Hier beschreiben wir eine herzchirurgische Verfahren gezüchteten Gewebe in der atrioventrikulären (AV)-Nut eines Erwachsenen Lewis Ratte Implantat.
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Methodenartikel
Die Implantation von Engineered Tissue in der Ratte Herz
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Nager Operation ist oft ein wichtiger Bestandteil bei der Beurteilung der Nützlichkeit von technischen Geweben. Eine Vielzahl von chirurgischen Verfahren können in gemeinsamen Labor Ratten oder Mäusen durchgeführt werden und diese sehr häufig als ein Zwischenschritt zwischen Tisch-Experimente und große Tierversuche oder Versuche am Menschen dienen. Da die Nagetiere eine etablierte, kostengünstige und physiologisch-relevanten Modellsystem, in dem neuartige Kombinationen von Gerüsten Materialien und Zellen zu testen bieten, eignen sie sich besonders für Herz-Kreislauf-Tissue-Engineering-Studien gut geeignet. Derzeit stellen wir eine am offenen Herzen chirurgische Verfahren entwickelt, Gewebe mit myogenen Vorläuferzellen in der atrioventrikulären (AV) Nut einer Ratte Herz zu implantieren. Diese Implantate sollen eine elektrische Leitung zwischen dem rechten Vorhof und die rechte Herzkammer mit dem ultimativen Ziel, eine alternative Behandlung zu konventionellen Schrittmacher-Implantation bei pädiatrischen Patienten mit komplettem AV-Block [1] zu schaffen. Die gezüchteten Gewebe ist in der AV-Nut mittels einer Thorakotomie implantiert. Für unsere Zwecke sind Lewis-Ratten betäubt und invasiv beatmet, um positive Atemwegsdruck während des sterilen OP-Verfahren aufrecht zu erhalten. Der Ansatz des Herzens wird durch ein Recht Thorakotomie durch eine anterolaterale Inzision am 5 durchgeführt
Protokoll
Teil 1: Einleitung einer Vollnarkose
- A 200-250 g Lewis Ratte narkotisiert mit 50 mg / kg Ketamin und 4 mg / kg Xylazin mit einer 30 G Nadel in die Bauchhöhle injiziert. Der Oberbauch und rechten Brust abgeschnitten, um Haar und der Schnitt gründlich mit 70% Ethanol und dann eine Povidon-Iod Antiseptikum Lösung gereinigt zu entfernen.
- Das Tier ist intubiert endotracheal mit einer 16 G intravenösen Katheter an ein kleines Tier Atemschutzmaske (Harvard Apparatus). Das Beatmungsgerät ist ein Verdampfer, um 0,5 bis 1,0% Isofluran (Baxter) mit 100% Sauerstoff gemischt, um eine Vollnarkose zu halten angeschlossen. Atemfrequenz und Atemzugvolumen wird na....
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Diskussion
Für ein positives Ergebnis der Operation ist es wichtig, richtig zu intubieren und invasiv lüften das Tier. Wenn die Ratte einfach sediert ist und erlaubt, sich spontan zu atmen, werden beide Lungen unweigerlich zusammenbrechen, während der Thorax durch gemeinsame Pleura in Nagetieren geöffnet wird. Vor dem Schließen der Brust, muss jede Pneumothorax vollständig eliminiert werden und die Lunge voll ausgebaut, um Atelektasen zu reduzieren. Andernfalls wird der Entwöhnung vom Beatmungsgerät und Recovery nicht erfolgreich .......
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Offenlegungen
Tierversuche wurden in Übereinstimmung mit den Richtlinien und Vorschriften her durch die Institutional Animal Care und Verwenden Ausschuss am Children s Hospital Boston gesetzt durchgeführt.
Danksagungen
Und Beiträge an die Reizleitung Fund an der Kinderklinik Boston; Diese Arbeit wird durch Forschungsmittel von den National Institutes of Health (HL088206 HL068915) unterstützt.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare | |
|---|---|---|---|---|
| 7x4 Thermo Pad 4/Box | Ausstattung | Hood Thermo-Pad, Summerland, BC Kanada | MODEL 704R | |
| Inspira ASV Beatmungsgerät | Ausstattung | Harvard Apparatus | ||
| Hand-Pulsoximeter | Ausstattung | Nellcor | N20PA | |
| Retraktor | Ausstattung | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-6514 | |
| Isofluran (Forane) | Reagenz | Baxter Internationl Inc. | 1001936040 | |
| Ketamin HCl | Reagenz | Hospira Inc. | RL-0065 | |
| Xylazin (AnaSed) | Reagenz | Lloyd, Inc. | LB15705A | |
| Buprenorphin HCL Injektionslösung | Reagenz | Bedford Laboratories | Div-BUP-P00 | |
| Bupivacain 0,25 % | Reagenz | Hospira Inc. |
Referenzen
- Choi, Y. H. Cardiac conduction through engineered tissue. Am J Pathol. 169, 72-85 (2006).
- Shin, J. W. Low-dose systemic bupivacaine prevents the development of allodynia after thoracotomy in rats. Anesth Analg. 107, 1587-1591 (2008).
- Horstick, G.
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Nachdrucke und Genehmigungen
