在小鼠骨髓损伤模型中通过膜内骨化研究产后成骨的改进方法

我们的研究重点是使用骨髓损伤模型了解骨修复机制。我们的目标是揭示愈合过程中膜内骨化如何调节，并探索可用于增强骨再生的治疗方法。该领域最近的研究建立了定义骨骼干和祖细胞的表面标志物，揭示了它们在骨骼发育和修复中的关键作用。

我们的协议能够研究这些细胞在膜内骨化过程中的贡献，这使我们能够探索它们在骨修复过程中的调节和治疗靶向的潜力。我们的方案使用具有临床意义的模型解决了在产后背景下仅通过膜内骨化来理解骨修复的差距。与用于研究膜内骨化的其他损伤模型相比，我们的方案提供了更可控的环境和可重复的损伤反应，特别是在长骨中。

未来，我们的实验室将利用骨髓损伤模型和局部药理学方法来瞬时调节成骨的表观遗传调节因子。我们的目标是通过新颖的治疗方法来促进骨骼再生和愈合。首先，使用临床级消毒清洁剂准备和消毒所有工作表面。

用无菌手术垫盖住加热平台。收集并整理所有无菌器械和试剂。现在，使用精密天平称量鼠标。

根据丁丙诺啡的可用配方，计算镇痛药给药所需的体积。麻醉鼠标后，小心地将其从诱导室中取出。将动物仰卧放在无菌手术垫上，并将鼻锥套在小鼠的头上。

将鼠标短暂地从鼻锥中取出，并通过皮下途径注射计算剂量的缓释丁丙诺啡镇痛药。然后小心地将鼠标放回鼻锥麻醉装置中。将装有 26 号针头的 3 毫升注射器装满无菌盐水，然后将其放在一边。

从后肢去除毛皮，在那里将使用电动或电池供电的剪刀进行手术。使用无菌棉签涂抹器，将 10% 聚维酮碘磨砂膏涂抹在手术部位，然后涂抹 70% 异丙醇磨砂膏，让该区域完全干燥。现在将鼠标放在它的背上并弯曲手术腿的膝盖。

用非惯用手握住腿部，使膝盖弯曲在中指上。第二根手指放在股骨上，拇指放在胫骨上。使用手术刀，在髌骨正下方做一个小而浅的水平切口。

将针头水平放置在弯曲的膝盖上，找到关节间隙，并感觉股骨和胫骨之间的空间。使用此解剖指南，用 25 号针头从膝盖向近端手动钻入股骨远端。将针头穿过髌骨或围绕髌骨插入。

用 X 光片确认针头在髓腔中的正确位置，确保它尽可能靠近中心。取出 25 号针头后，立即将 26 号针头插入骨髓腔内的同一孔中。以圆周运动至少五次铰孔髓腔的侧面，直到感觉光滑。

然后取出 26 号针头，用 1.5 到 2 毫升生理盐水冲洗腔体，直到回流畅通。将注射器和针头安全地丢弃在指定的容器中。接下来，使用局部粘合缝合线闭合皮肤伤口。

手术后，立即按照之前计算的缓释丁丙诺啡的剩余剂量给药。监测加热垫上的动物是否有正常、畅通的呼吸迹象。