zPDX-analyse av invasivitet: Undersøke invasiv oppførsel av metastatiske kreftceller i sebrafisk embryo xenografter
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Ren, J. et al. Invasiv oppførsel av humane brystkreftceller i embryonal sebrafisk. J. Vis. Uttr. (2017).
Denne videoen beskriver en mikroinjeksjonsmetode for levering av brystkreftceller i perivitellinerommet til transgene sebrafiskembryoer. Etter inkubasjon visualiserer vi embryoet under et fluorescerende mikroskop for å observere kreftcelleinvasjon, formidling og metastase.
Protocol
1. Bilde og analyser den metastatiske prosessen Samle flere bedøvede embryoer med en bred spiss Pasteur pipette og overfør dem til glassbunnen på en polystyrenfat. Fjern overflødig vann og hold en begrenset mengde eggvann. Manipulere embryoet på plass med et hårsløyfeverktøy og legg et deksel på toppen av glasset. Bruk et invertert konfektmikroskop i kombinasjon med vanninnlevelse eller langdistanse tørre mål. Plasser embryoet slik at interesseområdet er så nær…
Offenlegungen
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Wide-tip Pasteur pipette (0.5-20 µL) | Eppendorf | F276456I | |
| Confocal microscope | Leica | SP5 STED | |
| Stereo microscope | Leica | MZ16FA | |
| Tg (fli:EGFP) zebrafish strain | Kindly provided by Dr. Ewa SnaarJagalska (Institute of Biology, Leiden University, Leiden, The Netherlands) | ||
| Polystyrene dish with glass bottom | WillCo | GWST-5040 | |
| Fluorescent stereo microscope | Leica | M165 FC | |
| Tricaine (3-aminobenzoic acid) | SigmaAldrich | A-5040 |
Diesen Artikel zitieren
zPDX-Analysis of Invasiveness: Investigating Invasive Behavior of Metastatic Cancer Cells in Zebrafish Embryo Xenografts. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20219, doi: (2023).