zPDX-Analyse der Invasivität: Untersuchung des invasiven Verhaltens von metastasierten Krebszellen in Zebrafischembryonen Xenotransplantaten

Zusammenfassung

Quelle: Ren, J. et al. invasives Verhalten menschlicher Brustkrebszellen im embryonalen Zebrafisch. J. Vis. Exp. (2017).

Dieses Video beschreibt eine Mikroinjektionsmethode für die Verabreichung von Brustkrebszellen in den perivitellinischen Raum von transgenen Zebrafischembryonen. Nach der Inkubation visualisieren wir den Embryo unter einem Fluoreszenzmikroskop, um die Invasion, Verbreitung und Metastasierung von Krebszellen zu beobachten.

Protokoll

>1. Den Metastasierungsprozess abbilden und analysieren

1. Entnehmen Sie mehrere betäubte Embryonen mit einer Pasteur-Pipette mit breiter Spitze und übertragen Sie sie auf den Glasboden einer Styroporschale.
2. Entfernen Sie überschüssiges Wasser und bewahren Sie eine begrenzte Menge Eiwasser auf. Manipulieren Sie den Embryo mit einem Haarschlaufenwerkzeug in Position und legen Sie eine Abdeckung auf das Glas.
3. Verwenden Sie ein inverses konfokales Mikroskop in Kombination mit Wasserimmersions- oder Trockenobjektiven mit großer Entfernung. Positionieren Sie den Embryo so, dass der interessierende Bereich so nah wie möglich am Z....

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Pasteur-Pipette mit breiter Spitze (0,5-20 μl)	Eppendorf	F276456I
Konfokales Mikroskop	Leica	SP5 STED
Stereomikroskop	Leica	MZ16FA
Tg (fli:EGFP) Zebrafisch-Stamm			Mit freundlicher Genehmigung von Dr. Ewa SnaarJagalska (Institute of Biology, Leiden University, Leiden, Niederlande)
Styroporschale mit Glasboden	WillCo	GWST-5040
Fluoreszierendes Stereomikroskop	Leica	M165 FC
Tricain (3-Aminobenzoesäure)	SigmaAldrich	Nr. A-5040