2025年10月3日
本文介绍了一种无创测量扭矩-角速度-功率关系的新方案 体内 使用经皮肌肉刺激法在大鼠跖屈肌中进行实验。该设置可通过力传感器/长度控制器系统简便地测试等张肌肉收缩,以更真实地模拟日常活动中恒定负荷的特性。
我们的目标是建立一种简单、无创的大鼠体内系统,用于测试肌肉的机械功能,特别是力量(即力与速度的乘积),从而深入了解疾病对肌肉系统的影响。本实验室在肌节发生和衰老机制的研究方面发挥了重要作用。
具体而言,最大离心收缩会如何损害肌节发生,但某些在健康啮齿类动物中的最大收缩却能增加串联肌节数量。目前,我正在使用该系统对去卵巢(OVX)及卵巢完整的雌性大鼠进行离心超负荷训练,以研究雌激素对肌肉收缩功能以及训练反应的影响。在将大鼠麻醉后,将其放置于加热平台上,并确保其鼻部和口部稳固地置于鼻罩内。
持续监测大鼠的呼吸和脉搏频率,以维持安全且稳定的麻醉深度。使用无菌棉签,将眼用软膏涂抹于大鼠双眼,防止手术过程中角膜干燥。使用电动剃刀,剃除大鼠左后肢全部毛发。
接下来,使用棉签将市售脱毛膏均匀涂抹于整个腿部。等待三分钟后,根据需要使用多个棉签将脱毛膏刮除,确保腿部尽可能无毛。然后用蒸馏水浸湿棉球,擦拭腿部整个表面,以清除残留的脱毛膏或碎屑。
用纸巾将腿部擦干,以准备放置电极。现在用手术胶带将大鼠的足部和脚踏板紧密缠绕,以固定足部位置。确保足跟牢固地嵌入脚踏板底部的凹槽中。
根据需要使用调节旋钮三调整脚踏板位置,使其靠近或远离,以尽可能伸展膝关节。然后通过将胫骨夹牢固地推入胫骨近端中部区域来固定小腿。使用调节旋钮一和二,将脚踏板与夹具对齐,以确保正确的位置。
使用镊子将导电凝胶涂抹在两个电极的表面以及大鼠腿部的后侧。为确定电极放置位置,触诊小腿后侧的肌肉隆起处。将远端电极置于腓肠肌下方稍低位置,近端电极置于腓肠肌上端与膝关节相接处。
然后转动齿轮,轻柔地将电极升至与腿部接触,确保刺激接触的一致性。不要施加过大的向上力,并确认固定电极的轴有轻微弯曲,以在刺激过程中保持电极稳定。加载刺激器上的100赫兹、90度刺激程序后,将电流设置为20毫安,以提供低水平刺激,并验证电极或凝胶的位置是否正确。
单击“开始测试”以启动实验方案,并观察可见的肌肉收缩。刺激完成后,单击“分析”,并确保选中基线校正框,以评估产生的扭矩。经过两分钟休息期后,将刺激电流增加至 30 毫安。
重新运行该方案,并在分析部分评估扭矩输出,确认基线校正仍处于选中状态。将刺激电流增加至 40 毫安,再次运行该方案。在休息两分钟后,若 30 毫安时扭矩增加,则将其提高至 40 毫安并重复操作。
如果在40毫安时扭矩下降,则将30毫安设为最佳刺激强度。创建一个刺激方案,在踝关节呈70度角的情况下,诱导产生持续500毫秒、频率为100赫兹的等长收缩。运行该方案并记录收缩期间产生的最大主动扭矩。
在方案界面中,创建一个新方案,将踝关节移至屈曲位置,施加500毫秒的刺激,然后将踝关节恢复至中立位置。计算与先前记录的最大主动扭矩相对应的10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%和80%的等张负荷钳制值。对于每个负荷钳制值,加入基线被动扭矩以确定总钳制力。
以随机顺序运行这些负载夹具的刺激方案。在 DMC 版本 5.5 软件中,进入偏移力输入框,输入此前生成列表中第一个负载夹具对应的计算扭矩值。
加载先前创建的等张模式,运行过程中将自动应用新的偏移力。单击“开始测试”以运行等张协议,从而实现等张收缩。这三种方法均表现出典型的双曲线型力矩-速度关系,即随着力矩增加,角速度下降,且峰值功率出现在中等力矩和中等速度值时。
等张力曲线预测的最大速度显著高于两种等速动力学曲线。与使用平均力矩的等速动力学曲线相比,等张力曲线的峰值功率更高;但在使用峰值力矩时,两者之间无显著差异。使用峰值力矩的等速动力学曲线高估了峰值功率时的力矩,而使用平均力矩的等速动力学曲线则与等张力曲线结果高度一致。
使用平均扭矩时,等速曲线低估了峰值功率对应的速度,即使使用峰值扭矩,该速度仍略有低估。与使用平均扭矩相比,当等速曲线中采用峰值扭矩时,力矩-速度曲线的曲率显著减小。所有模型均与希尔方程具有良好的拟合度,但等张曲线的R平方值略低于两条等速曲线。
本研究介绍了一种非侵入性方案,通过经皮肌肉刺激在活体大鼠跖屈肌中测量力矩-角速度-功率关系。该方法可简便地测试等张肌肉收缩,有助于深入了解肌肉功能及疾病的影响。
对啮齿类动物肌肉模型中的力矩-速度-功率关系进行定量分析,能够为动态肌肉功能提供具有转化意义的见解,支持骨骼肌和代谢疾病研究中的早期靶点验证。在体内比较等张收缩和等速收缩曲线的能力,可提高临床前疗效预测的可信度,并降低机制相关风险。本方案加强了动物模型输出结果与人类相关运动状态之间的联系,为靶向肌肉的治疗研发管线中的项目决策提供依据。
本方案通过实现可靠的体内肌肉功能评估,融入从发现到临床前研究的连续过程,支持早期靶点验证及后续的转化研究。