Name: Çiğneme Böcekler A. thaliana Direnç Test seçimi ve No-Choice Tahliller (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-05-14T16:15:00.000+00:00
Duration: 8 min 24 s
Description: Keşfedin Arabidopsis thaliana bitkilerinde Pieris rapae tırtıllarına karşı direnç testleri için seçim ve seçimsiz deney yöntemlerini. Jasmonik asit ve glukozinolatların bitki savunma mekanizmalarındaki rolünü öğrenin.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

No Choice Deney: <ol><li> Dikkatle, bir plastik bardak ilgi Arabidopsis bitki içine alın. Bu durumda: Col-0 (WT) ve JA üretimi bozulmuş bir mutant. Yapraklara zarar sınırı emin olun. Bunun için ben, bu fırça arka kullanın. </li><li> Lahana koloni taze yumurtadan larva almak için ince bir fırça kullanın. </li><li> Arabidopsis bitkiler üzerinde larva dikkatlice yerleştirin. </li><li> 4 gün, 7, 10 Kilo larva. İPUCU: vejetatif büyümeyi artırmak için (1 larva 1 bitki tam yaşam döngüsü yerine) kısa günün koşulları (8 saat ışık) altında bitkiler büyümek. </li></ol> Seçimi Deney: <ol><li> İki bitkiler, her biri bir genotip seçilir. Tepsi etkileri gibi diğer faktörler, vb sınırlamak için, aynı potada bitkiler büyümek için </li><li> Bir kelebek kafes bitkiler yerleştirin. </li><li> Doğurgan kadın seçin. Ben genellikle, aktif yetiştirme koloni yumurtlayarak bir kadın yakalamak. </li><li> 24 saat için iki bitki seçimi ile kafes kadın bırakın. </li></ol> İpucu 1: sonraki seçmeli testler için bir öğrenme etkiler ortadan kaldırmak için, kadın yeniden yoktur. İPUCU 2: Bir tek benzer bir büyüme fenotipi bitkileri karşılaştırın. Alternatif olarak, her genotip Erlenmeyer şişesinin üstünde bir yaprak montaj ve kendi çekiciliğini bir kadın karşılaştırın. <a href="http://arjournals.annualreviews.org/doi/abs/10.1146/annurev.arplant.59.032607.092825">Bitki Biyoloji Yıllık Yorumları</a> ziyaret ediniz böcek herbivory bu protokol ve bitki bağışıklık hakkında daha fazla bilgi için.

Çiğneme böcekler a. thaliana direnç test seçimi ve no-choice tahliller

Choice and No-Choice Assays for Testing the Resistance of A. thaliana to Chewing Insects

Küçük beyaz lahana kelebek Larva tarım ayarlarında bir haşere. Bu tırtıl türler, lahana gibi birçok ürün lahana aile bitkiler, yemler, böceklerin brokoli, Brüksel lahanası vb Yetiştirme sera lahana bitkiler yer alır. Pieris rapae yetiştirme için en az iki kafesleri ihtiyaç vardır. Bir larva ve yetişkin, kelebekler içeren diğer. Bitki hormonları ve bu böcek haşere direnç zehirli bitki kimyasalları rolünü araştırmak amacıyla, iki deneyler göstermektedir. İlk olarak, çiğneme böcek Pieris rapae direnç Jasmonik asit (JA genellikle böceklerin direnç belirtilen bir bitki hormonu) rolünün belirlenmesi. Caterpillar büyüme JA üretiminde engelli yabani tip ve mutant bitkiler mukayese edilebilir. Larvaları sentezler veya eksik JA tek bir bitki varlığını zorunda çünkü bu deney, &quot;No Choice&quot; olarak kabul edilir. İkincisi, biz yöntemlerinin koloni (yumurtlama) sinyalleri olarak kullanılır glukosinolat, rolünü araştıran bir deney göstermektedir. Burada, dişi kelebekler yumurtalarını bırakmak için her iki genotip bitkiler üzerinde izin verilen bir &quot;Seçim&quot; deney glukosinolat üretim engelli WT ve mutant Arabidopsis kullanın. Bu video için deney düzeneği hem testlerin yanı sıra temsilcisi sonuçları göstermektedir.

Çiğneme böcek otçul bitki direnci çeşitli şekillerde test edilebilir. Burada, bir seçim ve haşere türü Pieris rapae karşı direncini belirlemek için model bitki Arabidopsis thaliana ile hiç tercih deney set-up nasıl göstermek.

Çiğneme Böcekler A. thaliana Direnç Test seçimi ve No-Choice Tahliller

Küçük beyaz lahana kelebeği larvaları, tarımsal ortamlarda bir haşeredir. Bu tırtıl türü, lahanagiller ailesindeki bitkilerle beslenir ve bu durum...

Küçük beyaz lahana kelebeğinin larvaları tarımsal ortamlarda bir zararlıdır. Bu tırtıl türü, lahana, brokoli, Brüksel lahanası ve diğer birçok ürünü içeren lahanagiller ailesindeki bitkilerle beslenir. İlginç bir şekilde, bitkiler herbi force gibi bitki yiyenlere karşı direnç geliştirebilir ve bu videoda, model bitki türü rabbit opposite Ana'nın bu doku, Jin böceğine karşı direncini iki yöntem kullanarak test edeceğiz.Merhaba, ben Martin Navos; Bo Thompson Planlı Araştırmalar Enstitüsü'nde, George Jander'in laboratuvarında doktora sonrası araştırmacıyım. Bugün size, zararlı besleyicilere karşı direncin araştırılmasında model bitki olarak Arab Opsis Ana kullanılarak seçimli ve seçimsiz bir deney düzeneğinin nasıl kurulacağını göstermek istiyorum.Tırtılların yetiştirilmesi sera ortamındaki lahana bitkileri üzerinde gerçekleştirilir. Tırtılların yetiştirilmesi için en az iki kafes gereklidir. Bitki hormonlarının ve toksik bitki kimyasallarının etkisini göstermek amacıyla, kafeslerden biri larvalar için ayrılmalı, diğeri ise yetişkin kelebekleri içermelidir.Bu böcek direnci testi kapsamında, iki deneyi göstermek istiyorum. İlk deney, böceklere karşı dirençte sıklıkla rol oynadığı belirtilen bir bitki hormonu olan jasmonik asidin rolünün belirlenmesini içerecektir.Seçeneksiz bir deneyde, tırtıl gelişimi yaban tipi bitkiler ile sadece jasmonik asit üretimi bozulmuş mutant bitkiler arasında karşılaştırılabilir. Hipotez, larvaların mutant bitki üzerinde daha fazla kilo alacağı yönündedir. Öyleyse ilk deneyle başlayalım.Bitkilerle, yani Revit opsis elliana ile, purest rapha larvalarının ağırlık artışını ölçmek için bir seçeneksiz deney gerçekleştireceğiz. İlk olarak yapmamız gereken, bu bitkileri dikkatlice kapatmaktır. Bu plastik bardaklardan birinin alt kısmını kestik.Bu nedenle, kapatma işlemi için bu ince boya fırçasının arka ucunu kullanıyorum. Yapraklara zarar vermeden bu bitkileri kapatacağız. Burada rabbit opss, yaban tipi ve mutant bitki arasında bir seçeneği olmayan deneyimiz bulunuyor.Mutant, jasmonik asit eksikliği olan bir mutanttır ve muhtemelen beslenmeye karşı daha hassastır. Tek bir larvanın yalnızca tek bir bitki genotipine erişebilmesi nedeniyle bu bir seçimsiz deneydir. Bu nedenle, her bir kaba birer larva ekleyeceğiz.Yeni çıkmış larvalarla başlamak önemlidir. Bunlara L1 larvaları denir. İşte burada henüz yeni çıkmış olan bir larva var.Şimdi, bu larvayı test bandına dikkatlice yerleştireceğim. Bir sonraki adım, bu bitkileri içlerindeki tek larva ile birlikte kapatmaktır; larvaların dışarı sürünerek çıkmaması için kapatma işlemini ince bir ağ ve oleik bant kullanarak yapıyorum. Ardından, larva ağırlık artışını ölçmeden önce genellikle yedi gün, birkaç gün bekliyoruz.Yedi günlük beslemeden sonra, larvaları çıkarıp bu terazide tartıyoruz; larvaları dikkatlice almak için esnek pens kullanıyoruz ve ağırlıklarını kaydedeceğiz. Bu örneğin ağırlığı yaklaşık 250 mg. Mutant bitki üzerindeki bu tırtılın ağırlığını, yabanı tip bitki üzerindeki tırtılın ağırlığıyla karşılaştıracağım.Hemen görebileceğiniz üzere, yaban tipi bitkiden çok daha fazla bitki dokusu kalmış. Bu nedenle larva ile ilgili olarak, daha az ağırlık kazandığını varsayıyoruz. Yaban tipi bitki üzerindeki larva sadece yaklaşık yüz miligram ağırlığındadır.Böylece, hem tüketilen doku miktarı hem de larvaların ağırlık artışı bakımından büyük bir fark söz konusudur. Seçeneksiz deneyle ilgili anlatacaklarım bu kadar. Seçenekli deneye geçelim, ne dersiniz?Uzman zararlılar, genelci zararlılar için toksik olan konakçı ipuçlarını tanımlar ve bunlara çekilirler. Pi durumunda, hızlı glukozinolatlar bir konumlandırma sinyali olarak kullanılır. Burada, glukozinolat üretimi bozulmuş yabani tip ve mutant rabbit opsis kullanacağım.Bir seçim deneyini göstermek için, bu deneye başlamadan önce erkek ve dişi kelebekleri ayırt edebilmek gerekir. İşte bir örnek: dişi bureaus rapid kelebeklerin her kanadında iki nokta bulunurken, erkekler sadece bir tane taşır; bazen erkekler, eğer ikinci ve genellikle belirsiz bir işarete sahiplerse, dişiyle karıştırılabilirler. Öyleyse seçim deneyini kuralım.Bu vakada, hem yabani tip hem de mutant bir bitkimiz bulunmaktadır. Mutant bitkinin glukozinolat üretimi bozulmuştur. Glukozinolatlar, genel beslenen erken raporlar için toksik olsa da, üzerinde çalıştığımız bu pra gibi uzman türler glukozinolatlara ilgi duyar.Böylece bunlar, en küçük olan L1 birinci larva evresiyle başlayan ve beşinci larva evresine kadar kilo almaya devam eden, penis ape'nin beş larva evresidir. Ardından pupa evresine dönüşürler, tam dönüşüm gerçekleşir ve bu larvalar yetişkin kelebeklere dönüşür. Bu seçim deneyi için, içine hem yabani tip hem de mutant bitkiyi yerleştirdiğim bu kafesi kullanıyorum ve şimdi buraya bir dişi kelebek ekleyeceğim.Acai değerlerini değerlendirmek için genellikle fertil olan dişileri yakalarım. Fertil olduklarından emin olmak için aktif olarak yumurta bırakan dişileri yakalarım, elimi dikkatlice etrafına yerleştirip test kafesine aktarırım. Kelebeği orada 24 saat boyunca tutarız ve ardından bu genotiplerin her birine bırakılan yumurta sayısını sayarız.Bu tür deneyler yaparken bazı faydalı ipuçları şunlardır: İlk olarak, bir dişi kelebek seçtiğinizde, öğrenme etkisi oluşabileceği için onu sonraki deneylerde kullanmayın. İkinci olarak, yalnızca benzer büyüme fenotiplerine sahip bitkiler karşılaştırılabilir. Dolayısıyla, benzer büyüme fenotipine sahip olmayan bitkileriniz varsa, benzer büyüklükte yapraklar alıp bunları bir LMI flaskının üzerine monte edebilirsiniz.24 saat geçtikten sonra, öncelikle bitkileri dışarı çıkarabiliriz. Gördüğünüz gibi, yabani tip bitkinin üzerinde çok sayıda yumurta var; glukozinolatlardan yoksun olan mutant bitkide ise durum farklıdır. Dolayısıyla bu bitki, bir uyarıcı pozisyonundan veya acı uyarandan yoksundur.Gördüğünüz üzere, en azından mutant bitkide neredeyse hiç yumurta yok veya çok az yumurta var. Öte yandan, yabani tip bitkide çok sayıda yumurta bulunuyor. Böylece, böceklere karşı direnci belirlemek için deneylerin nasıl kurulacağını göstermiş oldum.İlk deney, seçeneğin olmadığı (no-choice) bir deneydi. Bu deneylerde, mutant ile yabanıl tip bitkiler üzerindeki larval ağırlık artışını karşılaştırdık. İkinci deney ise bir seçim (choice) deneyidir.Bir dişi kelebeğin mutant ile yabanıl tip bir bitki üzerindeki acla değerlerini karşılaştırdık. Çok teşekkürler. Hepsi bu.Deneyleriniz için faydalı olmasını umuyorum.

choice-no-choice-assays-for-testing-resistance-thaliana-to-chewing

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu video test gösterilmiştir nikotin değil saha ve bir tütün bitkileri infests aphids bir iki tür tolerans testleri.

Yapay Diyet Deney kullanarak Yaprak bitleri Nikotin Tolerans Testi

Bu video herbivory konak bitki direnç mekanizmaları açıklar ve direnç spittlebug Antibiyoz ve hoşgörü göreceli katkıları tahmin no-seçmeli test...

Karakterize Otobur Direnç Mekanizmaları: Spittlebugs Brachiaria Spp. Bir Örnek

Bu video, tercih edilen maddenin yutulmasından sonra sineğin karın rengini değerlendirerek farklı tada sahip renkli solüsyonlara karşı çekiciliği veya kaçınmayı ölçmek için kullanılan davranışsal bir yöntem olan tat tercihi testini açıklar. Öne çıkan protokol, sineklerin değişen sakaroz konsantrasyonlarına sahip çözeltilere yönelik tercihini ölçmek için kullanılan prosedürü göstermektedir.

Tat tercihi testi: Drosophila'da beslenme davranışını ölçmek için bir yöntem

Dikey bir T-labirent salgılanan eklembacaklıların davranışsal tepki içlin tarif edilmektedir. Salgılanan iki potansiyel koku alanlara maruz kaldığında deneyci denekler tarafından gerçekleştirilen seçimler ölçmek için sağlar. Her ikisi için çekim ve koku maddesi arasından itme bu cihaz ile ölçülebilir.

Koku için Arthropod Tepki için Dikey T-labirent Seçim Testi

Tat, faydalı maddelere çekilmeyi ve toksik maddelerden kaçınmayı kolaylaştıran önemli bir duyusal süreçtir.  Bu protokol, belirli bir kimyasal bileşik için Drosophila tat tercihini belirlemek için basit bir yutma testini tanımlar.

Yetişkin için tat Tercihi Testi<em&gt; Drosophila</em

Burada, organizmanın iyi beslenmiş bir beslenme durumundan aç kalmış beslenme durumuna geçmesiyle bakırdan kaçınma davranışındaki ve ortak bir besin kaynağını bulma yeteneğini değerlendirmek için tasarlanmış Caenorhabditis elegans spesifik bir analiz sunuyoruz.

bir<emCaenorhabditis elegans</emBeslenme Durumuna Dayalı Bakır Kaçınma Deneyi

Nematodun, Caenorhabditis elegans'ın , nüfusa dayalı bir deneyde çözünür bileşikler için tercihinin otomatik analizini sağlayan bir davranış kayıt kurulumu ve protokolü sunuyoruz. Bu makale bir davranış odasının inşasını, davranışsal analiz protokolünü ve video analiz yazılımının kullanımını anlatıyor.

Nematod Popülasyona Dayalı Kemoterapi Tercihi Testinin Otomatik Analizi

Burada, Ectropis grisescens olgun larva toprak faktörler (Örneğin, substrat tipi ve nem içeriği) karşılık olarak pupation tercih araştırmak için bir protokol mevcut seçim biyoanalizler kullanarak. Biz de hayır-seçim biyoanalizler pupation davranışları etkileyen faktörleri belirlemek için bir protokol ve yaşayanlar, mevcut E. grisescens.

Seçim ve No-seçim biyoanalizler Pupation tercih ve Ectropis grisescens başarısı ortaya çıkması

Sunulan yöntem, Manduca Sexta larvası uygulama aracılığıyla doğal otobur hasarlı bitki dokusu oluşturur patates ayrılmış yaprakları. Bitki dokusu böcek herbivory erken tepkiler dahil altı transkripsiyon faktör homolog ifadesi için farklı teknik kullanılarak.

Müstakil yaprak özendirme, Çiğneme böcek Manduca Sexta tarafından Infestation sırasında patates gen Ifade çalışmaları basitleştirmek için

Sinekler için iki seçenekli bir besleme tahlilleri için bir protokol sunuyoruz. Bu besleme testini çalıştırmak hızlı ve kolaydır ve sadece küçük ölçekli laboratuvar araştırmaları için değil, aynı zamanda sineklerdeki yüksek verimli davranışsal ekranlar için de uygundur.

Drosophila&apos;da Hızlı Bir Yemek Tercihi Tahlil

Bu protokol, bir fitokimyasalın lepidopteran böcek larvaları üzerindeki potansiyel toksik etkisini değerlendirmek için zorunlu besleme testini açıklar. Bu, öldürücü ve öldürücü dozu, caydırıcı aktiviteyi ve fizyolojik etkiyi optimize etmek kolay, oldukça ölçeklenebilir bir böcek biyo-tahlilidir. Bu, çevre dostu böcek ilaçlarını taramak için kullanılabilir.

Fitokimyasalların Helicoverpa armigera Üzerindeki İnsektisidal Etkisinin Değerlendirilmesi için Beslenme Deney Sistemi Geliştirilmesi

Keşfedin Arabidopsis thaliana bitkilerinde Pieris rapae tırtıllarına karşı direnç testleri için seçim ve seçimsiz deney yöntemlerini. Jasmonik asit ve glukozinolatların bitki savunma mekanizmalarındaki rolünü öğrenin.

Çiğneme Böcekler A. thaliana Direnç Test seçimi ve No-Choice Tahliller

Daha fazla video keşfet