和抗原呈递能力 体外 培养。本文提供了利用超速离心法生成、纯化和定量小细胞外囊泡（sEVs）的全面信息，并结合动态光散射和透射电子显微镜进行平行分析。此外，还详细阐述了一种实验方案，用于分离和培养小鼠骨髓细胞，并通过Flt3L诱导其分化为树突状细胞。这些树突状细胞可将抗原呈递给初始T细胞，从而调节免疫反应的类型 体内因此，建议采用包括共聚焦显微镜和流式细胞术分析在内的替代性实验方案，以检测先前暴露于寄生虫sEVs的树突状细胞所获得的成熟表型。最后值得注意的是，所述方案可整体或分步应用于开展寄生虫相关研究 体外 培养、分离细胞外囊泡，建立骨髓来源树突状细胞培养物，并利用这些细胞进行摄取实验。

总结维持纯培养物主要步骤的流程图 E. granulosus 幼虫阶段、sEVs 的分离与表征及其被小鼠树突状细胞摄取的过程如图所示 图1. 为实现高产量的小细胞外囊泡（sEV）制备 E. granulosus 原头蚴和中绦期幼虫，一种 体外 采用实验室先前建立的培养方法，以最大限度地提高所研究寄生虫的存活率和代谢稳态图2).
<img alt="细粒棘球绦虫囊泡分离与分析；示意图展示了流式细胞术和共聚焦显微镜操作步骤。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67559/67559fig1v2.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="图1"> 
图1：获取实验样品的实验流程概述 E. granulo...

本文描述了in vitro条件下多房棘球绦虫（Echinococcus granulosus）的培养条件、外泌体（EVs）的分离及其产量的提升。采用动态光散射和透射电子显微镜对外泌体中的小型EVs进行表征。通过共聚焦显微镜和流式细胞术研究了骨髓来源树突状细胞对EVs的摄取及其表型调控作用。

绦虫分泌的细胞外囊泡对于寄生虫之间以及与宿主组织之间的细胞通讯至关重要。在……

我们的研究聚焦于细粒棘球绦虫分泌的细胞外囊泡的特征及其在寄生虫-宿主相互作用中的作用。我们探讨了这些囊泡被宿主树突状细胞摄取的情况及其对免疫调节的潜在影响。我们已证实，细粒棘球绦虫的细胞外囊泡可被树突状细胞摄取，进而影响其成熟过程及抗原呈递功能。我们还鉴定了囊泡内容物中的关键免疫调节蛋白和抗原蛋白，这些蛋白可能影响寄生虫与宿主之间的相互作用及免疫应答。本方案优化了体外寄生虫培养条件，以增强小型细胞外囊泡（small EV）的产生，确保高质量的分离，并整合树突状细胞实验以研究免疫调节作用。该方案可整体或部分应用。我们未来的研究将探讨细粒棘球绦虫（E. granulosus）来源的细胞外囊泡对免疫反应的体内效应、其作为疫苗组分的潜力，以及其对树突状细胞、巨噬细胞及这些细胞免疫模型的影响。[旁白] 首先，使用70%酒精清洁因包虫病安乐死的小鼠腹侧表面。手术切开腹腔，用剪刀和镊子取出已发育的棘球蚴。然后用镊子将棘球蚴团块转移至无菌培养皿中。如有需要，使用镊子去除结缔组织，使囊泡从棘球蚴团块中释放出来。用含补充剂的PBS在4°C下清洗所获得的棘球蚴。现在，使用所有必需组分配制培养基，并通过轻柔颠倒混匀溶液。将5毫升配制好的培养基转移至每个Leighton管中。将寄生虫加入培养基中，并在37°C下孵育5天，期间不更换培养基。从每个Leighton管中收集寄生虫培养上清液，并转移至15毫升锥形离心管中。在4°C下以300×g离心10分钟，将上清液转移至新的15毫升锥形离心管中。接着，在4°C下以2,000×g离心10分钟。使用移液器将所得上清液转移至新的1.5毫升离心管中。在4°C下以10,000×g离心30分钟，以去除较小的细胞碎片。使用移液器将上清液转移至适合超速离心转子的离心管中。用记号笔标记管壁一侧，并将离心管放入转子中，使标记侧朝上。在4°C下以100,000×g离心1小时。迅速倒出上清液，将离心管倒置静置1分钟。用至少3毫升PBS洗涤沉淀，以去除污染蛋白。使用移液器沿离心管内壁反复吹打重悬沉淀，重点处理预计沉淀位于的标记侧。重复超速离心后，将沉淀重悬于30微升PBS中。将重悬的样品转移至1.5毫升离心管中，并将细胞外囊泡在-80°C下冷冻保存。在将5至8周龄雌性CF-1小鼠安乐死后，先用乙醇喷洒其体表，再将其放入组织培养超净台中。将小鼠仰卧位放置于解剖板上。使用镊子和解剖剪，在尿道上方做垂直T形切口，并向两侧下肢顶端水平延伸。用镊子沿后肢两侧分离皮肤，暴露腿骨及周围组织。用手从踝部向腹部方向推挤，将每条腿的皮肤拉至对侧，使双侧腿部完全去皮。现在，使用剪刀和镊子小心取出股骨和胫骨，确保骨骼不发生断裂。用镊子夹住每根骨骼的末端，剪断肌腱以去除骨骼周围的肌筋膜。用纸巾彻底清理残留的肌肉组织。将每根取出的骨骼放入含有2毫升含补充剂的完全RPMI培养基的无菌50毫升离心管中，以去除碎片。弃去培养基后，用70%乙醇洗涤骨骼两次，每次5分钟。将洗涤后的骨骼转移至无菌培养皿中，使用锋利的解剖剪剪除两端骨骺，以暴露骨髓细胞。使用连接在含完全培养基的20毫升注射器上的25号针头，小心冲洗四根骨骼中的骨髓细胞，使其流入无菌培养皿中。然后通过移液轻柔均质化含有骨髓细胞的培养基，以去除骨结缔组织和细胞团块。将样品转移至无菌50毫升锥形离心管中，使细胞通过无菌70微米聚丙烯细胞滤器，以去除结缔组织和骨碎片。在4°C下以450×g离心7分钟。小心移除并弃去上清液，确保沉淀仍附着于管壁。将细胞在室温下孵育1分钟后，用500微升红细胞裂解缓冲液重悬细胞，并加入3毫升完全培养基中和裂解缓冲液。在4°C下以450×g离心7分钟。弃去上清液，将沉淀重悬于5毫升完全培养基中。按上述方法过滤样品后，使用血细胞计数板对细胞进行计数。向培养基中添加300纳克/毫升重组小鼠FMS相关酪氨酸激酶3配体（FLT3L）。将细胞以每毫升1×10⁶个细胞的浓度接种至多孔板中。在37°C、含5%二氧化碳的湿润环境中孵育7天。第3天时，从每孔中移除1毫升培养基（不扰动细胞），并补充1毫升预温的新鲜完全培养基，其中含150纳克/毫升重组小鼠FLT3L。从细粒棘球绦虫幼虫期纯化的细胞外囊泡（EVs）主要为小EVs，粒径范围为50至200纳米，经动态光散射和透射电子显微镜确认。骨髓来源的树突状细胞在7天内表现出形态学分化，从最初的小型圆形造血细胞逐渐转变为具有胞质突起的星状细胞。孵育1小时后，树突状细胞摄取了荧光标记的小EVs，共聚焦显微镜显示这些EVs与内体-溶酶体区室中的MHCII分子共定位。

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Research

科研

JoVE Journal

Immunology and Infection

免疫学与感染

细粒棘球蚴小细胞外囊泡的分离和树突状细胞摄取

来源：Watson, D. C., et.al. 大肠杆菌及其他细菌来源细胞外囊泡的可扩展分离与纯化. J. Vis. Exp.

细菌外膜来源的胞外囊泡的分离与富集

本视频介绍了一种基于尺寸排阻色谱法（SEC）的方法，用于分离源自脑免疫细胞——小胶质细胞的细胞外囊泡（EVs）。这些细胞外囊泡作为分子载体，可递送调节免疫反应的介质。因此，分离得到的细胞外囊泡可用于构建体外模型，以研究神经免疫反应过程中小胶质细胞与神经元之间的相互作用。...

基于SEC的分离小胶质细胞来源细胞外囊泡技术：从小胶质细胞条件培养基中分离细胞外囊泡的方法

关键词：SEC，小胶质细胞，细胞外囊泡，条件培养基，分离方法

人们对了解派尔集合淋巴结（Peyer's patches, PPs）中特定细胞亚群的免疫学功能日益关注，PPs 是肠道相关淋巴组织的主要诱导部位。本文概述了制备 PP 单细胞悬液用于流式细胞术分析以及制备 PP...

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本方案详细介绍了通过一系列酶消化步骤从人胸腺中分离抗原提呈细胞的方法，随后对单细胞悬液进行密度梯度离心，最后通过磁珠分选和/或荧光激活细胞分选（FACS）分离目标细胞群体。...

从人胸腺中分离髓系树突状细胞和上皮细胞

本文介绍了一种从女性生殖道不同解剖区域分离和纯化树突状细胞的方法，用于评估其表型和功能特征。该方法可经适当调整，用于从其他黏膜组织中分离其他免疫细胞或树突状细胞。...

从人类女性生殖道中分离树突状细胞用于表型与功能研究

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成体细胞外囊泡的分离与表征 日本血吸虫

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免疫细胞来源的细胞外囊泡的表征及其对细胞微环境功能影响的研究

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Echinococcus granulosus 棘球蚴小体的瞬时转导

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可扩展的细胞外囊泡分离与纯化方法 大肠杆菌 及其他细菌

本方案提供了在从细胞培养上清液中分离细胞外囊泡时如何避免内毒素污染以及如何对其进行正确评估的指导。...

低内毒素含量的癌细胞系来源细胞外囊泡的分离

了解细粒棘球蚴小细胞外囊泡的分离方法及其被树突状细胞摄取的过程。本研究通过动态光散射和共聚焦显微镜技术，揭示了寄生虫与宿主免疫系统的相互作用机制。

小细胞外囊泡的分离及其树突状细胞摄取细粒棘球绦虫

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