Aggressions-Assay: Eine Methode zur Untersuchung des aggressiven Verhaltens von Zebrafischen als Reaktion auf einen Spiegel

Zusammenfassung

Quelle: Way G.P., et al. Kühnheits-, Aggressions- und Shoaling-Assays für Verhaltenssyndrome bei Zebrafischen. J. Vis. Exp. (2016)

Der Artikel beschreibt einen Assay zur Untersuchung der Aggression von Zebrafischen. Die Methode verwendet einen einfachen Spiegel und beobachtet die Verhaltensreaktion des Zebrafisches auf seine eigene Reflexion im Spiegel.

Protokoll

1. Durchführung des Aggressionstests

1. Führen Sie den Aggressionstest in einem rechteckigen 19-Liter-Tank mit den Maßen 30 cm x 15 cm x 10 cm durch. Statten Sie den Tank mit externen undurchsichtigen Trennwänden aus, die drei Seiten des Aggressionstanks umgeben, wobei die Vorderseite für die Betrachtung freigelegt bleibt, um unerwünschte äußere Reize zu reduzieren. Teilen Sie den Tank mit äußeren Markierungen in vier gleich rechteckige Quadranten und befestigen Sie einen Spiegel dauerhaft (mit Silikondichtungsmasse) im unteren linken Quadranten, der um 22,5° geneigt ist und ein rechtwinkliges Dreieck gegen die linke Seite des Tanks bildet.
2. Stellen Sie sicher, dass die Temperatur des Wassers im Eingewöhnungstank und im Aggressionstank innerhalb von 2 °C über dem Gehäusegestell liegt. Halten Sie dazu frisches, gealtertes Wasser auf 27,5-28,5 °C vorgewärmt, um es in den Aggressionstank zu geben. Anmerkung: Es ist wichtig, das Wasser zwischen jedem Assay zu wechseln, um ungerechtfertigte Geruchsreize zu eliminieren.
3. Bringen Sie einen Fokalfisch durch Schröpfen aus dem Gehäusegestell in ein separates Akklimatisierungsbecken, wo er sich 10 Min. lang akklimatisiert< br /> Anmerkung: Es ist wichtig, den Reiz, der durch unsachgemäße Handhabung auf die Fische eingebracht wird, zu reduzieren. Versetzen Sie Personen wie zuvor beschrieben. Setzen Sie konkret manuell und vorsichtig einen kleinen, durchsichtigen Plastikbecher in den gewünschten Tank ein. Ohne den Fisch zu stören, wie beim Umfüllen mit einem Netz, schöpfen Sie den Fisch langsam in den Becher.
4. Stellen Sie sicher, dass der Video-Camcorder aufnahmebereit ist, indem Sie bestätigen, dass der Aggressions-Assay-Tank (siehe Schritt 1.1) scharf ist, und drücken Sie unmittelbar vor dem Transfer der Person in den Aggressionstank auf dem Gerät auf Aufnahme. Übertragen Sie fokale Fische durch Schröpfen aus dem Akklimatisierungsbecken in das Aggressionsbecken.
   Anmerkung: Es ist wichtig, vor dem Eintritt des Fisches in das Aggressionsbecken aufzuzeichnen, um den genauen Zeitpunkt des Eintritts zu verfolgen.
5. Nehmen Sie das Aggressionsbecken für 10 min und 30 sec auf und bringen Sie dann den Fokusfisch aus dem Aggressionsbecken zurück in das Akklimatisierungsbecken.
6. Warten Sie beim Ansehen der Aufzeichnung 30 Sekunden, nachdem der Fisch als zusätzliche Eingewöhnungsphase in das Aquarium eingeführt wurde, bevor Sie das Verhalten bewerten.
7. Unter Verwendung des JWatcher-Bewertungssystems, das für aggressive Verhaltensweisen definiert ist, quantifizieren Sie die folgenden Verhaltensweisen für 10 Minuten: Zeit, die in der Nähe des Spiegels verbracht wird, Anzahl der Spiegelannäherungen, Anzahl der Pfeile, Anzahl der Bissversuche (Öffnen des Mundes in Richtung des Spiegels) und Anzahl der seitlichen Darstellungen (Erektion der Rücken-, Brust-, Anal- und Schwanzflosse).
8. Bewerten Sie einen einzelnen Aggressionsassay mindestens zweimal, bis der Assay mit hoher Übereinstimmung zwischen den Iterationen bewertet wird.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
19 L rechteckiger Tank	Dieser Fischplatz	211932
ArtMinds Quadratischer Spiegel, Vorteilspaket 3" x 3"	Michaels	10334162
Zebrafisch-Rack-System	Aquaneering Inc	ZS550
Nikon AF Nikkor 35-105 mm f/305~4.5s MACRO Objektiv	Nikon Corporation	Na
Hitachi KP-D20A CCD-Kamera	Prescott's, Inc.	Na
Jwatcher	Na	Na