使用LC-Mate实现高效液相色谱自动化分离：一种用于微量纯化的集成式重复自动进样器与组分收集系统

我们的研究致力于设计一种可直接接入高效液相色谱（HPLC）系统的仪器，以自动化所有繁琐的手动操作步骤。手动进样和组分收集过程极为耗时。LC-Mate 为 HPLC 样品纯化提供了一种跨平台的自动化解决方案。

首先，检查高效液相色谱系统、LC-Mate 与色谱柱之间的溶剂管路连接，以确保流路正确。检查紫外检测器与 LC-Mate 之间信号传输线的连接时，将黑线连接至红色端子，白线连接至黑色端子，以匹配模拟信号输出的极性。观察 LC-Mate 显示屏，确认模拟信号波形出现。

如果未观察到波形，可通过将黑色导线连接至黑色端口、白色导线连接至红色端口来调换导线连接。为检查紫外检测器与LC-Mate之间的触发连接，将数据线的单端插入紫外检测器的输出端口。将数据线另一端的黑色和白色导线分别连接至LC-Mate上的黑色和蓝色触发端口。拧紧端口以确保触发连接牢固可靠。

接下来，确保高效液相色谱（HPLC）系统和LC-Mate正确启动。在界面上点击LC Mate图标，以自动执行系统自检程序并初始化关键硬件模块。等待短暂的提示音响起且自检信息消失，以确认初始化已完成。

设置高效液相色谱分离条件并开始洗脱以平衡色谱柱。在测试界面中输入进样体积、洗脱时间及重复次数，然后按下“开始”图标以启动自动进样器、组分收集器和高效液相色谱系统。确定可行的分离条件，包括分离度、运行时间、保留时间、进样体积和紫外检测波长。

在界面左侧选择阈值功能模块，打开参数设置界面。输入注射体积、重复次数、阈值和洗脱时间，然后按“开始”以启动自动运行。监控状态指示灯。

观察进样过程以确认样品已注入。检查“分离进行中”指示灯，以确认色谱分离正在进行。注意注射器排空指示灯，以确定注射器何时正在排出残留液体。

若要根据时间进行组分收集，请从界面左侧选择时间收集模块以打开参数菜单。输入进样体积、重复次数、洗脱时间以及所需的收集次数。按下“开始”按钮以启动重复的自动化程序。

接下来，在界面左侧选择“采集全部”功能模块。设置一个采集阈值，以分别采集所有色谱峰。对于管路清洗，将自动进样器的进样管插入盛有洁净溶剂的小瓶中。

在界面左侧选择清洗模块以打开参数菜单。然后设置进样体积在0至1000之间，以及进样管路清洗的重复次数。单击“清洗完成”下方的“清洗”以启动进样管路清洗。

监测循环次数以跟踪已完成的洗涤循环。设置收集管路清洗的清洗时间。单击“当前管路”下方的“清洗”以启动收集管路清洗。

监测当前的管道显示，以确认从管道 0 到管道 10 的顺序清洗过程。启用自动保存功能，以便系统在每次洗脱循环后自动保存色谱图。或者，可在洗脱后点击“保存”按钮，手动保存数据。

在对话框中输入元数据后，从本地存储、SD 卡或外部通用串行总线驱动器中选择存储位置。使用 LC-Mate 进行半制备型高效液相色谱分离，可在纯化 2"O-没食子酰基-槲皮苷的过程中实现连续且稳定的样品进样和组分收集。利用 LC-Mate 系统可有效去除少量杂质，获得纯化的 2"O-没食子酰基-槲皮苷。

在根皮苷和三叶苷的纯化过程中，也成功实现了连续且稳定的样品进样和组分收集，表明LC-Mate系统通过大幅减少人工干预显著提高了操作效率。全环进样峰面积的相对标准偏差为0.813%，表明LC-Mate进样的稳定性和重现性极佳。

该系统可实现自动化分离纯化及精确的组分收集，从而提高大规格高效液相色谱（HPLC）工作流程的效率。正确的信号变体、适当的模式选择以及参数设置对于LC-Mate仪器的成功应用至关重要。我们计划提升通道容量，并集成新型检测器，以实现更优的跨平台兼容性。