Hochauflösende Fluoreszenzmikroskopie

Die konventionelle Fluoreszenzmikroskopie kann nur Strukturen auflösen, die weiter als 200 nm voneinander entfernt sind. Denn unter dem Mikroskop lassen die Beugung des Lichts die fluoreszierenden Moleküle als verschwommene Flecken statt als scharfe Punkte erscheinen. Wenn Objekte sehr nahe beieinander liegen, überlappen sich ihre Bilder.

Daher haben Wissenschaftler Superauflösungstechniken entwickelt, die eine bessere Auflösung bieten, um selbst kleine subzelluläre Strukturen abzubilden. Diese Techniken überwinden die Beugungsgrenzen, indem sie bestimmte Lichtmuster verwenden, um die Fluorophore in der Probe anzuregen.

Bei der Mikroskopie mit strukturierter Beleuchtung wird beispielsweise ein Streifenmuster verwendet, das dann gedreht wird, um mehrere Bilder aufzunehmen. Die Bilder werden kombiniert, wodurch ein Interferenzmuster entsteht, das rechnerisch verarbeitet wird, um das endgültige Bild zu erstellen.

Die stimulierte Emissionsverarmungsmikroskopie erzeugt mit zwei Lasern ein Muster. Ein primärer Laser regt die Probe an, während ein Donut-förmiger Strahl die Fluoreszenz um sie herum unterdrückt, wodurch der Fluoreszenzpunkt kleiner erscheint.

Andere Techniken vermeiden über