Die Nabelschnur werden verwendet, um Zellen der glatten Muskulatur durch verschiedene Arten zu isolieren. In dieser Arbeit verwendet die enzymatische Behandlung zu isolierten glatten Muskelzellen.
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Methodenartikel
Isolierung humaner Nabelschnur arteriellen glatten Muskelzellen (HUASMC)
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Die menschliche Nabelschnur (UC) ist eine biologische Probe, die einfach nur nach der Geburt erreicht werden kann. Diese biologische Probe, die meiste Zeit, verworfen, und ihre Erhebung bedeutet keine zusätzliche Gefahr für das Neugeborene oder die Mutter die Gesundheit. Außerdem keine ethischen Bedenken erhoben werden. Der UC wird von einer Vene und zwei Arterien, von denen beide Endothelzellen (ECs) zusammen
Protokoll
- Arterien sind von UC Stücke von 3-7 cm erreicht.
- Wharton Sulze, dass die Arterien umgibt wurde sorgfältig durch Schneiden mit der Schere entfernt.
- A blunt-end Nadel aus einem äußeren Durchmesser von 0,6-1mm war ca. 7mm von einem Ende des seziert Arterien eingesetzt.
- So entfernen Sie das verbleibende Blut in den Gefäßen sind die Arterien senkrecht gehalten und perfundierten mit etwa 20 bis 40 mL, physiologischer Kochsalzlösung (PSS), mit einem 20-ml-Spritze verbunden mit einer Nadel. Wenn nötig, wurde dieser Waschschritt für mehrere Male wiederholt.
- Das gleiche Verfahren wurde wiederholt mit RPMI 1640 mit 10% fötalem Rinderserum (FBS) ergänzt. ....
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Diskussion
Die SMC kann als Modell für zukünftige Tests mit constrictor Drogen verwendet werden, zu isolieren und strukturell charakterisieren L-Typ Calcium-Kanälen, um zelluläre und molekulare Aspekte der vaskulären Funktion zu untersuchen und sie in das Tissue Engineering verwenden. SMCs und ECs sind für die Entwicklung von neuen Biomaterialien, die in die Produktion von Halbzeugen synthetische Blutgefäße beim Menschen eingesetzt werden eingesetzt werden können fundamental.
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Danksagungen
Krankenhaus Amato Lusitano, Castelo Branco Portugal.
Krankenhaus Sousa Martins, Guarda Portugal.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| DMEM-F12 | Sigma-Aldrich | 095K8311 | |
| Fötales Rinderserum (FBS) | Biochrom AG | 0117T | |
| RPMI 1640 | GIBCO, von Life Technologies | 3103806 | |
| Kollagen | Sigma-Aldrich | 067K2302 | |
| Antibiotikum | 10 μL/ 1 mL Medium | ||
| Schere | sterilisiert | ||
| Kanüle | Durchmesser von 0,6–1 mm | ||
| Spritze | 10–20 mL | ||
| Physiologische Kochsalzlösung (PSS) | 20–40 mL pro Arterie | ||
| Kollagenase Typ I | Sigma-Aldrich | 047K1052 | 3 mL pro Arterie |
| Hank’s gepufferte Salzlösung (HBSS) | verdünnte Kollagenase | ||
| Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS) | auf 37°C erwärmt |
Referenzen
- Van Rijen, H. Gap junctions in human umbilical cord endothelial cells contain multiple connexins. The American journal of physiology. 272 (1 PT 1), C117-C117 (1997).
- Martín de Llano, J. Procedure to ....
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Nachdrucke und Genehmigungen
