基于乙醇的导管内消融输注预防兔模型乳腺癌的 X 射线可视化

乳腺癌是第二大癌症相关死因。虽然很少有针对中危女性的主动干预措施，但预防性乳房切除术和激素治疗是高危女性的可用选择。然而，由于这些预防性选择的严重负面副作用，许多高危女性选择不服用它们。

因此，需要针对高危人群采取新的预防策略。我们开发了一种导管内递送技术，用于消融乳腺癌产生的记忆上皮细胞，作为乳房切除术的局部、侵入性较小的替代方案。我们之前的研究表明，单次导管内输注 70% 乙醇在侵袭性小鼠模型中预防乳腺癌形成的有效性。

我们能够将此程序扩大到大鼠模型，并通过显微 CT 确认输注的成功。尽管我们已经在小鼠和大鼠模型中展示了导管树的填充和体内X射线成像，但这些模型每个乳腺只有一个导管树。因此，在此过程中，我们将在具有多导管树系统的兔子模型中解决该技术的可扩展性。

兔为这种 ID 消融程序在人类身上的转化应用提供了实用且相关的中间大型动物模型。简而言之，我们首先通过去除要注射的周围的皮毛来为动物准备手术，然后进行导管内输注，每次输注后，拍摄 X 射线透视图像以确保导管树已被填充。最后，进行组织分析以确定消融溶液的成功率。

在异氟醚给药前 20 分钟通过肌肉注射麻醉剂镇静兔子。我们使用了氯胺酮和甲苯噻嗪。在出现镇静临床症状后注射镇痛剂。

我们使用了酮洛芬。将兔子放在衬有循环温水毯的成像台上，并使用适当尺寸的插管管对兔子进行插管，然后将其连接到异氟醚机器上。管子的大小取决于兔子的体重，但并不总是准确的，因此最好手头有多种尺寸。

如果插管无法得到适当的密封，可以使用面罩代替插管。将一根 25 号静脉导管插入兔子的耳朵，以便紧急给药。一旦兔子完全麻醉，剃掉第二对和第三对周围的尾腹。

无绳吸尘器有助于保持输液部位清洁。去除大部分毛发后，在区域周围涂抹脱毛膏，涂抹 15 秒后用湿纱布将其去除。确认良好的能见度和对区域的访问，并在必要时重复。

插管前用洗必泰纱布垫擦拭该区域以清洁注射部位。兔子可能有一个从导管开口突出的塞子，如果不移除，可能会阻止成功插管。使用细尖镊子轻轻去除导管开口处的皮肤层。

将一根 28 号针头，斜面朝上，插入侧面，缓慢注入 0.2 毫升无菌 0.9% 盐水。一些生理盐水可能会从导管开口中喷出。这将允许在插管过程中更好地可视化导管开口。

使用无菌技术准备 12 英寸延长线以进行插管。用乙醇清洁工作台表面，并小心地戴上无菌手套。取下延长线两端的保护盖。

使用一毫升 Luer-Lok 注射器吸出一毫升制备的烧蚀溶液。小心地将注射器连接到雌性有翼端，然后小心地将 27 号钝头针头连接到另一端。慢慢地将溶液推过管线，直到稳定的溶液流从针头中流出。

小心不要倾倒注射器，因为这会导致形成气泡。用拇指和食指轻轻握住，然后稍微抬起以进行导管内输液。使用 27 号钝头针小心地插管感兴趣的导管。

10 倍放大灯可以帮助可视化导管开口。缓慢注入溶液，以尽量减少管道内快速流动的流体造成的潜在损坏。通常，一名研究人员插管并握住针头，而另一名研究人员握住注射器并以所需的速率推动柱塞。

Omnipaque 是一种经 FDA 批准的碘基造影剂，使我们能够在 X 射线透视成像下看到导管树。这使我们能够实时看到导管树被烧蚀溶液填充，并在溶液到达导管树末端时停止输送。透视成像还可以快速轻松地确认输注后整个导管树的成功填充。

在向第三根导管输注的现场过程中，您可以看到导管 1 和 2 已经输注。这种实时成像可指导最大限度地填充导管树。手术完成后，开始通过肌肉注射逆转剂来恢复兔子。

在我们的例子中，我们使用了阿特帕美唑。恢复的迹象包括咀嚼和鼻子抽搐。在让兔子自行恢复之前，请确保兔子能够保持直立。

术后至少三天皮下注射酮洛芬，以帮助减少炎症并尽量减少疤痕。苏木精和伊红染色，或通常称为 H&E 染色，是组织学中最常用的染色剂。有了这个，我们可以看到乳腺内的四个导管开口和导管通路。

在我们的实验中，我们测试了一系列乙醇浓度为 10% 至 70% 的溶液。基于这个浓度范围，我们可以看到，与更高比例的乙醇相比，乙醇含量低于 10% 的烧蚀溶液仍然可以有效地消融导管树。这些结果表明，应优先考虑这种较低的 10% 乙醇烧蚀溶液进行进一步研究。

我们描述了一种图像引导输注到兔乳腺导管树系统的程序。我们通过透视实时成像证明了将含有乙醇基消融溶液的 X 射线造影剂受控输注到所有开口中，并通过组织学分析确认上皮细胞消融和组织损伤的速率。该程序为一种侵入性较小的乳腺癌一级预防方法的可扩展性迈出了一步，作为预防性乳房切除术的替代方案。

该协议使用仪器、试剂和材料进行透视引导下输注含Omnipaque的乙醇基烧蚀溶液，这些溶液与当前导管树可视化的临床实践兼容。因此，所描述的程序可以在第一个人体临床试验中很容易实施和评估。