32.7
Durchflusszytometrie
Die Durchflusszytometrie analysiert eine heterogene Zellpopulation, wie z. B. weiße Blutkörperchen, anhand mehrerer Parameter wie Größe und Komplexität.
Wenn die Suspension auf ein Durchflusszytometer geladen wird, bilden die Mantelflüssigkeit und die vibrierende Düse einzellige Tröpfchen, die einen Laserstrahl passieren und das Licht in mehrere Richtungen streuen.
Die Vorwärtsstreuung, die die Zellgröße misst, und die Seitenstreuung, die die Zellkomplexität anzeigt, werden durch unterschiedliche Detektorsysteme detektiert.
Die Darstellung von Vorwärts- und Seitenstreuung in einem Diagramm hilft bei der Unterscheidung von Zellpopulationen und ihren Anteilen in einer Stichprobe. Zum Beispiel sind die Vorwärts- und Seitenstreuung bei Granulozyten höher, die größer und körniger als Lymphozyten sind.
Der fluoreszenzaktivierte Zellsortierer (FACS), eine spezialisierte Durchflusszytometrie, hilft bei der Analyse und Sortierung von Zellen. Es werden fluoreszenzmarkierte Antikörper verwendet, die spezifisch gegen bestimmte zelluläre Komponenten sind - wie CD4- oder CD8-Marker auf T-Zellen -, die der Probe zugesetzt werden.
Ein elektrischer Ladering fügt einzelligen Tröpfchen eine Ladung hinzu, die auf dem Fluoreszenz-Tag basiert.
Diese Ladung nutzen die Elektromagnete dann, um verschiedene Zelltypen in separate Röhren abzulenken.
Die Entwicklung von Techniken der Durchflusszytometrie begann 1934 mit ersten Versuchen von Andrew Moldavan, einem Bakteriologen, der die Zellen in ei…
Urheberrecht © 2026 MyJoVE Corporation. Alle Rechte vorbehalten.