Ganzzell-Patch-Clamp-Elektrophysiologie: Eine Methode zur Untersuchung der elektrischen Eigenschaften von Neuronen

- Legen Sie zunächst eine Aufnahmekammer mit einer Probe in einer Badlösung, deren Zusammensetzung der physiologischen extrazellulären Umgebung oder dem Zytoplasma entspricht, auf einen Mikroskoptisch. Schieben Sie die Aufzeichnungsmikropipette, eine Pipette mit einer Silberelektrode, die in einer Elektrolytlösung gebadet ist, die die intrazellulären Bedingungen nachahmt, durch Anlegen von positivem Druck in Richtung des Neurons und nehmen Sie Kontakt mit der Zellmembran auf.

Wechseln Sie vorsichtig von Über- auf Unterdruck, um eine dichte Abdichtung zwischen der Membran und der Pipette zu bilden. Stellen Sie ein Haltepotenzial am Verstärker ein, um die Zelle auf einer konstanten Spannung zu halten. Dann brechen Sie die Zellmembran innerhalb der Mikropipette durch Saugen auf.

Sobald die Zellmembran reißt, bewirkt das Haltepotential, dass Ionen durch spannungsgesteuerte Ionenkanäle fließen, wodurch ein Membranpotential entsteht, das von der Aufzeichnungselektrode aufgezeichnet wird. Erfassen Sie sofort das Membranpotential. Die Aufzeichnungselektrode überträgt das Signal an den Rückkopplungsverstärker, der das Membranpotential vom Haltepotenzial subtrahiert - ein Oszilloskop, das ei