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Methodenartikel

Dissektion von Augenlinsen: Eine Technik zur Beobachtung der Morphologie von Zebrafischlinsen

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30. April 2023

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Quelle: Vorontsova I. et al, Bewertung der Lokalisation des Zebrafischlinsenkerns und der Suturalintegrität. J. Vis. Exp. (2019).

Dieses Video beschreibt das Protokoll, das entwickelt wurde, um adulte und larvale Zebrafischlinsen zu präparieren, um die kortikale Linsenmorphologie und strukturelle Integrität der Linsennähte zu analysieren.

Protokoll

>1. Sezieren von Zebrafischlarven und adulten Zebrafischlinsen

  1. Betäuben Sie Fische von 6 dpf Larven bis zum Erwachsenenalter mit Tricain, bis sie nicht mehr auf Berührungen reagieren, aber immer noch einen starken Herzschlag zeigen. Messen Sie die Standardlänge der Fische nach Schilling (2002) für die Inszenierung.
  2. Sofort die Augen mit einer Mikrodissektionsschere herausschneiden und in eine Sezierschale bei PBS legen (Abbildung 1 für erwachsene Augen gezeigt).
    1. Stellen Sie eine benutzerdefinierte 35-mm-Schale her, die mit Silikon gefüllt ist, um Linsen zu dissektionieren. Sobald das Si....

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Ergebnisse

Mikroskopbilder für Fischaugen-Seziermikroskope; Vorder-/Hinteransichten, Entfernung der Linse, 2 mm Maßstabsleisten.
Abbildung 1: Dissektion der Zebrafisch-Linse. (A) Die Augen werden von anästhesierten Fischen präpariert und mit der hinteren Seite nach oben (B) platziert. (C) Die Augen werden durch eine Pinzette über die Papille (od) ruhiggestellt und zwei bis drei radial.......

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS)Fisher ScientificNr. BP399
Mikrotiterschale mit Glasboden (35 mm Petrischale, 14 mm Mikrowelle, #1,5 Deckglas)MatTek CorporationP35G-1.5-14-C
Dumont #5 PinzetteDumont & FilsHalten Sie die Pinzette geschärft
Vannas MikrodissektionsschereTed Pella IncNr. 1346Scharfe/scharfe gerade Spitzen
Konfokales MikroskopNikonEclipse Ti-E
Natriumhydroxid-KügelchenFisher ScientificNr. S612-3VORSICHT - ätzend/reizend für Augen und Haut, Zielorgan - Journal of Visualized Experiments www.jove.com Copyright © 2019 Journal of Visualized Experiments Seite 2 von 2 Atmungssystem, korrosiv gegenüber Metallen
Einweg-Pasteur-GlaspipettenFisherbrand13-678-20A

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