Ein Abonnement von JoVE ist erforderlich, um diesen Inhalt anzuzeigen. Melden Sie sich an oder beginnen Sie noch heute mit einer kostenlosen Testphase.

Methodenartikel

Proboscis Erweiterung Response (PER) Assay in Drosophila

30.6K Ansichten

DOI:

10.3791/193

29. April 2007

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Proboscis Extension Response oder PRO ist ein Geschmack Verhalten Assay, der in Fliegen sowie in Honigbienen verwendet wurde. Wenn der Rüssel den Kontakt mit einem attraktiven Stoff macht, erstreckt sich die Fliege ihren Rüssel, um die Substanz zu konsumieren. Lösungen verschiedener Zucker sind sehr attraktiv, die Fliege.

Zusammenfassung

Proboscis Extension Response (PER) ist ein Geschmack Verhalten Assay, der in Fliegen sowie in Honigbienen verwendet wurde.

Auf der Oberfläche der Fliege in den Mund (Labellum), gibt es Haar-ähnliche Strukturen genannt Sensillen, die Geschmack Neuronen Häuser. Wenn eine attraktive Substanz Kontakt zur Lippe macht, erstreckt sich die Fliege ihren Rüssel, um das Material zu verbrauchen. Proboscis Erweiterung Response (PER)-Assay misst diesen Geschmack Verhalten Reaktion, und es ist eine nützliche Methode, um über das Essen Vorlieben in eine Fliege zu lernen. Lösungen verschiedener Zucker wie Saccharose, Glucose und Fructose, sind sehr attraktiv, die Fliege. Die Wirkung von aversiven Substanzen können auch als Reduzierung der PER getestet werden, wenn in einem süßen gemischt.

Trotz der Einfachheit der grundlegenden Verfahren, es gibt viele Dinge, die sie von der Arbeit verhindern können. Einer der Faktoren, die Aufmerksamkeit erfordern, ist die Fliege reagiert Zustand. Die erforderliche Hungertod der Zeit, die fliegen, um die richtige Reaktion Zustand zu bringen variiert drastisch von 36 bis 72 Stunden. Wir haben eine Reihe von Kontrollen, die Fliege den Zustand und die Screening ermöglicht der non-responsive oder hyper-responsive einzelnen Tiere zu bewerten. Ein weiterer wichtiger Faktor sind die Auswirkungen auf und die Position der Kontakt zu den Labellum, was schwierig sein, die von Worten zu beschreiben wäre. Diese Videopräsentation zeigt alle diese zusammen mit einigen anderen Verbesserungen, die die Reproduzierbarkeit dieses Verfahrens erhöhen würde.

Protokoll

Hunger

  1. Zunächst verhungern the fly.
  2. Ein kleines Stück von Kim-wischen mit Wasser in ein leeres Fläschchen getränkt.
  3. Transfer 20-30 wohlgenährt fliegt in die leere Flasche.
  4. Prüfen Sie alle 12 -24 Stunden, um sicherzustellen, dass die Papier ist feucht.
  5. Hungern the fly für 36-72 Stunden.

Fix the fly

  1. Nehmen Sie eine in einem Aspirator fliegen.
  2. Legen Sie eine 200 ul gelber Spitze über die Öffnung. Gleichzeitig spiegeln und bläst, können Sie Squeeze-the-fly in die gelbe Spitze.
  3. Sanft gelten etwas Luft, die Fliege Push-up bis zu einem Punkt, wo sie sich nicht ....

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Diskussion

In dieser Präsentation haben wir alle Schritte für Proboscis Extension Response Test gegangen. Die Methode klingt ziemlich einfach, aber wie in vielen anderen Verhalten Assays, viele kleine Dinge können den Test von der Arbeit abzuhalten. Wir haben durch viele solche Schritte, die Aufmerksamkeit brauchen gegangen. Hier noch einmal hervorzuheben, habe ich einige der wichtigsten Faktoren.

Ein solcher Faktor ist die Form der Docht. Ich habe einige der sehr guten Beispielen gezeigt wird, aber natürlich in Wirklichkeit alles wäre ein kon.......

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Danksagungen

Wir bedanken uns bei Paul Graham für ihre Tätigkeit als Kameramann in der Video-Präsentation.

....

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
HDR-HC1KameraSony Corporation
SMZ800MikroskopNikon Instruments
P-IBSSKameraadapterNikon Instruments
1x DC10LNKameraadapterOptem, Qioptiq Inc.
257010KameraadapterOptem, Qioptiq Inc.
TREKKER Mk2StativBENBO
Gorillapod SLRStativJoby
iMac G5ComputerApple
Power Mac G5ComputerApple
iMovieSoftwareApple
MPEG StreamclipSoftwareSQUARED 5

Referenzen

  1. Dethier, V. G. The Hungry Fly. , Harvard University Press. Cambridge. (1976).
....

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Nachdrucke und Genehmigungen

Schlagwörter

Geschmacksverhalten von DrosophilaOptimierung der HungerzeitMethode zur Fixierung von FliegenTechnik zur DochtzubereitungMethode zur Sto kontrollePositiv und NegativkontrollenKontaktposition des LabellumsMapping der Sensillenempfindlichkeit