Name: 光镜下的主要组成部分 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-07-30T18:18:00.000+00:00
Duration: 8 min 8 s
Description: 了解光学显微镜的主要组成部分及其功能，学习目镜、物镜、载物台和聚光器等关键部件的操作原理。掌握正确的维护方法可显著提升生物医学研究中的成像质量与分辨率。

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本实验方法的完整文字方案可在<a href="http://www.mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471143031/cp/cpcb/article/cb0401/current/abstract ">《细胞生物学实验指南》</a>中获取。

作者无任何披露信息。

光学显微镜的主要组件

Major Components of the Light Microscope

光学显微镜是细胞生物学家的基本工具，细胞生物学家应充分理解其工作原理、针对不同应用所需的校准方法，以及为获得最大成像能力和分辨率所必需的维护方法。本文详细描述了显微镜的各个组成部分。

光学显微镜是细胞生物学家的基本工具，研究者应充分理解其工作原理、针对不同应用所需的校准方法，以及为获得最大成像能力和分辨率所必需的维护措施。本文详细描述了显微镜的各个组成部分。

显微镜是细胞生物学家的基本工具，研究者应充分了解其工作原理、正确校准方法以及……

光学显微镜是生物医学研究中的重要工具。其光学组件能够实现远高于肉眼观察的图像分辨率。通过将显微技术与数字图像处理相结合，研究人员可以增强图像的可见性，并进行精确的定量测量。本视频将为您详细介绍显微镜的主要组件及其功能。大家好，我是来自圣安东尼奥德克萨斯大学健康科学中心核心光学成像中心的 Victoria Sanon Frolic。今天我将为您展示您日常使用的显微镜的主要部件及其基本功能。接下来让我们来熟悉一下您的显微镜。在使用显微镜之前，最好先了解其各个组成部分及其功能。这是一台尼康Eclipse TI型倒置复合光学显微镜，配备了透射光和落射荧光显微镜功能。显微镜轴线方向称为Z轴，与之垂直的方向称为X轴和Y轴。首先，我们将检查目镜筒、容纳物镜的物镜转换器以及载物台。这些是显微镜主要的成像组件。目镜是观察者与显微镜之间的接口。通过握住双目光学系统的目镜筒基部，可将其相互靠近或推远，从而调节瞳距。这能使您双眼舒适地进行观察。同时，现在可以独立调节每个目镜的焦距。目镜的放大倍数标记在镜筒上。相机通常被安装在显微镜上用于图像采集。该显微镜使用C型接口适配器将CCD相机连接至显微镜主体的侧端口。通过旋转显微镜上的旋钮，使棱镜进入光路，从而将成像光束从目镜转向并导向安装在相机端口的相机。不同的物镜（决定大部分放大倍数和分辨率）安装在可旋转的物镜转换器上。每个物镜上都标有技术参数，例如放大倍数、数值孔径、所需浸没介质（如油、甘油或空气）、盖玻片厚度，以及其他特殊特性，例如照明模式、目镜和物镜转盘未聚焦或无限远投射的光路设计。镜筒内含一个正焦透镜，可将成像光线聚焦至目镜或相机。在向您展示了显微镜的成像组件之后，接下来让我们来看看帮助我们聚焦图像并对透射光进行调节的组件。接下来，我们将检查载物台，它是用于固定载玻片的机械装置。通过旋转旋钮，可以在 x 和 y 方向上调节样本的位置。在倒置显微镜结构中，载物台是固定的，通过显微镜主体上的粗调和微调焦旋钮沿 Z 轴上下移动物镜来实现样本的聚焦。现在我们将检查光学显微镜的透射照明组件，这些组件为观察样本提供光源。首先，我们有灯和灯室，它们提供用于照亮样本的光线。在光学显微镜中，灯通常是一种低电压卤素灯泡，内含钨丝，可通过调节来控制光强。可在光源后方设置快门，以控制照明持续时间。光源后紧接的是视场光阑，用于调节被照明标本的区域或视场范围。接下来是称为聚光镜的组件，其主要功能是将明亮且均匀的光线聚焦到标本上。位于聚光镜底部的孔径光阑（虹膜光阑）则用于控制照射在标本上的聚光镜照明锥的角度。调节此光圈可控制照射到样品的光锥的大小和数值孔径，从而实现正确的照明、对比度和景深。聚光镜光圈的光学调节可使物镜前透镜元件得到适当照明。理想情况下，应针对每个物镜进行此项调节，以充分发挥镜头的性能。对于落射荧光照明，光源通常为氙弧灯或汞弧灯。在我们的显微

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光镜下的主要组成部分

本文介绍了一种构建集成显微系统的实用指南，该系统以经济高效的方式将传统的落射荧光成像、基于单分子检测的超分辨率成像以及多色单分子检测（包括单分子荧光共振能量转移成像）整合到一个装置中。...

使用一台荧光显微镜实现多种成像模式

本方案详细描述了如何构建单物镜光片荧光显微镜，并用于观察细胞骨架网络。...

可定制单物镜光片荧光显微镜的设计与构建用于细胞骨架网络的可视化

本文详细介绍了如何制备用于固相支撑脂双层中单蛋白追踪的样品。同时阐述了一种具有单分子灵敏度和高帧率的简易荧光显微镜。最后，我们概述了提取单蛋白轨迹的实验步骤。...

使用荧光显微镜追踪脂双层中的单个蛋白质

保持显微镜光学部件的清洁对于获得高质量成像至关重要。显微镜镜片表面或内部的灰尘、指纹、过量的浸油或封片介质会导致对比度和分辨率下降。微分干涉差（DIC）成像尤其容易受到镜头表面污染和划痕的影响。本实验方案详细介绍了保持显微镜清洁的操作步骤。...

显微镜的正确使用与清洁

同时测量多个离子通道的电流通量，并随后区分跨膜电流中每种通道类型的贡献，存在技术上的困难。为满足这一需求，本方法提出了一种利用特定频率成分来生成单个通道类型电流-电压（IV）曲线的方法。...

利用频率分量重现离子通道IV曲线

本文的目的是展示一种利用数字免疫荧光显微镜优化大鼠软脑膜动脉切片中雌激素受体-α（ERα）免疫荧光检测的方法。...

使用数字免疫荧光显微镜对大鼠软脑膜小动脉中雌激素受体-α的成像

本文演示了一种通过电天线图分析法测定成年脐橙螟（Amyelois...

触角电位生物测定作为寄主植物挥发物筛选工具

本方案描述了光片显微镜的搭建及其应用方法 体内 成像 秀丽隐杆线虫...

搭建简易光片显微镜用于 整体 成像 秀丽隐杆线虫 发育

组合使用5种荧光蛋白标记造血干细胞和祖细胞可实现 体内 通过共聚焦和双光子显微镜进行克隆追踪，揭示造血再生过程中骨髓造血结构的动态变化。该方法可在移植后长期、非侵入性地对光谱编码的造血干细胞和祖细胞（HSPCs）来源的细胞在完整组织中进行命运图谱绘制。<br...

体内 克隆追踪标记有五种荧光蛋白的造血干细胞与祖细胞：基于共聚焦与多光子显微镜技术

非相干氙灯光源通过窄带干涉滤光片和中性密度滤光片，以向培养细胞递送不同波长和强度的光。该方案用于评估红光/近红外光治疗对活性物质生成的影响...

评估不同波长和强度的红光/近红外光疗法对氧化应激影响的方法 体外

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光学显微镜的主要组件

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