Ganzzell-Patch-Clamp-Elektrophysiologie: Eine Methode zur Untersuchung der elektrischen Eigenschaften von Neuronen

Zusammenfassung

Quelle: Roy, B., et al. Patch Clamp Aufnahmen von embryonalen Zebrafisch-Mauthner-Zellen. J. Vis. Exp. (2013).

Dieses Protokoll beschreibt eine Technik namens Ganzzell-Patch-Clamp-Elektrophysiologie, die eine Methode zur Untersuchung der elektrischen Eigenschaften von Mauthner-Neuronen und anderen retikulospinalen Zellen in Zebrafischembryonen ist.

Protokoll

1. Patch Clamp-Aufnahme (Ganzzellen-Modus)

1. Alle Aufnahmen werden im Ganzzellen-Patch-Clamp-Modus durchgeführt. Die Aufnahmekammern werden in einem elektrophysiologischen Aufbau auf einem Mikroskoptisch platziert. Unsere Tische sind fest und das aufrechte Patch-Clamp-Mikroskop wird mit einer beweglichen Mikroskopplattform oder einem Mikroskop-Translator verschraubt.
2. Die Patch-Clamp-Pipetten werden an einem horizontalen Abzieher (P-97; Sutter Instruments Co.) aus dünnwandigem Borosilikatglas, das aus WPI gewonnen wird. Die Durchmesser der Pipettenspitze liegen in der Größenordnung von 0,2 bis 0,4 μm nach dem Feuerpolieren zu einer ....

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Pipetten-Abzieher	Sutter Instruments Co	P-97
Aufrechtes Patch-Clamp-Mikroskop	Leica Mikrosysteme	DMLFSA
Verstärker	Molekulare Bauelemente	200 Mrd.
Mikromanipulator	Siskiyou Inc.	MX7500