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Paarung und Eizellimplantation: Eine Methode, um Embryonen zu erzeugen und sie nach Entwicklungsstadien zu sortieren

April 30th, 2023

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Abstract

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Quelle: Hostelley T.L., et al. Probenvorbereitung und Analyse von RNASeq-basierten Genexpressionsdaten aus Zebrafischen. J. Vis. Exp. (2017)

Der Artikel beschreibt ein Protokoll zur Erzeugung von Zebrafischembryonen durch natürliche Paarung und Sortierung ihrer Entwicklungsstadien. Das Protokoll wird weiterhin für die Analyse von Pankreas-β-Zellen unter Verwendung transgener Fische verwendet.

Protocol

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

>1. Erzeugung von Embryonen durch natürliche Paarung

  1. Kultivierung von Embryonen bis zu einem Alter von 3 Monaten, reproduktive Reife.
  2. Trennen Sie erwachsene männliche und weibliche Fische vom gewünschten Stamm am Abend vor der Embryoentnahme in geteilte Paarungsbecken und fügen Sie jedem Becken 2 Männchen und 3 Weibchen hinzu.
    HINWEIS: Die Verwendung des transgenen fluoreszierenden Reporterstamms insulin2a:mCherry ermöglichte die Analyse von Pankreas-β-Zellen.
  3. Setzen Sie die Fische mit frischem Systemwasser in das Begattungsbecken um und entfernen Sie die Trennwand sofort, n....

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
ins2a:mKirscheZIRC ZL1483
Passende Tanks 1.0L Kreuzungstank Set Aquaneering ZHCT100
Präpariermikroskop Zeiss

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Zebrafish EmbryosMating TankEmbryo CollectionDevelopmental StagingSomite NumberTransgenic FishDissecting MicroscopeEmbryo MediumNatural MatingEgg Sorting

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