5.1
Wissenschaftler können ein Gen in Tieren, im Allgemeinen Mäusen, inaktivieren oder ausschalten, um mehr über die Funktion des Gens zu erfahren. In der Regel wird es durch einen Targeting-Vektor, ein gentechnisch hergestelltes Stück DNA, ersetzt. Der Targeting-Vektor weist Sequenzen auf, die homolog und identisch zu den Sequenzen vor und nach dem Gen sind.
Es hat normalerweise auch einen positiven Selektionsmarker wie das Gen für Neomycinresistenz, NeoR, in der Mitte und einen negativen Selektionsmarker wie das Gen für Thymidinkinase, TK, an einem Ende. Wenn es in embryonale Stammzellen eingeführt wird, ersetzt es das Gen durch homologe Rekombination, die auf natürliche Weise zwischen DNA-Abschnitten mit ähnlichen Sequenzen auftritt. Zellen, bei denen das Gen korrekt ersetzt wurde, enthalten den positiven, nicht aber den negativen Marker, sodass sie in Kultur identifiziert werden können.
Diese Zellen werden dann in einen Mausembryo eingeführt und in die Gebärmutter eines Weibchens implantiert. Die resultierende Maus hat eine Kombination aus normalen Zellen und Zellen, bei denen das Gen auf einem Chromosom ausgeschaltet ist (Gen-Knockout). Diese Mäuse werden dann gezüchtet, um sogenannte Knockout-Mäuse zu erzeugen, die für den Knockout in allen Zellen homozygot sind.
Um mehr über die Funktion eines Gens zu erfahren, können Forscher beobachten, was passiert, wenn das Gen inaktiviert oder entfernt (knock out) durch d…
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