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本工作得到国家自然科学基金（82273554）、山东省医药卫生科技发展计划项目（No.202304030716）、中国国家大学生创新创业训练计划（No. 202410439001）和泰安市科技创新发展计划项目（No. 2023NS232）的资助。

本研究经山东第一医科大学动物伦理委员会批准 &amp;#38; 山东省医学科学院（W202112030345）。所有方法均依照相关指南和法规进行。
1. 3BDO@MN 贴片的制备
<ol>
	<li>CS/HA 配方的制备
	<ol>
		<li>称取 1 g CS 粉末（脱乙酰度 ≥ 95%），加入 20 mL 蒸馏水中，室温（RT）下搅拌 10 分钟。</li>
		<li>继续加入 0.4 mL 的 2%（v/v）乙酸溶液（分子量 60.05），持续搅拌 2 小时。 
		警告：浓乙酸具有腐蚀性。稀释和操作时应在通风橱中进行，并佩戴一次性手套和护目镜，避免接触皮肤和黏膜。</li>
		<li>继续加入 2 g HA 粉末，然后将混合配方在 1,207 × g（约 3,000 rpm）条件下离心 5 分钟，以确保完全溶解。 
		&#8203;注意：CS/HA 配方应新鲜配制，可在 4 °C 冰箱中保存不超过 24 小时。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>载 3BDO 的 CS/HA 配方的制备
	<ol>
		<li>将预先溶解的 3BDO 溶液（2 mg/mL）加入二甲基亚砜（DMSO）中。 
		警告：DMSO 可穿透皮肤。操作时应佩戴手套，避免直接皮肤接触，并将其加入 CS/HA 配方中。混合以确保完全溶解。</li>
		<li>将混合配方在 1,207 × g 条件下离心 5 分钟，以去除任何夹带的气泡。 
		&#8203;注意：若离心后仍有气泡残留，可让配方静置 5 分钟，再进行一次离心。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>3BDO@MN 贴片的制备
	<ol>
		<li>使用聚二甲基硅氧烷（PDMS）微针模具，其具有 20 × 20 排列的圆锥形针尖，高度为 600 µm，底面直径为 250 µm，间距为 550 µm。</li>
		<li>使用等离子清洗机处理 PDMS 模具表面，使其完全亲水。</li>
		<li>向 PDMS 微针模具中加入 1 mL 的 3BDO@CS/HA 配方。将模具置于真空室中，抽真空 10 分钟，以促进黏稠配方渗入微孔中。</li>
		<li>在室温（RT）下以 134 × g 离心 5 分钟，确保配方填满所有孔腔。使用无菌金属刮刀小心刮除模具表面多余的配方，留下完全平整的表面。</li>
		<li>将不含 3BDO 的 CS/HA 基质混合物涂布于模具表面。在室温下以 134 × g 离心 5 分钟，形成均匀的背衬层。</li>
		<li>将模具置于 36 °C、37% 湿度的烘箱中，干燥过夜（约 12–16 小时）。</li>
		<li>待模具冷却至室温后，从模具上剥离完全干燥的微针贴片。 
		注意：制备好的 3BDO@MN 贴片应保存在 4 °C 冰箱中，直至使用。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. 3BDO@MN 贴片的表征
<ol>
	<li>使用双面导电碳胶带将制备好的 3BDO@MN 贴片固定在样品台上。
	<ol>
		<li>对固定好的样品进行溅射镀金（或铂）处理，形成一层薄金属层，以增强导电性。</li>
		<li>将样品台装入场发射扫描电子显微镜（FE-SEM）的真空腔室中。</li>
		<li>调节加速电压和工作距离，以获得高分辨率图像。观察微针阵列的整体形貌及单根微针的表面精细结构。</li>
		<li>获取具有代表性的扫描电镜图像，并测量微针的长度和针尖直径。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>机械强度测试
	<ol>
		<li>将微针贴片平整地放置在质构分析仪的样品测试台上，确保基底完全平整，针尖垂直向上。</li>
		<li>将一个直径为 25 mm 的平面圆柱形探头牢固地安装在仪器的载荷传感器上。</li>
		<li>垂直下移探头，使其位于微针针尖正上方，但在测试开始前避免探头与针尖发生任何物理接触。</li>
		<li>在软件中设置特定的测试参数：下压速度设为 0.05 mm/s，目标位移距离设为 0.7 mm。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>溶解性测试
	<ol>
		<li>将大鼠背部皮肤平铺在解剖板上，并用吸水纸轻轻吸干皮肤表面，保持皮肤平整无皱褶。</li>
		<li>将干燥的微针贴片针尖朝下放置于皮肤表面，并施加均匀的垂直压力，确保微针插入皮肤。</li>
		<li>在预设的时间点（5、10、30 和 60 秒）将贴片从皮肤上取下，并干燥 5 分钟。</li>
		<li>在相同的成像条件下，通过扫描电镜观察残留微针的形貌。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>体外药物释放实验
	<ol>
		<li>向 6 孔板的每个孔中加入 500 µL 磷酸盐缓冲液（PBS），并将载有 3BDO 的微针放入各孔中，使其与 PBS 接触。</li>
		<li>在室温下孵育。在每个时间点，收集 500 µL PBS 用于测定 3BDO 的浓度。</li>
		<li>立即向每个孔中补充 500 µL 新鲜 PBS，以维持漏槽条件。</li>
		<li>根据微针中初始载药总量，计算 3BDO 累积释放百分比。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>抗菌实验
	<ol>
		<li>从 -80 °C 保存条件下取出细菌菌种（E. coli 和 Staphylococcus aureus），分别取 10 µL 菌液接种至 5 mL LB 培养基中。</li>
		<li>将接种后的培养基置于 37 °C、250 rpm 摇床中孵育约 16 小时（过夜）。</li>
		<li>用 LB 培养基将细菌培养液稀释至初始 OD620 为 0.01。</li>
		<li>用无菌水稀释壳聚糖（CS）储备液，配制六种浓度的 CS 溶液（1、5、10、50、100 和 500 mg/mL），每种浓度设三个重复。</li>
		<li>将样品分为三组：空白组、对照组和 CS 组。空白组加入 200 µL LB 培养基；对照组加入 180 µL 菌液和 20 µL 无菌水；CS 组加入 180 µL 菌液和 20 µL 对应浓度的 CS 溶液。</li>
		<li>在 37 °C 下孵育 20 小时。</li>
		<li>使用酶标仪在 0 小时和 20 小时分别测定 96 孔板各孔的 OD620 值，并记录结果。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>细胞毒性评价
	<ol>
		<li>向 96 孔板中每孔接种 100 µL 表皮或真皮细胞悬液（每孔含 2 × 103 个细胞）。</li>
		<li>向指定孔中加入 10 µL 相应处理液，设立四组：对照组（培养基）、3BDO 组（终浓度为 1 µM）、微针提取物组和 3BDO+微针提取物组，每组设三个重复。</li>
		<li>在 37 °C、5% CO₂ 条件下孵育 24 小时。</li>
		<li>每孔加入 10 µL Cell Counting Kit-8（CCK-8）工作液。 
		注意：加样时避免产生气泡，以免影响吸光度读数。</li>
		<li>在 37 °C、5% CO₂ 条件下继续孵育 2 小时。</li>
		<li>使用酶标仪在 450 nm 波长下测定所有孔的吸光度。</li>
		<li>分析数据并计算细胞存活率。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. 动物实验
<ol>
	<li>实验动物准备与处理
	<ol>
		<li>使用异氟烷麻醉7周龄雄性C57BL/6小鼠，并在麻醉期间提供体温调节。 
		警告：异氟烷为挥发性麻醉剂，应在通风良好的环境中操作，避免吸入过量。</li>
		<li>为小鼠眼部涂抹眼用润滑剂，防止角膜干燥。</li>
		<li>使用电动剃毛器剃除小鼠背部毛发，剃毛区域约为2 × 2 cm2。</li>
		<li>涂抹脱毛膏，等待5–10秒后擦除。用生理盐水棉签擦拭皮肤，以清除残留的脱毛膏和毛发。</li>
		<li>修剪微针贴片并备用。</li>
		<li>将剃毛后的小鼠随机分为五组（每组n = 5），并按以下方式处理：
		<ol>
			<li>未处理对照组：仅剃除毛发，不进行任何处理。</li>
			<li>空白微针贴片组：使用不含3BDO的微针贴片处理剃毛皮肤，处理频率与3BDO@MN组相同。</li>
			<li>3BDO@MN贴片组：于第1、3、5、7、9、11和13天使用3BDO@MN贴片处理剃毛皮肤。</li>
			<li>PBS皮下注射组：每日向小鼠背部剃毛区域皮下注射PBS溶液。</li>
			<li>3BDO皮下注射组：每日向小鼠背部剃毛区域皮下注射3BDO溶液。</li>
		</ol>
		</li>
		<li>将3BDO@MN贴片贴附于剃毛皮肤上，并施加均匀的垂直压力，以确保微针插入皮肤。使用弹性绷带固定3BDO@MN贴片，并用直夹钳固定绷带。 
		&#8203;注：不同给药方案的选择依据各策略不同的递送特性：3BDO@MN贴片实现局部持续释放，而皮下注射则以推注方式递送3BDO。</li>
		<li>在整个实验过程中观察小鼠，确保其从麻醉中完全恢复。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>样本采集与毛发生长评估
	<ol>
		<li>每日拍摄小鼠背部皮肤照片，记录毛发生长情况。</li>
		<li>于第15天通过测量毛干直径、毛发覆盖面积和毛发密度来评估毛发再生情况。使用ImageJ软件量化处理区域的毛发覆盖百分比。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol>
	<li>Zhou C, Li X, Wang C, Zhang J. Alopecia areata: an update on etiopathogenesis, diagnosis, and management. Clin Rev Allergy Immunol. 2021;61(3):403-23.</li>
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	<li>Cao Y et al. Dissolvable microneedle-based wound dressing transdermally and continuously delivers anti-inflammatory and pro-angiogenic exosomes for diabetic wound treatment. Bioact Mater. 2024;42:32-51.</li>
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	<li>Vora LK et al. Long-acting microneedle formulations. Adv Drug Deliv Rev. 2023;201:115055.</li>
	<li>Xiang H et al. Dissolving microneedles for alopecia treatment. Colloids Surf B Biointerfaces. 2023;229:113475.</li>
	<li>Xiao T et al. Microneedle assisted delivery of epidermal and dermal stem cells to promote hair growth. J Mater Sci. 2024;59(19):8427-40.</li>
</ol>

作者声明无任何利益冲突。

目前，雄激素性脱发（AGA）的临床治疗主要分为药物干预和外科移植两类。本研究中，载有3BDO的微针（MNs）在C57BL/6小鼠模型中促进了毛发再生。然而，传统的药物递送方法存在诸如药物分布不均等局限性。本研究的关键实验方案是一种两步法制备载3BDO微针的方法。透明质酸（HA）和壳聚糖（CS）是微针的主要组成成分。为确保微针质量，需重点关注若干关键步骤。
首先，为了避免聚合物溶液中产生气泡，采用预冷的模具以减缓离心过程中溶剂的挥发。其次，干燥条件直接影响针尖的脆性和背衬层的完整性。在 36 &#176;C 通过控制湿度，确保了笔尖具有足够的机械强度，同时保持了背衬层的柔韧性，避免过度干燥。第三，速度为134 &#215; g 5分钟可有效将3BDO富集于尖端区域，但更高的转速或更长的时间可能导致药物在模具底部析出，从而降低递送效率。对于 体内 实验中采用C57BL/6小鼠作为毛发再生模型。C57BL/6小鼠的毛囊具有明显且高度同步的毛发生长周期，便于实验操作，因此成为研究皮肤疾病最常用的模型之一16。约7周龄时，C57BL/6小鼠的毛囊自然进入休止期。对小鼠进行人工脱毛后，其毛囊会立即重新进入生长期。17。该 体内 实验结果表明，在该模型中，MN系统相较于皮下注射能促进更均匀的毛发再生。
3BDO@MN 系统可能代表了一种有前景的脱发治疗临床前策略，该策略将一种促进毛发再生的小分子与一种微创经皮递送平台相结合。已有报道称，长效微针制剂可实现药物的可控或持续释放，减少给药频率，并提高患者的依从性，从而克服了传统局部或全身治疗的一些局限性18,19。此外，近期采用微针辅助毛发再生的策略，包括干细胞递送，进一步支持了微针平台在该领域的广泛应用前景20。然而，在实现临床转化之前，仍需开展进一步研究，以评估其长期生物安全性、药代动力学/药效动力学特征、剂量优化、储存稳定性以及可扩展的生产工艺。

雄激素性脱发（AGA）是最常见的临床脱发疾病之一，主要表现为头皮毛发进行性变细和脱落。该病在男性中的终生患病率持续处于较高水平，已成为亟待解决的重要健康问题1,2。目前，AGA 的临床治疗主要分为药物干预和外科移植两大类，但二者均存在显著局限性。一线治疗药物如非那雄胺和米诺地尔虽具有一定的疗效，但可引发性功能障碍、头皮瘙痒和头皮干燥等明确的不良反应1,3。尽管毛发移植可实现局部毛发再生，但受限于治疗费用高、供体区域毛发数量不足以及移植存活率不稳定等因素，难以在临床实践中广泛推广1。鉴于上述局限，亟需开发兼具有效性、安全性和良好患者依从性的新型治疗策略。
3BDO 是一种与雷帕霉素竞争的小分子 mTOR 激活剂4。它已被广泛用作多种系统中的自噬抑制剂5,6,7。例如，长期使用 3BDO 可通过减少自噬体数量来改善记忆功能8。此外，越来越多的证据表明，3BDO 可能独立于 mTOR 活性发挥 mTOR 激活作用。例如，3BDO 能够在小鼠中抑制内皮细胞死亡和动脉粥样硬化的发展，且该作用独立于 mTOR 活性9。然而，其在毛囊生长中的潜在作用尚未见报道。值得注意的是，在我们的初步研究中发现，3BDO 能够促进毛发再生。然而，传统的局部给药方法存在明显局限性。皮肤角质层限制了药物的透皮效率，使得药物难以递送至真皮层中的毛囊靶部位。尽管透皮凝胶可延长药物滞留时间，但可能留下不理想的残留物。上述两种治疗策略的临床疗效仍不理想10,11。
微针（Microneedles, MNs）是一种新型的无痛药物递送技术，其核心优势在于能够轻松穿透角质层，并将药物精准递送至表皮与真皮交界处的毛囊周围微环境。此外，微针具有使用便捷、微创性小和成本合理等特点12,13,14。为解决外用3BDO透皮递送的瓶颈问题，本研究采用透明质酸（hyaluronic acid, HA）作为基质，壳聚糖（chitosan, CS）作为功能组分，开发了一种微针贴片。引入CS旨在赋予该系统潜在的抗菌功能。此外，透明质酸应用于脱发小鼠皮肤可显著促进毛囊发育15。因此，本实验方案描述了一种负载3BDO的可溶性微针系统的制备与表征方法，并将其应用于脱毛C57BL/6小鼠毛发生长模型。该模型可用于评估脱毛后毛发再生的反应，但其本身并不能确立该疗法对雄激素性脱发（AGA）的临床疗效。

<table><tbody><tr><td>3BDO</td><td>Yuanye Bio-Technology Co., Shanghai, China</td><td>890405-51-3</td><td>制备载3BDO的壳聚糖/透明质酸（CS/HA）制剂</td></tr><tr><td>6孔板</td><td>Corning Incorporated, USA</td><td>REF 3516</td><td>抗菌实验和体外药物释放实验</td></tr><tr><td>75%乙醇</td><td>山东利康医疗科技有限公司</td><td>1202050004</td><td>消毒</td></tr><tr><td>96孔板</td><td>Corning Incorporated, USA</td><td>REF3599</td><td>细胞毒性评价和抗菌实验</td></tr><tr><td>C57BL/6小鼠</td><td>Charles River Laboratories</td><td>7周</td><td>动物实验</td></tr><tr><td>细胞计数试剂盒-8（CCK-8）</td><td>Dojindo, 日本</td><td>CK04</td><td>细胞毒性评价</td></tr><tr><td>离心机</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>75007204</td><td>制剂离心</td></tr><tr><td>壳聚糖（CS）&amp;nbsp;</td><td>上海麦克林生化科技有限公司</td><td>9012-76-4</td><td>制备CS/HA制剂</td></tr><tr><td>脱毛膏</td><td>Veet</td><td>3059944023307</td><td>脱毛</td></tr><tr><td>二甲基亚砜（DMSO）</td><td>上海麦克林生化科技有限公司</td><td>67-68-5</td><td>制备载3BDO的CS/HA制剂</td></tr><tr><td>电子天平</td><td>Radwag</td><td>AS 220.R2</td><td>粉末称量</td></tr><tr><td>大肠杆菌（Escherichia coli, E. coli）</td><td>ATCC</td><td>/</td><td>抗菌实验</td></tr><tr><td>透明质酸（HA）粉末</td><td>华熙生物科技股份有限公司，中国</td><td>9067-32-7</td><td>制备CS/HA制剂</td></tr><tr><td>ImageJ软件</td><td>美国国立卫生研究院（National Institutes of Health）</td><td>/</td><td>统计分析</td></tr><tr><td>恒温振荡培养箱</td><td>Thermo Scientific&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td><td>50163013</td><td>细菌培养</td></tr><tr><td>异氟烷麻醉机</td><td>Gene&amp;I</td><td>AMS</td><td>动物麻醉</td></tr><tr><td>LB培养基</td><td>Sigma Life Science</td><td>L3022</td><td>抗菌实验</td></tr><tr><td>磁力搅拌器</td><td>杭州米欧仪器有限公司</td><td>SP-16</td><td>制剂搅拌</td></tr><tr><td>Multiskan SkyHigh酶标仪</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>/</td><td>OD值测定</td></tr><tr><td>烘箱</td><td>上海惠泰仪器制造有限公司</td><td>DHG-9260A</td><td>微针干燥</td></tr><tr><td>Parafilm封口膜M型</td><td>Amcor&amp;nbsp;</td><td>PM-996</td><td>微针密封</td></tr><tr><td>磷酸盐缓冲液（PBS）</td><td>Biosharp</td><td>BL302A</td><td>体外药物释放实验</td></tr><tr><td>金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus, S. aureus）</td><td>ATCC</td><td>/</td><td>抗菌实验</td></tr><tr><td>Universal TA质构分析仪</td><td>上海腾拔仪器科技有限公司</td><td>/</td><td>机械强度测试</td></tr><tr><td>真空干燥箱</td><td>上海惠泰仪器制造有限公司</td><td>DZF-6050</td><td>真空干燥</td></tr></tbody></table>

负载3bdo的可溶性微针贴片的制备与表征及其在c57bl/6小鼠中的生发研究

Fabrication and Characterization of 3BDO-Loaded Dissolvable Microneedle Patches for Hair Regrowth in C57BL/6 Mice

雄激素性脱发（AGA）的传统治疗方法存在局限性，促使人们探索替代的递送方式。本实验方案描述了负载3BDO的透明质酸/壳聚糖（HA/CS）可溶性微针（MN）贴片在C57BL/6小鼠毛发再生模型中的制备、表征与应用。该方法采用两步模塑法，在聚二甲基硅氧烷（PDMS）模具中将3BDO富集于微针尖端，同时形成不含药物的HA/CS背衬层。通过扫描电子显微镜（SEM）成像、力学测试、皮肤插入与溶解测试、体外释放实验、抗菌实验、细胞毒性测试以及体内毛发再生评估对微针贴片进行表征。微针插入皮肤后，针尖溶解并实现3BDO的局部释放。体内评估结果显示，与皮下注射组和对照组相比，负载3BDO的微针组表现出更均匀的毛发再生。本方案还支持对贴片形态、插入性能及局部生物相容性的评估。该方法为评估微针介导的3BDO递送用于毛发再生应用提供了临床前工作流程。

本方案介绍了3BDO@MN贴片的制备与表征方法。图1 展示了3BDO@MN贴片的制备流程示意图。将3BDO混入CS/HA配方中，得到的基质混合物被加入PDMS微针模具中，并通过离心填充至针尖。随后，将不含3BDO的CS/HA基质混合物涂布于模具表面，并通过离心填充背衬层。完全干燥后，将贴片剥离，获得3BDO@MN贴片。如图2A所示，采用扫描电镜（SEM）对微针的形貌进行表征。
圆锥形微针在15 × 15 mm的贴片上以20 × 20阵列均匀排列，每根微针底部宽度为 250 µm 高度为 600 µm. MN针尖可承受1.2 N的力，足以穿透皮肤，这由苏木精-伊红（H&E）染色后观察到的清晰插入针孔所证实&amp;E）染色（图2B，C）。随后采用小鼠背部皮肤测试3BDO@MN贴片的应用效果。将贴片按压至小鼠皮肤上以测定其溶解时间，微针尖端在60秒内完全溶解（图 2D）。在 体外 检测结果显示，3BDO 从微针中的释放曲线表明，约 90% 的药物被释放（图2E）。MN 提取物在表皮和真皮细胞中均未表现出细胞毒性，而 1 µM 3BDO 显著促进细胞生长（图2F）。含壳聚糖的制剂对两者均表现出浓度依赖性的抗菌活性 E. coli 和 S. aureus，且在浓度超过 10 mg/mL 时效应更为显著（图 2G，H这些结果支持将壳聚糖作为微针制剂的功能性组分，尽管仍需对最终制备的贴片进行进一步测试，以确认其在实际应用条件下的抗菌性能。
动物实验结果表明，3BDO@MN组在第5天出现明显的皮肤色素沉着。到第15天时，接受3BDO注射的组别毛发覆盖率约为45%，对照组约为39%，而3BDO@MN组的毛发覆盖率接近90%（图3）。3BDO@MN组的毛发再生更加均匀且密度更高，表明其药物渗透性和滞留性优于直接注射。
综上所述，这些研究结果表明，在本研究所采用的脱毛C57BL/6小鼠模型中，MN介导的3BDO递送可促进毛发再生。尚需进一步研究以确定该方法在雄激素性脱发的疾病特异性模型中以及在临床相关给药条件下是否有效。
<img alt="3D生物打印过程示意图：3BDOQCS/HA涂层、离心、真空干燥、CS/HA基质。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/71814/71814fig1.jpg" data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="Figure 1"> 
图1．3BDO@MNs的制备过程示意图。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/71814/71814fig1large.jpg" target="_blank">请点击此处查看该图的放大版本。</a>
<img alt="微针阵列示意图与细胞活力图；乳酸壳聚糖抗菌性能研究" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/71814/71814fig2.jpg" data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="图2"> 
图23BDO@MN 系统的制备与表征。（A） SEM 图像显示 3BDO@MNs 的形貌。比例尺 = 500 µm. (B) 3BDO@MNs的力-位移曲线 （C） H&amp;经3BDO@MNs插入并去除基底后的小鼠皮肤H&E染色横截面，证实成功穿透组织。比例尺 = 100 µm. （D） 皮肤插入后5秒、10秒、30秒和60秒时微针溶解的扫描电镜图像。 (E) 累积的 体外 3BDO 从微针中的释放曲线。 (F) 表皮细胞和真皮细胞经3BDO、MN提取物及含MN提取物处理后的细胞活力 3BDO 在 24 小时 （G，H） 620 nm 处的吸光度 (G) 金黄色葡萄球菌 和 (H) 大肠杆菌 不同浓度壳聚糖培养基中培养的悬浮液。数据以均值 ± 标准差表示（n = 3），统计学显著性采用单因素方差分析（**p < 0.01）。 &lt; 0.01). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/71814/71814fig2large.jpg" target="_blank">请点击此处以查看此图的放大版本。</a>
<img alt="使用微针（MN）贴片进行的毛发生长实验；小鼠的色素沉着与毛发覆盖结果。" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/71814/71814fig3.jpg" data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="图3"> 
图3. 3BDO@MNs 的毛发再生效果 体内. (A) 动物实验的示意图。 （B） 小鼠背部皮肤在治疗后第0天（剃毛）、第5天、第10天和第15天的代表性图像。 (C) 色素沉着评分（任意单位）的定量分析 (B). (D) 定量分析处理区域毛发覆盖面积（%） (B). (E) 与对照组相比，处理区域毛发覆盖面积的相对倍数变化。数据以均值 ± 标准差（n = 5）表示，统计学显著性通过单因素方差分析进行检验（**p < 0.01）。 &lt; 0.01). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/71814/71814fig3large.jpg" target="_blank">请点击此处以查看此图的放大版本。</a>

本方案描述了负载3BDO的可溶性微针贴片的制备、表征及其在小鼠毛发再生模型中用于经皮药物递送的应用。

负载3BDO的可溶性微针贴片的制备与表征及其在C57BL/6小鼠中的生发研究

雄激素性脱发（AGA）的传统治疗方法存在局限性，促使人们探索替代的递送策略。本方案描述了……

fabrication-characterization-3bdo-loaded-dissolvable-microneedle

Research

科研

JoVE Journal

Bioengineering

生物工程

利用慢病毒介导功能获得或功能缺失，对毛囊再生模型进行组织特异性分析。...

毛发再生过程中上皮-间质信号传导的快速遗传学分析

脱发是一种常见的毛发脱落现象，可在多种不同情况下发生，包括作为化疗的副作用。我们建立了一种利用标准凝胶成像仪进行灰度分析来定量小鼠脱发程度的方法，以促进对有前景的新型脱发疗法的研究。...

一种利用灰度分析对小鼠脱发进行定量分析的新技术

本方案描述了一种结合微加工技术与冷冻凝胶化技术制备弹性三维大孔微凝胶的方法。在载入细胞后，可形成三维微组织，且易于注射 在体内 以促进再生治疗，或组装成阵列用于 体外...

用于可注射再生治疗和高通量药物筛选的三维微组织

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糖尿病小鼠慢性伤口造模方案

本实验方案的目的是在小鼠皮肤中诱导产生非致死水平的活性氧（ROS），从而进一步促进组织中的生理反应。...

通过可切换的原卟啉IX依赖性原位活性氧生成刺激小鼠皮肤干细胞微环境及组织再生

外泌体具有重要的临床应用潜力，但其实际应用受限于易降解和难以稳定保存等问题 体内...

微针贴片的制备与表征及其用于外泌体装载与递送

本文介绍了一种独特的制备带有通气孔的母模的方法，可在高粘度聚合物浇铸过程中防止气泡滞留，从而实现具有尖锐针尖的明胶微针的制备。通过减少高粘度明胶的浇铸体积，还可制备出薄壁中空的锥形微针。...

制备带有微米级通气孔的微针主模具

本方案描述了包载辣椒素的α-乳白蛋白纳米胶束可溶性微针贴片的制备方法。该方法提供了一种可重复、微创的透皮递送技术，可将疏水性生物活性物质靶向递送至脂肪组织，实现有效的局部减脂，有望拓展其在肥胖管理中的应用。...

制备负载α-乳清蛋白纳米胶束的可溶性微针贴片用于辣椒素经皮递送及脂肪组织减少

本研究旨在提供一份实用指南，帮助研究人员使用溶剂浇铸法（也称为微模塑法）制备自己的 DMAP...

通过溶剂浇铸法制备的可溶性微针阵列贴片及基于微针的生物医学器件的关键表征

“E-DNA”传感器是一种无需试剂的电化学生物传感器，即使直接在血液及其他复杂基质中检测，仍表现出良好的性能，目前已适用于多种核酸、蛋白质和小分子分析物的检测。本文介绍了一种此类传感器的制备与使用通用方法。...

无试剂检测核酸、蛋白质和小分子的电化学DNA生物传感器的制备

Shandong First Medical University & Shandong Academy of Medical Sciences.  This protocol describes the fabrication, characterization, and application of 3BDO-loaded dissolvable microneedle patches for transdermal drug delivery in a mouse hair-regrowth model.

负载3BDO的可溶性微针贴片的制备与表征及其在C57BL/6小鼠中的生发研究

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